2026年 1 月 30日, 星期五
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英格恩技术资料

siRNA转染(Entranster)与成纤维细胞瘤细胞l929-a研究

      L929成纤维细胞瘤细胞(l929-a)和L929纤维肉瘤细胞(l929-n)是不同的细胞系,常用于肿瘤坏死的细胞毒性因子α(TNFα)的研究,TNFa已被报道可诱导两种细胞系的坏死。然而,当比较TNFα诱导的在这两个细胞系的细胞死亡时,l929-n表现出典型的RIP3依赖性细胞坏死,在l929-a中却不是。现分享一篇运用siRNA转染(Entr …

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在比较慢病毒和正常病毒(阳性对照)时,如何合理调整 MOI 值,使其具有可比性?

慢病毒滴度较低,通常需要较高的 MOI(如 20)才能有效感染,而正常病毒滴度较高,合适的 MOI 可能为 0.1。要将两者放在一起进行比较,可能需要考虑以下因素: 实验目的: 如果关注的是相同数量的感染细胞,可以根据感染效率调整 MOI,以保证相似的感染率。 如果关注的是病毒自身的感染特性,可能需要分别选择最佳 MOI 进行单独实验,再综合分析。 病毒载量 …

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直接克隆法构建重组腺病毒基因组

pShuttle 质粒被用来将携带的目的基因转移到腺病毒载体骨架中。步骤1 ~9 阐述了将目的基因克隆到有双筛选系统的pSh-pkGFP 质粒中。目前在使用的pShuttle 或pSh-pkGFP 中包含一个CMV 启动子驱动的表达盒,,可以用来克隆外源基因或替换启动子。1. 在无菌的05mL 离心管中将外源基因载体和pSh-pkGFP 载体分别用以下条件消 …

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RNA转染与丹参酮IIA在肿瘤细胞凋亡中的作用研究

丹参酮 IIA(Tanshinone IIA,Tan IIA)是一种从丹参干根中提取的生物活性物质,具有抑制肿瘤细胞增殖和诱导细胞凋亡的作用。然而,Tan IIA在肿瘤细胞凋亡中的作用机制仍有待进一步阐明。现分享一篇运用RNA转染(Entranster)的方法的文献,通过阐明Tan IIA在p53基因缺陷的H1299细胞中的抗肿瘤作用机制,以确定丹参酮IIA …

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DNA转染与免疫毒素CCL25-PE38抗急性T淋巴细胞白血病实验研究

       白血病在全球发病率呈上升趋势,我国白血病发病率为十万分之三,每年约新增40 000 例患者。白血病表现为骨髓造血组织恶性增生,形成大量异常的白细胞,广泛浸润组织器官,引起多种组织器官不可逆损害,直接威胁患者生命。白血病的转移、复发与白血病细胞及其生长微环境相互作用密切相关。免疫毒素是一种由抗体或细胞因子与化学毒素耦合组成的融合蛋白。通过受体介导 …

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体内转染(Entranster)与TRPM7和肾脏保护作用研究

瞬时受体电位M型7(TRPM7)是一种膜离子通道和激酶。TRPM7在肾脏丰富表达,缺血再灌注损伤(IR)可上调TRPM7的表达。我们以前的研究表明,环螺旋B肽(CHBP)改善肾IR相关的损伤,但其作用机制尚不明确。现分享一篇体内转染(Entranster)与TRPM7和肾脏保护作用研究的文献,以供参考。

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如何达到更好的siRNA转染效率?

为了达到高的转染效率,在转染实验过程中,需要注意以下几点: 1.纯化siRNA siRNA的浓度和纯度对转染实验非常重要。为得到高纯度的siRNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白和盐离子。注意:化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化(即PAGE胶纯化)。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致 …

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