siRNA转染效率不理想,常见的原因有: 1. RNA与转染试剂比例不佳 由于RNA序列差异、合成条件不同以及是否带有荧光等标记,决定了RNA和转染试剂在不同情况下会有不同的最佳条件,建议先进行预实验优化。 2. 细胞密度不佳 调整细胞密度到转染时汇合度为20-40%。成功转染siRNA的细胞会产生目标基因表达下调,但未成功转染的细胞却不受影响,这时转染效率 …
阅读更多 »CCK8与胸苷结合检测之间是否有相关性?
有。然而,请注意由于CCK8使用的检测原理与胸苷检测的不同,因此结果可能不同。 如需了解更多关于cck8产品的信息,请点击https://www.engreen.com.cn/cck-8-kit
阅读更多 »ECL发光液与肝脂肪变性通过CPT1α激活ras促进肝癌发生研究
RAS级联的异常激活在人类肝细胞癌(HCC)中普遍存在,与ras的罕见突变无关。然而,在肝癌发生过程中,ras级联与肝脂肪变性的关系仍在研究中。现分享一篇ECL发光液(enlight)与饮食诱导的肝脂肪变性通过CPT1α激活ras促进肝癌发生研究的文献,以供参考。
阅读更多 »为什么选择AAV作为基因治疗的病毒载体?
AAV,即腺相关病毒载体,属于细小病毒科依赖病毒属。野生型AAV感染人宿主细胞后,可以整合到人类19号染色体的AAVS1位点,但AAV不会引起人类疾病。实际上,我们市面常见的AAV并不是野生型AAV,而是重组AAV(rAAV)。 AAV和AAV载体的基因组结构(图片来源:Semantic Scholar) 目前来看,rAAV相比较其他病毒载体,未发现 …
阅读更多 »siRNA转染与成纤维细胞瘤细胞l929-a研究
L929成纤维细胞瘤细胞(l929-a)和L929纤维肉瘤细胞(l929-n)是不同的细胞系,常用于肿瘤坏死的细胞毒性因子α(TNFα)的研究,TNFa已被报道可诱导两种细胞系的坏死。然而,当比较TNFα诱导的在这两个细胞系的细胞死亡时,l929-n表现出典型的RIP3依赖性细胞坏死,在l929-a中却不是 …
阅读更多 »体内转染(entranster)与Mir-191靶向作用于vezf1抑制急性缺血性卒中后血管生成研究
急性缺血性脑卒中(Acute ischemic stroke,AIS)是我国的一大公共卫生问题。血管生成障碍在缺血性脑损伤的发展中起着重要作用。最近的研究已经证实,microRNAs(miRNAs)是血管生成的重要调节因子,但对血管生成相关的microRNAs在AIS中的确切作用知之甚少。现分享一篇体内转染(entranster)与Mir-19 …
阅读更多 »siRNA转染进细胞有哪些方法?
siRNA导入细胞有以下几种方法:化学转染技术、电穿孔法、磷酸钙共沉淀技术、显微注射和载体导入技术。选择时应该依据实验条件考虑以下因素:细胞对转入方式的承受能力、细胞对病毒侵染的易感性、细胞的生长特性等。对贴壁细胞来说化学转染技术(Entranster)是最为常用的方法,而对悬浮细胞则采用电穿孔法效果较好 …
阅读更多 »电穿孔转化感受态E.coli TG1细胞的制备
一、材料和试剂 恒温旋转式摇床 三角烧瓶(容量为1或2L) 50ml灭菌离心管 低温高速离心机 SB培养基 细菌培养用胰化蛋白胨 20g 细菌培养用酵母提取物 5g NaCl 0.5g 去离子水 950ml 250mmol/L KCl溶液 10ml 以5N …
阅读更多 »体内转染(entranster)与大鼠早期脑损伤诱导的神经元凋亡研究
早期脑损伤(EBI)诱导的神经元凋亡是导致动脉瘤性蛛网膜下腔出血(ASAH)并发症的主要诱因,并可能会增加ASAH患者的死亡率。c-jun N-末端激酶(JNK)已被证实是EBI诱导的细胞凋亡的启动子,然而其机制尚未完全阐明。现分享一篇体内转染(entranster)与大鼠早期脑损伤诱导的神经元凋亡研究的文献,以供参考。
阅读更多 »GSDMD C端抗病毒免疫机制研究
文献标题 中文:GSDMD C端在对抗I型干扰素信号中被忽视的作用 英文:The Neglected Role of GSDMD C-Terminal in Counteracting Type I Interferon Signaling 影响因子 该文献发表于 Advanced Science(《先进科学》),该期刊2023年影响因子为 15.1(202 …
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英格恩生物技术博客 生物实验干货分享