英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
多发性骨髓瘤（MM）是一种无法治愈的血液恶性肿瘤，其特点是恶性浆细胞克隆性增殖，与大多数患者产生单克隆免疫球蛋白有关。细胞因子白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-10、干扰素-α和B细胞活化因子（BAFF）在促进MM细胞生长和耐药中的作用已得到明确阐述。越来越多的证据表明BAFF影响MM细胞的生长、存活、迁移和耐药性。B细胞成熟抗原（BCMA）是BAFF …
阅读更多 »RNA转染（Entranster）与多肿瘤相关microRNA调控树突状细胞的存活和寿命研究
树突状细胞（DCS）包括传统的DCS和浆细胞样DCS，是诱导适应性免疫和耐受性的关键性的APC。然而，成熟的DCs也在不同组织和器官中发生凋亡，尤其是淋巴结。DC凋亡是调节耐受和免疫平衡的重要事件。肿瘤使用广泛的免疫抑制策略，如降低树突状细胞（DCS）的寿命和存活率，以减少免疫应答并限制免疫治疗的效果。现分享一篇RNA转染（Entranster）与多肿瘤相关 …
阅读更多 »电转染试剂对比
由此可见，在转染各类细胞系时，Entranster－E具有明显的优势，是一款比较理想的电转染试剂。
阅读更多 »siRNA转染过程中常见问题及解答
1.RNA与转染试剂比例不佳 由于RNA序列差异、合成条件不同以及是否带有荧光等标记，决定了RNA和转染试剂在不同情况下会有不同的最佳条件，建议先进行预实验优化。 2. 细胞密度不佳 调整细胞密度到转染时汇合度为20-40%。成功转染siRNA的细胞会产生目标基因表达下调，但未成功转染的细胞却不受影响，这时转染效率和总的细胞数量就很重要，一般细胞数量较少时转 …
阅读更多 »怎样做好siRNA细胞转染实验
1.纯化siRNA siRNA的浓度和纯度对转染实验非常重要。为得到高纯度的siRNA，推荐用玻璃纤维结合，洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸，小的寡核苷酸，蛋白和盐离子。注意：化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化（即PAGE胶纯化）。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致siRNA转染实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在，如皮 …
阅读更多 »RNA转染与水通道蛋白1和肺动脉平滑肌细胞迁移研究
肝肺综合征（HPS）以肺内血管扩张（IPVD）引起的动脉氧合缺陷为特征。肺血管重塑（PVR）是IPVD的一个重要病理特征，然而，有关该过程的内在机制的细节尚不明确。现分享一篇RNA转染（Entranster）与水通道蛋白1和肺动脉平滑肌细胞迁移研究的文献，以供参考。
阅读更多 »体内转染siRNA敲降TREM2与神经炎症和认知障碍研究
作为衰老过程中的主要特征，神经性炎症参与几种与衰老相关疾病的发病机制，包括阿尔茨海默氏病（AD）。触发受体表达髓系细胞（TREM）2是一种新的AD致病基因，但是关于TREM2在与衰老相关的神经炎症、认知障碍等方便研究不足。现分享一篇运用体内转染siRNA（Entranster-in vivo）敲降TREM2的 …
阅读更多 »体内转染与NIX/BNIP3L通路在大鼠创伤性脑损伤中潜在作用研究
NIX/BNIP3L被称为促凋亡蛋白，也与有丝分裂有关。以往的研究表明，NIX可能参与脑出血后的神经元凋亡，但在缺血性脑损伤的二尖瓣病变中也起到保护作用。NIX在治疗创伤性脑损伤中的作用尚不清楚。现分享一篇体内转染（engreen）与NIX/BNIP3L通路在大鼠创伤性脑损伤中的潜在作用研究的文献，以供参考。 文献地址：https://journ …
阅读更多 »转染荧光效果良好，但是24小时qpcr没有敲低，是要延长收样时间吗？
这是个很实际的问题。在转染实验中，荧光标记良好说明转染效率高，但如果qPCR在24小时没有观察到预期的基因敲低效果，可能存在以下几种情况： 1. 延长收样时间可能是一个方向 有些siRNA或shRNA介导的敲低效果在48小时甚至72小时后才会明显，因为： mRNA的半衰期可能较长； 敲低并不等于马上降解已有的mRNA； 目标蛋白的表达也可能滞后。 建议： 设 …
阅读更多 »shRNA转染后，什么时候做RT-PCR最好?
shRNA转染后，进行RT-PCR的最佳时间取决于多种因素，包括细胞类型、转染效率、shRNA的表达和目标基因的降解速度。一般来说，在转染后的24到72小时内进行RT-PCR是比较常见的时间点。具体来说： 24小时后：在这个时间点，可以开始检测到shRNA的表达以及目标基因的初步下调情况。对于一些高效的shRNA，这个时间点可能已经有显著的基因沉默效果。 4 …
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