PKC-β抑制剂Ruboxistaurin(RBX或βLY333531)可防止糖尿病肾和视网膜微血管并发症。然而,RBX对糖尿病心肌微血管功能的影响尚不清楚。先分享一篇运用siRNA转染(Entranster)的方法与PKC-β抑制剂对糖尿病大鼠心脏微血管功能研究的文献,以供参考。
阅读更多 »电转染实验过程中易出现的问题
不合适的电场强度 合适的电场强度对于电转染实验非常重要,电场强度不能过高,过高会增加细胞的死亡率;也不能过低,过低不能增加膜的通透性或在膜上形成小孔。不同细胞系具有不同的最佳场强值,实验前应测定所转染细胞系的最佳电场强度。 细胞选择错误 用于电转的细胞一般选取处于对数生长期的细胞(15代以内,传代后2d)。因为处于对数生长期的细胞分裂旺盛,表面结构致密比稳定 …
阅读更多 »RNA转染与LncRNA SNHG12对胃癌细胞BGC-823增殖影响的研究
胃癌是一种常见的上皮性癌,是世界范围内最常见的第五种恶性肿瘤。近年来胃癌的发病率一直呈上升趋势。每年约有一百万例胃癌发生,其中东亚地区占到50%,尤其是中国,严重危害人民健康和生命。中国胃癌的年发病率约为400000,占全世界病例总数的42%,并且总死亡率逐年上升。因此,寻找可靠的胃癌标志物和靶点是至关重要 …
阅读更多 »ECL发光液(enlight)与褪黑激素降低吸烟引起的高血糖研究
吸烟是一种不健康的生活习惯。糖尿病是多因素的,与环境因素和生活方式有关。值得注意的是,糖尿病似乎受到吸烟的严重影响,包括稳态模型评估在内的临床流行病学调查表明吸烟可能会干扰血糖平衡,但吸烟对高血糖和β细胞的作用机制尚不清楚。现分享一篇ECL发光液(enlight)与褪黑激素降低吸烟引起的高血糖研究的文献,以供 …
阅读更多 »RNA转染与Cav3通过Wnt信号通路与骨质疏松大鼠模型骨形成研究
骨质疏松症是一种以骨密度和骨强度降低为特征的疾病,常见于老年人。Caveolin-3(Cav3)是caveolae膜结构域的主要结构蛋白,已被报道可参与细胞信号传导和维持细胞结构。现分享一篇RNA转染(entranster)与Cav3通过Wnt信号通路对骨质疏松大鼠模型骨形成的影响研究的文献,以供参考。 文献地址:https://link.spr …
阅读更多 »RNA转染效率低的原因是什么?
RNA转染效率低,可能的原因: · 转染试剂不适合。建议选择RNA专用转染试剂,如Entranster试剂。 · 转染试剂和RNA的量不够,或者比例不对。优化实验条件,调整试剂和RNA用量,优化二者比例。 · 检测时间有问题。适当调整检测时间。 · RNA质量问题。选择纯度高的RNA。 · 细胞状态不佳。调整细胞状态,调整细胞融合度。
阅读更多 »RNA转染与多氯代二苯硫醚诱导活性氧和基因毒性研究
多氯化二苯硫化物(PCDPSS)是一类可以相互作用并激活芳基烃受体(AHR)的化学药物。之前的研究结果表明,PCDPSS可引起肝脏氧化应激。然而,有关PCDPSS基因毒性的信息是有限的。现分享一篇RNA转染(entranster)与多氯代二苯硫醚通过ahrcyp1a1途径可诱导活性氧和基因毒性研究的文献,以供参考。
阅读更多 »问:现在是将构建好的质粒电转入到自制的感受态细胞里,质粒有10000bp,是90μL感受态细胞中加3.5μ质粒。我之前有电转过6000多bp的质粒,过夜培养可以长菌的。但是这个10000bp的质粒过夜培养没有单菌落,延长培养时间后有个别单菌落,但是挑单菌落到LB中并不浑浊。这种情况我是应该调整一下电转程序还是改一下加入质粒的量呢?
以下是详细的优化建议: 优化质粒用量(首要调整): 问题: 你目前使用的是3.5µL质粒加入90µL感受态细胞。关键在于质粒的浓度(ng/µL),而不是体积。 3.5µL 对于90µL感受态细胞来说体积不小,如果质粒浓度较高,实际DNA量可能大大超过电转最优范围。 原理: 过量的DNA会导致电击时产生过多的热量和离子效应,严重降低转化效率,尤其对大质粒(&g …
阅读更多 »ECL发光液与traf1在幽门螺杆菌相关细胞凋亡和胃癌发生中的作用研究
肿瘤坏死因子受体相关因子1(traf1)是traf1家族成员,在动脉粥样硬化、淋巴瘤和实体瘤等疾病中失调,但traf1在胃癌中的作用尚不清楚。现分享一篇ECL发光液(enlight)与traf1在幽门螺杆菌相关细胞凋亡和胃癌发生中的作用研究的文献,以供参考。 文献地址:https://onlinelibrary.wiley.com/doi/abs …
阅读更多 »体内转染(engreen)与幽门螺杆菌感染引起肝胰岛素抵抗研究
胰岛素抵抗与低度炎症状态密切相关,其特征是胰岛素在骨骼肌和脂肪组织中的葡萄糖吸收和肝葡萄糖生成方面的功能受损。幽门螺杆菌已感染世界50%以上的人口,其感染与全身慢性炎症密切相关。胃是幽门螺杆菌感染的主要部位,可引起胃炎、胃溃疡甚至胃癌。然而,幽门螺杆菌感染在周围组织中的作用尚不清楚。流行病学研究表明,幽门螺杆菌感染患者血糖调节受损,2型糖尿病(t …
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英格恩生物技术博客 生物实验干货分享