英格恩技术资料

1.纯化siRNA siRNA的浓度和纯度对转染实验非常重要。为得到高纯度的siRNA，推荐用玻璃纤维结合，洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸，小的寡核苷酸，蛋白和盐离子。注意：化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化（即PAGE胶纯化）。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致siRNA转染实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在，如皮 …

    冠状动脉微栓塞（CME）是一种常见的和重要的临床现象，急性冠状综合征（ACS），和那些接受溶栓治疗、经皮冠状动脉介入治疗（PCI）的患者都会出现冠状动脉微栓塞现象。现分享一篇运用体内转染（Entranster-in vivo）方法研究细胞死亡因子4/NF-κB在猪冠状动脉微栓塞引起的心脏功能障碍中的发生机制的文献，以供参考。

       急性肺损伤（ALI）与急性呼吸窘迫综合征（ARDS）是非常严重的临床症状，具有很高的发病率和死亡率。虽然关于ALI和ARDS的治疗策略和相关的呼吸生理取得了重大进展，但是其年死亡率仍然达到了40%，导致巨额的医疗成本。现分享一篇体内转染（Entranster）与小鼠肺部炎症和细胞凋亡研究的文献，以供参考。

糖尿病（diabetes mellitus，ＤＭ）是一组代谢性临床综合征，随着社会的发展和人们生活水平的提高，糖尿病的患病率逐年升高。在发达国家，糖尿病患病率已达３％ ～７％，成为仅次于癌症、艾滋病、心脑血管病之后第４位需要优先考虑的疾病，已成为世界第５位死亡主因。我国糖尿病人群的构成，以２型糖尿病为主，占糖尿病人群的９０％以上，严重影响着人民健康和社会发展 …

去分化软骨肉瘤（DDCs）是一种特殊类型的肉瘤，约占传统软骨肉瘤（CCS）的10%～15%。DDCs是一种由两种不同成分组成的肿瘤，一种与低级别CCS相邻的恶性肿瘤，两部分之间有清晰的边界。由于早期转移而对化疗缺乏反应，DDCS预后差，5年生存率仅为10%～24%。因此，迫切需要探索CCS发展成为DDCS并找到新的治疗方法。现分享一篇体内转染（Entrans …

        脓毒症是一种危及生命的临床综合征，其特征是同时存在感染和全身炎症反应。脓毒症的常见临床表现与全身炎症反应综合征和器官功能障碍有关，包括血流动力学不稳定、低氧血症和肠屏障功能障碍。此外，肠道内含有内源性和外源性微生物，据报道，这些微生物是脓毒症的潜在病原体，也可能因脓毒症而易受缺血再灌注损伤。肠屏障功能障碍可导致脓毒症继发性细菌移位和多种器官功 …

      暴露与辐射中会引起细胞反应，这可能受到基因表达网络的调控。miRNA是一种小的非编码RNA，通过促进mRNA的降解或抑制蛋白质的翻译来调节基因的表达。在放射性肺损伤中miRNA和mRNA的表达模式还不是很清楚，并且miRNA在这个过程中的作用还未有研究。现分享一篇RNA转染（Entranster）与大鼠肺辐射损伤中microRNA和mRNA表达谱 …

谷氨酸兴奋性中毒参与了脑出血（ICH）引起的继发性脑损伤（SBI）。突触体相关蛋白23（SNAP23）和SNAP25分别参与突触前谷氨酸的释放和突触后谷氨酸受体（NMDA受体）运输，这两者对于谷氨酸介导的兴奋性毒性都是必不可少的。SNAP23和SNAP25具有较高的同源性，SNAP23被证明可与膜联蛋白A7（ANXA7）相互作用。现分享一篇体内转染（Entr …

1. siRNA与转染试剂比例不佳 由于siRNA序列差异、合成条件不同以及是否带有荧光等标记，决定了siRNA和转染试剂在不同情况下会有不同的最佳条件，建议先进行预实验优化。 2. 细胞密度不佳 调整细胞密度到转染时汇合度为20-40%。成功转染siRNA的细胞会产生目标基因表达下调，但未成功转染的细胞却不受影响，这时转染效率和总的细胞数量就很重要，一般细 …

运用动物体内转染试剂Entranster-in vivo进行动物体内转染实验时，由于局部注射容易造成药液分布不均，在注射的近端，药液浓度高，效果明细；远端，药液浓度低，效果低一些。所以，一方面，需要尽量将药液均匀覆盖全部靶组织，另一方面，后续实验取样时，在保证实验的情况下，尽量取注射区域附近的组织，不取或者少取药液覆盖差的组织，以增加实验效果。