英格恩技术资料

       中国是食管癌（esophageal cancer，EC）高发地区，平均每年有约375000人死于食管癌。手术、放疗和化疗是治疗EC的主要方法。然而，晚期和转移性ECS的总生存率仍然很低，晚期肿瘤的5年生存率低于20%。由于治疗技术的局限性，迫切需要探索一种新的有效的EC治疗方法。之前的研究表明，MIR-203-3P，通过下调RAN和MIR-21 …

本方案介绍一种通过试剂向果蝇S2 细胞转运siRNA 以触发RNA 干扰的有效方法。本方案适用于24 孔板内培养的细胞。如果使用其他规格的多孔板、培养瓶或者培养皿，需要根据培养孔的表面积换算细胞密度和试剂用量（表1 ) 。 表1 果蝇细胞转染所用细胞， 转染试剂和siRNA （或者ASO) 的体积 培养板或培养皿 24孔 12孔 6孔 6cm 10cm 每孔 …

测序正确是一个重要的验证步骤，但它不能完全说明shRNA构建没有问题。下面我会具体说明为什么。 测序正确说明了什么？ shRNA序列（包括发夹结构、目标序列）与设计一致： 如果你对构建后的质粒进行了Sanger测序，序列结果和你设计的shRNA完全一致，这说明你的克隆步骤（连接、转化等）是成功的。这意味着你至少在DNA水平上构建了正确的序列结构。 但这并不代 …

钠/氢交换因子1（NHE1）在生理条件下维持中枢神经系统（CNS）的细胞内PH（phi）稳态中起着重要作用，并与脑缺血引起的神经元死亡和细胞内Na离子和Ca离子超载有关。然而，其在蛛网膜下腔出血（SAH）诱发的早期脑损伤（EBI）中的作用和潜在机制尚未得到充分探讨。现分享一篇体内转染（entranster）与蛛网膜下腔出血后早期脑损伤研究的文献，以供参考。 …

      体外研究骨是困难的，因为它包含参干扰的各种细胞类型。骨生物连接各种器官，因此，骨骼生理学必须以完整的方式在完整的动物中进行研究。现分享一篇体内转染（Entranster）与siRNA沉默和骨骼基因功能评估研究的文献，以供参考。 文献地址：https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC5125699/

siRNA转染效率不理想，常见的原因有： 1. RNA与转染试剂比例不佳 由于RNA序列差异、合成条件不同以及是否带有荧光等标记，决定了RNA和转染试剂在不同情况下会有不同的最佳条件，建议先进行预实验优化。 2. 细胞密度不佳 调整细胞密度到转染时汇合度为20-40%。成功转染siRNA的细胞会产生目标基因表达下调，但未成功转染的细胞却不受影响，这时转染效率 …

      《European Journal of Pharmacology》期刊上最新发表的乳腺癌相关文章“SPTBN1 inhibits growth and epithelial-mesenchymal transition in breast cancer by downregulating miR-21“表明低水平的SPTBN1与乳腺癌的肿瘤生长 …

       炎症性肠病（IBD）与遗传背景、免疫系统和生活方式，包括饮食和其他环境因素有关。它包括溃疡性结肠炎（UC）和Crohn病（CD），以肠慢性炎症为特征。在过去的半个世纪里，IBD的全球发病率稳步上升。有几种药物用于治疗IBD，包括氨基水杨酸盐、皮质类固醇、抗生素和免疫调节剂。然而，这些药物不仅对IBD患者具有有益的作用，而还具有显著的副作用，因此 …

1.纯化RNA 在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA，推荐用玻璃纤维结合，洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸，小的寡核苷酸，蛋白和盐离子。注意：化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化（即PAGE胶纯化）。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致RNA实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在，如皮肤，头发，所有徒手接触过 …

pShuttle 质粒被用来将携带的目的基因转移到腺病毒载体骨架中。步骤1 ~9 阐述了将目的基因克隆到有双筛选系统的pSh-pkGFP 质粒中。目前在使用的pShuttle 或pSh-pkGFP 中包含一个CMV 启动子驱动的表达盒，，可以用来克隆外源基因或替换启动子。1. 在无菌的05mL 离心管中将外源基因载体和pSh-pkGFP 载体分别用以下条件消 …