英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
髓系来源的抑制性细胞（MDSC）介导了广泛而深刻的免疫抑制，特别是对T细胞功能的影响。在小鼠中，MDSC的特征是细胞表面分子Gr1(包括巨噬细胞和中性粒细胞标志物Ly6C和Ly6G)和CD11b的表达；在人类中，MDSC通常是CD11b+CD33+HLA-DR2。小鼠CD11b+Gr1+细胞群由两个亚群组 …
阅读更多 »体内转染（Entranster）与大鼠神经细胞凋亡和神经功能受损研究
创伤性脑损伤（TBI）是导致年轻人死亡的主要原因，具有高死亡率和发病率。在TBI期间，神经元细胞死亡不仅是导致神经功能缺损最重要的因素，也是严重影响颅脑损伤患者的生活质量的一个关键因素。现分享一篇体内转染（Entranster）与大鼠神经细胞凋亡和神经功能受损研究的文献，以供参考。
阅读更多 »CCK8实验，如何设定空白对照组？
在不含细胞的培养基中加入CCK8，培养一定的时间，测定450 nm的吸光度即为空白对照。在做加药实验(细胞毒性实验)时，还应考虑药物的吸收，可在不含细胞，加入药物的培养基中加定的时间，测定450 nm的吸光度作为空白对照。 如需了解更多关于cck8产品的信息，请点击https://www.engreen.com.cn/cck-8-kit
阅读更多 »体内转染miRNA-130b（Entranster）减轻血管炎症研究
血管内皮由单层内皮细胞组成，是血液和所有组织之间的重要界面。EC是一种典型的多功能细胞，具有重要的基础和诱导代谢和合成功能。当暴露于物理和化学信号，细胞能够产生一个广泛的，可以调节多种生理过程的因素，包括血流量、血管张力、细胞粘附、抗血栓和血管平滑肌细胞增殖。内皮细胞的异常活化和功能障碍与各种血管炎症性疾病有关，如脓毒症、动脉粥样硬化、糖尿病、 …
阅读更多 »在CCK8显色过程中，如何终止反应？
有以下几种方法（96 孔板）： ①在显色反应后，将培养板放置4℃冰箱内。②每孔加10μl 0.1 M HCL 溶液。③每孔加10μl 的 1%（w/v）的SDS（十二烷基硫酸钠）溶液。注意：反应停止后，应在24 小时之内测定。 如需了解更多关于CCK8产品的信息，请点击https://www.engreen.com.cn/cck-8-kit
阅读更多 »转染荧光效果良好，但是24小时qpcr没有敲低，是要延长收样时间吗？
这是个很实际的问题。在转染实验中，荧光标记良好说明转染效率高，但如果qPCR在24小时没有观察到预期的基因敲低效果，可能存在以下几种情况： 1. 延长收样时间可能是一个方向 有些siRNA或shRNA介导的敲低效果在48小时甚至72小时后才会明显，因为： mRNA的半衰期可能较长； 敲低并不等于马上降解已有的mRNA； 目标蛋白的表达也可能滞后。 建议： 设 …
阅读更多 »IFN-γ诱导瘢痕疙瘩成纤维细胞（KFs）铁死亡机制研究
文献：IFN-γ could induce ferroptosis in keloid fibroblasts by inhibiting the expression of serpine2 期刊：Cell Death Discovery 影响因子：6.1 实验意义 本研究揭示了IFN-γ通过调控serpine2-system Xc⁻轴诱导瘢痕疙瘩成纤维细 …
阅读更多 »DNA转染（Entranster）与三疣梭子蟹CacyBP基因的克隆研究
三疣梭子蟹是一种重要的商业蟹类，广泛分布于韩国、日本、中国、南洋和印度洋。虽然这种海蟹能够在不同的盐度条件下生存，但不同的盐度条件可能影响其分布和迁移途径。盐度也是影响梭子蟹人工繁殖的一个重要因素，特别是在幼虫发育和蜕皮阶段。因此，研究三疣梭子蟹耐受环境盐度变化的遗传机制，有利于蟹类的人工繁殖。现分享一篇DNA转染（Entranster）与三疣梭子蟹钙中周期 …
阅读更多 »问：现在是将构建好的质粒电转入到自制的感受态细胞里，质粒有10000bp，是90μL感受态细胞中加3.5μ质粒。我之前有电转过6000多bp的质粒，过夜培养可以长菌的。但是这个10000bp的质粒过夜培养没有单菌落，延长培养时间后有个别单菌落，但是挑单菌落到LB中并不浑浊。这种情况我是应该调整一下电转程序还是改一下加入质粒的量呢？
以下是详细的优化建议： 优化质粒用量（首要调整）： 问题： 你目前使用的是3.5µL质粒加入90µL感受态细胞。关键在于质粒的浓度（ng/µL），而不是体积。 3.5µL 对于90µL感受态细胞来说体积不小，如果质粒浓度较高，实际DNA量可能大大超过电转最优范围。 原理： 过量的DNA会导致电击时产生过多的热量和离子效应，严重降低转化效率，尤其对大质粒（&g …
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