英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
越来越多的证据表明，细胞焦亡和炎性细胞程序性死亡与动脉粥样硬化有关；然而，其潜在的机制仍有待澄清。二氢杨梅素（Dihydromyricetin，DHM），一种天然的黄酮类化合物，据报道有抗氧化和抗炎的生物活性。然而，DHM对于动脉粥样硬化相关细胞焦亡的影响尚不清楚。现分享一篇RNA转染（Entranster）与二氢杨梅素抑制 NLRP3炎性体依赖的细胞焦亡研 …
阅读更多 »客户问：你好，如果电转以后抗性板子上一个没长，无抗的都长满了，这种情况是没电进去，需要增加次数吗，还是其他原因呢？
回答：“无抗的都长满”，说明细胞活性和数量没问题，基本排除培养条件问题。那么核心矛盾集中在质粒是否成功进入细胞并表达抗性基因。这里有几个关键排查点：质粒浓度是否足够（建议>100ng/μL）、抗性基因是否匹配（如氨苄不能用于表达AmpR的质粒）、抗性板浓度是否正确（过高会杀死阳性克隆）。 特别注意的是检查质粒纯度。实验室常用乙醇沉淀法提质粒，但残留的盐 …
阅读更多 »质粒DNA细胞转染注意事项
质粒的构建：启动子的选择 启动子的选择对于转染基因的有效表达是非常重要的。对于转染过程本身虽然无甚影响，但是对转染结果却有着微妙的影响。 质粒的大小和质量 线性化还是超螺旋会影响转染结果：超螺旋质粒的转染效率比线性DNA高得多，特别是瞬时转染。而线性化DNA转染的整合几率高。质粒太大了转染会困难一些。毕竟，相对致密、较小的外源异物被细胞内吞的几率要大一些。如 …
阅读更多 »如何做好细胞电转染实验？
要想做好细胞的电转染实验，应注意以下几点： 1. 选择合适的电场强度 合适的电场强度对于电转染实验非常重要，电场强度不能过高，过高会增加细胞的死亡率；也不能过低，过低不能增加膜的通透性或在膜上形成小孔。不同细胞系具有不同的最佳场强值，实验前应测定所转染细胞系的最佳电场强度。 2. 选择合适的细胞 用于电转的细胞一般选取处于对数生长期的细胞（15代以内 …
阅读更多 »RNA转染（Entranster）与肠黏膜屏障的信号转导和细菌移位研究
肠上皮表面由一层柱状上皮细胞构成，形成一个与大多数管腔内细菌直接接触的屏障，在防止细菌易位中起着重要作用。肠上皮屏障功能在炎症性肠病（IBD）的发病机制中起着至关重要的作用，但其机制尚未完全阐明。现分享一篇RNA转染（Entranster）与肠黏膜屏障的信号转导和细菌移位研究的文献，以供参考。
阅读更多 »体内转染（entranster）与细胞自噬和大鼠缺血性损伤研究
卒中尤其是缺血性卒中，可能导致严重的神经功能障碍，甚至死亡，在世界范围内有较高的发病率和死亡率。脑缺血后神经元凋亡、自噬、坏死等形态学变化产生细胞死亡的复杂特征。细胞自噬参与了II型程序性细胞死亡，并且在脑缺血中，自噬作用在累积。自噬作用是复杂的，取决于大脑的成熟度，区域的缺血严重程度等。现分享一篇运用体内 …
阅读更多 »30个关于CCK-8的Q＆A
Q1: 一个孔中应接种多少个细胞？ A1: 当使用标准96孔板时，贴壁细胞的最小接种量至少为1,000 个/孔 (100μl 培养基)。检测白细胞时的灵敏度相对较低，因此推荐接种量不低于2,500 个/孔 (100μl 培养基)。如果要使用24孔板或6孔板实验，请先计算每孔相应的接种量，并按照每孔培养基总体积的10%加入CCK-8溶液。 Q2: 能否用3 …
阅读更多 »PD-1沉默削弱CAR-T细胞抗肿瘤功能
文献标题 PD-1 silencing impairs the anti-tumor function of chimeric antigen receptor modified T cells by inhibiting proliferation activity 影响因子 8.676（Journal for ImmunoTherapy of Cance …
阅读更多 »ECL发光液（enlight）与结直肠癌中硼替佐米抗癌活性研究
多种化疗药物通过激活内源性凋亡信号通路促进肿瘤细胞死亡。这条通路是由线粒体功能障碍调节，这是通过一个复杂的过程，受B细胞淋巴瘤2‑（Bcl‑2）家庭成员和其他细胞蛋白之间复杂的相互作用所控制。Bcl‑2相关X蛋白（Bax）是一种促凋亡蛋白，是内在的细胞凋亡信号通路的重要组成部分。缺乏bax的患者可能由于内源性凋亡信号通路受损而对化疗不那么敏感。现分享一篇EC …
阅读更多 »哪些物质会影响CCK8的测定？
当有还原性物质存在时会影响CCK8 的测定，例如含有维生素C的Glucose 等 (一般培养基中的量不多，酚红或血清不影响测定)。在有酚红存在的情况下，会增加空白吸收，但不影响测定，扣除空白吸收即可。 如需了解更多关于CCK8产品的信息，请点击https://www.engreen.com.cn/cck-8-kit
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