RNA转染效率低,可能的原因: · 转染试剂不适合。建议选择RNA专用转染试剂,如Entranster试剂。 · 转染试剂和RNA的量不够,或者比例不对。优化实验条件,调整试剂和RNA用量,优化二者比例。 · 检测时间有问题。适当调整检测时间。 · RNA质量问题。选择纯度高的RNA。 · 细胞状态不佳。调整细胞状态,调整细胞融合度。
阅读更多 »相较于MTT法,CCK8试剂盒的优点有哪些?
英格恩生物的CCK8试剂盒具有以下优点: 1.使用方便,省去了洗涤细胞,不需要放射性同位素和有机溶剂; 2.CCK-8法能快速检测; 3.CCK-8法的检测灵敏度很高,甚至可以测定较低细胞密度; 4.CCK-8法的重复性优于MTT 法; 5.CCK-8法对细胞毒性小; 6.CCK-8细胞活性检测试剂中为1瓶溶液,毋需预制,即开即用。 7. 性价比高,比同行的 …
阅读更多 »提高慢病毒感染细胞效率的方法
可使用病毒感染增强剂envirus提高病毒的感染效率,下面以慢病毒为例,说一下实验过程。 1.提前一天细胞铺板 提前一天将细胞种植在24孔板中,以感染时细胞融合度在50%左右为宜(悬浮细胞根据需要调整,不要采用过高的细胞密度)。 2.感染 ⑴将2ul的Envirus-LV用25μl无血清稀释液稀释,充分混匀,制成Envirus-LV稀释液。4℃静置5分钟。 …
阅读更多 »是否有嘌呤霉素筛选标记的病毒的病毒滴定protocol,看了好多好多不一样的?这个有比较权威又大众的滴度操作流程吗?
关于使用嘌呤霉素筛选标记(puromycin resistance marker)的慢病毒(lentivirus)或逆转录病毒(retrovirus)进行病毒滴定(virus titration)的 protocol,确实有不少不同的做法,这是因为不同实验室根据自己的系统和需求进行了优化。但是,有一些权威且广泛应用的标准流程可以作为通用参考,下面是整理的一个 …
阅读更多 »应用多种神经损伤模型探究PRMT6在背根神经节中的作用研究
文章标题:Protein arginine methyltransferase-6 regulates heterogeneous nuclear ribonucleoprotein-F expression and is a potential target for the treatment of neuropathic pain* 《蛋白质精氨酸甲基转 …
阅读更多 »ECL发光液与上皮性卵巢癌差异表达蛋白的鉴定研究
卵巢癌是女性死亡的第五大死因,也是最致命的妇科肿瘤。每年新增卵巢癌病例22280例,死亡率15500例,占女性新增癌症病例的3%和所有癌症死亡病例的6%。卵巢上皮性癌(EOC)由于盆腔脏器位置深,早期诊断困难,因此初诊时60%以上的患者处于晚期。EOC的标准治疗是手术,其次是铂类辅助化疗。虽然EOC的治疗不断改进,但晚期患者的治愈率仍低于5~1 …
阅读更多 »Mdga2缺失导致BDNF/TrkB信号异常激活,从而引发自闭症相关的突触和行为改变
文献标题:Mdga2 deficiency leads to an aberrant activation of BDNF/TrkB signaling that underlies autism-relevant synaptic and behavioral changes in mice 期刊名称:PLOS Biology 影响因子:IF = 9.8( …
阅读更多 »体内转染文章背后的故事
节省时间 河北医科大学附属二院的老师在临床实践中发现在多发性硬化症患者样本中有一个miRNA上调的现象。针对该miRNA的mimics很容易得到,怎么导入动物呢?他们想到了用英格恩动物体内转染试剂,将mimics与体内转染试剂混合后,尾静脉注射小鼠,几天后就可以观察结果,进行PCR,病理等研究,结果发现该miRNA的上调影响到一些免疫细胞的改变,从而导致多发 …
阅读更多 »ECL发光液(enlight)与丹参酮ii-磺酸钠和BKca通道研究
丹参酮ii-磺酸钠(ds-201)是丹参酮ii-a的水溶性衍生物,可诱导血管舒张并激活BKca通道。为了探讨ds-201在BKca通道上的作用机制,现分享一篇ECL发光液(enlight)与丹参酮ii-磺酸钠和BKca通道研究的文献,以供参考。 文献地址:https://www.nature.com/articles/aps201485
阅读更多 »The British Pharmacological Society | 同济大学医学院郭传勇教授团队报道:非酒精脂肪肝新疗法
郭传勇教授团队在《The British Pharmacological Society》期刊发表了题为“Astaxanthin attenuates hepatic damage and mitochondrial dysfunction in non-alcoholic fatty liver disease by upregulating …
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英格恩生物技术博客 生物实验干货分享