英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
食管癌在中国是一种常见的癌症。手术是食管癌的主要治疗手段，但放疗和化疗在临床分期上也有广泛的应用。放射治疗通常与化疗和靶向治疗相结合。然而，放射治疗效果仍然令人不满意，放射抗性在临床治疗中非常普遍，导致可能的治疗失败。因此，迫切需要提高放射敏感性的策略。现分享一篇ECL发光液（en …
阅读更多 »细胞转染siRNA后，目标基因的表达反而升高的原因是什么？
siRNA转染后目标基因不降反升的现象可能由多种原因引起，常见的因素包括： siRNA设计不合理： siRNA的靶点选择不佳，未能有效靶向目标基因的mRNA，导致抑制效果差或反而激活了基因表达。可以尝试设计不同的siRNA靶点或使用更为优化的siRNA工具进行设计。 转染效率问题： 低转染效率可能导致siRNA无法进入足够多的细胞，从而未能有效抑制目标基因。 …
阅读更多 »体内转染与血红素氧合酶-1和中性粒细胞气道炎症研究
过敏性哮喘通常被认为是以嗜酸性炎症为特征的Th2免疫应答。最近的研究表明，Th17细胞在非嗜酸性粒细胞哮喘（NEA）的发病机制中起重要作用，可导致类固醇耐药的中性粒细胞气道炎症。血红素氧合酶-1（HO-1）具有抗炎、抗氧化和抗凋亡作用。然而，其在NEA中的作用尚不清楚。 现分享一篇体内转染（Entranster）与血红素氧合酶-1对卵清蛋白诱导的中性粒细胞气 …
阅读更多 »siRNA细胞转染注意事项
为了达到高的转染效率，在转染实验过程中，需要注意以下几点： 1.纯化siRNA siRNA的浓度和纯度对转染实验非常重要。为得到高纯度的siRNA，推荐用玻璃纤维结合，洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸，小的寡核苷酸，蛋白和盐离子。注意：化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化（即PAGE胶纯化）。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致 …
阅读更多 »病毒感染增强剂Envirus使用时出现细胞毒性怎么办？
出现细胞毒性的原因有： 1.增强剂用量过大。建议适当减少增强剂用量。 2.病毒量过大。适当减少病毒用量。 3.适当减少病毒用量。增加培养基量或更换培养基。
阅读更多 »mRNA细胞转染实验步骤
下面以Entranster-R4000试剂为例，说一下mRNA转染步骤（24孔板） 1.提前1天细胞种植 贴壁细胞：提前一天将细胞种植在24孔板中，以转染时细胞汇合度（Confluence）在30％左右为宜，转染前全培养基总量为0.45ml。 悬浮细胞：采用对数生长期的细胞，数量为常规培养细胞数的1/3进行转染实验。如某细胞常规培养的细胞数是6×105，那么 …
阅读更多 »慢病毒感染贴壁细胞实验方法
1.提前一天细胞铺板 提前一天种植细胞，以感染时细胞融合度在50%左右为宜(悬浮细胞根据需要调整，不要采用过高的细胞密度)。 感染实验 ⑴将EnvirusTM-LV用无血清稀释液稀释(用量参见下表)，充分混匀，制成增强剂稀释液。 ⑵将病毒浓缩液用无血清稀释液稀释(用量参见下表)，充分混匀，制成病毒稀释液。 注：由于病毒浓度情况不同，具体病毒浓缩液用量酌情依据 …
阅读更多 »ECL发光液（enlight）与间充质信号转导和牙源性上皮干细胞稳态研究
在小鼠中，出生后切牙的持续生长是由位于切牙的近端的牙乳头间充质细胞和牙上皮干细胞协调这两个群体的多能祖细胞所协调的。但两者之间合作的分子机制在很大程度上是未知的。现分享一篇ECL发光液（enlight）与间充质信号转导和牙源性上皮干细胞稳态研究的文献，以供参考。
阅读更多 »siRNA转染与卫星胶质细胞中P2X7受体研究
嘌呤信号能够引起炎症和免疫反应。卫星胶纸细胞（SGCs）中的P2X嘌呤受体7（P2X7）的激活可能是促进炎症和神经性疼痛中一个必不可少的组成部分。长链非编码RNAs（lncRNAs）参与多种生理和病理过程。现分享一篇针对lncRNA BC168687的小干扰RNA（Entranster）对高糖和高游离脂肪酸环境下卫星胶纸细胞P2X7受体表达的影响的文献，以供 …
阅读更多 »体内转染（Entranster）与针灸抑制TXNIP相关氧化应激和炎症以减轻血管性痴呆大鼠认知功能障碍研究
氧化应激和炎症与血管性痴呆（VD）的发病机制有关。硫氧还蛋白相互作用蛋白（TXNIP）在氧化应激和NOD样受体蛋白（NLRP3）炎性体激活中起重要作用。有证据表明针灸在VD中具有抗氧化和神经保护作用。现分享一篇体内转染（Entranster）与针灸抑制TXNIP相关氧化应激和炎症以减轻血管性痴呆大鼠认知功能障碍研究的文献，以供参考。
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