做Western Blot发光实验经常有“背景太高”问题的出现,要弄清楚“背景太高”的原因,先要知道“背景”是什么,“背景”也是发光,影响发光的因素就会影响背景。 影响发光的因素主要有:1.含HRP的抗体;2.发光试剂;3.和发光试剂反应的杂质,如含杂质的膜。这里面,在很短时间内曝光造成的背景多是由于含HRP的抗体的因素造成的,抗体浓度过高,洗涤不充分,封闭 …
阅读更多 »Neuropharmacology | 中国药科大学姚文兵教授团队报道:治疗阿尔兹海默症的新视角
姚文兵教授团队在《Neuropharmacology》期刊上发表了“MicroRNA-23b attenuates tau pathology and inhibits oxidative stress by targeting GnT-III in Alzheimer’s disease”的论文,揭示了MicroRNA-23b对阿尔兹海默症 …
阅读更多 »ECL发光液(enlight)与BMP9通过下调PI3K/Akt信号通路抑制乳腺癌细胞生长研究
乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤,起源于乳腺上皮组织。近年来,乳腺癌的发病率逐年增加,已成为世界第二大常见癌症。骨形态发生蛋白9(BMP9)是BMP家族成员,参与肿瘤发生、发展和转移的调控,为了探讨BMP9是否通过PI3K/Akt信号通路抑制MDA-MB-231乳腺癌细胞的生长,现分享一篇ECL发光液(enlight)与BMP9通过下调PI3K/Akt信号通路抑 …
阅读更多 »如何选择腺病毒、慢病毒、腺相关病毒?
病毒表达系统 腺病毒(Adenovirus) 慢病毒(Lentivirus) 腺相关病毒(Adeno-As sociate virus) 病毒基因组 双链DNA病毒 RNA病毒 单链DNA病毒 复制 条件复制 不可复制 条件复制 滴度 最高可达1012pfu/ml 最高可达109TU/ml 最高可达1012-13v.g/ml 感染细胞类型 感染分裂和不分裂细 …
阅读更多 »做好RNA转染的几点建议
1.纯化RNA 在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白和盐离子。注意:化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化(即PAGE胶纯化)。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致RNA实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在,如皮肤,头发,所有徒手接触过 …
阅读更多 »体内转染与膜联蛋白A7和大鼠继发性脑损伤研究
谷氨酸兴奋性中毒参与了脑出血(ICH)引起的继发性脑损伤(SBI)。突触体相关蛋白23(SNAP23)和SNAP25分别参与突触前谷氨酸的释放和突触后谷氨酸受体(NMDA受体)运输,这两者对于谷氨酸介导的兴奋性毒性都是必不可少的。SNAP23和SNAP25具有较高的同源性,SNAP23被证明可与膜联蛋白A7(ANXA7)相互作用。现分享一篇体内转染(Entr …
阅读更多 »细胞DNA转染效率低的原因
DNA转染效率低的原因可从以下几方面找: 1.质粒DNA或混和液中含有血清。 对策:用无血清培养基或Opti-MEM培养基。 2.质粒DNA和转染试剂的比率不是最优 对策:对大多数细胞而言,质粒DNA和转染试剂的比例为1:2-1:3,一般要做优化实验,比例从1:0.5-1:5 逐一检测。 3.质粒DNA 已部分降解或质量不够好 对策:用好的质粒纯化试剂确保质 …
阅读更多 »体内转染(entranster)与蛛网膜下腔出血后早期脑损伤研究
钠/氢交换因子1(NHE1)在生理条件下维持中枢神经系统(CNS)的细胞内PH(phi)稳态中起着重要作用,并与脑缺血引起的神经元死亡和细胞内Na离子和Ca离子超载有关。然而,其在蛛网膜下腔出血(SAH)诱发的早期脑损伤(EBI)中的作用和潜在机制尚未得到充分探讨。现分享一篇体内转染(entranster)与蛛网膜下腔出血后早期脑损伤研究的文献,以供参考。 …
阅读更多 »ECL发光液(Enlight)与咪康唑对早产大鼠脑白质损伤的髓鞘保护作用研究
少突胶质细胞(ODNs)是中枢神经系统(CNS)的主要细胞,对神经元功能至关重要。中枢神经系统髓鞘异常是多种神经系统疾病的特征,包括白质损伤、多发性硬化和视神经脊髓炎。脱髓鞘的原因通常包括免疫损伤、兴奋毒性、病毒感染、肌营养不良和氧化应激。现分享一篇ECL发光液(Enlight)与咪康唑对早产大鼠脑白质损伤的髓鞘保护作用研究的文献,以供参考。
阅读更多 »电转染时,指数衰减脉冲形式的电转条件是什么?
对于engreen的Entranster-E电转染试剂,当使用0.4cm比色杯时,大多数细胞类型的指数衰减脉冲条件在200-300V的电压范围和800-1000μF的电容范围内。对于0.2 cm比色杯时,其范围分别为80-160 V和800-1000μF。对于使用0.4 cm比色杯的电穿孔实验,测试电压范围 …
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