英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
微管蛋白已知会有独特的翻译后修饰（PTMS），如脱酪氨酸和聚谷氨酰化，特别是在非结构化羧基末端尾（CTTS）中。然而，更多传统的微管蛋白的PTMS及其在微管性质和功能的调节中的作用仍然不明确。现分享一篇DNA转染（Entranster）与微管蛋白多翻译后修饰的蛋白质组学分析和功能表征研究的文献，以供参考。
阅读更多 »ECL发光液与猪繁殖与呼吸综合征病毒与胆固醇-25-羟化酶研究
猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）是一种免疫调节性病原体，已被公认为调节宿主干扰素（IFN）系统。胆固醇-25-羟化酶（CH25H）是一种重要的干扰素刺激基因（ISG）编码多面体膜蛋白，显著抑制许多病毒的复制。最新研究表明，CH25H抑制PRRSV的复制，同时PRRSV的感染可显著下调CH25H的表达，但涉及CH25H下调的病毒蛋白尚不清楚。现分享一篇EC …
阅读更多 »RNA转染与LncRNA LINC00511和肝癌细胞增殖和转移研究
长链非编码RNA在人肝癌（HCC）中异常表达，并与HCC的进展有关。lncRNA linc0511（linc0511）已被证实在一些肿瘤中作为肿瘤启动子。然而，作为一中新颖的LncRNA，linc00511的具体功能仍然不是很清楚。现分享一篇RNA转染（engreen）与LncRNA LINC00511和肝癌细胞增殖和转移研究的文献，旨在评估 …
阅读更多 »ECL发光液与人CD147多克隆抗体用于ELISA分析研究
免疫球蛋白超家族成员CD147是一种广泛表达的糖蛋白，以跨膜形式和可溶形式存在。在人类肿瘤中有高水平的表达；报道称其表达在许多癌症类型中是上调的。夹心ELISA是一个功能强大的工具，用于分析可溶性抗原。现分享一篇ECL发光液（enlight）与人CD147多克隆抗体用于ELISA分析研究的文献，以供参考。
阅读更多 »电转染实验时，细胞密度是多少合适？
进行电穿孔实验时.，需确定每种细胞类型的最佳细胞密度，以使电穿孔效率最大化。对于Entranster-E电转染试剂来说，在含电转试剂的终体系中，电穿孔时的细胞密度一般在1-10×106细胞/ml范围内。对于悬浮细胞，最好是接近10×106细胞/ml的高细胞密度。对于贴壁细胞，建议的细胞密度为1-5×106 …
阅读更多 »动物体内转染实验的可靠性如何？
运用体内转染试剂Entranster进行动物体内实验时，实验的重复性或可靠性和整体的实验分不开，如果基础实验（比如细胞实验）充分，而且又有其他的方法进行印证，那么实验的可靠性就很高，这时动物体内转染就不需要太多动物，几十只动物，能说明问题就可以。但如果其他的实验较少，单纯用一种方法进行实验，就需要排除实验 …
阅读更多 »siRNA转染效率不理想的原因有哪些？
siRNA转染效率不理想，常见的原因有： 1. RNA与转染试剂比例不佳 由于RNA序列差异、合成条件不同以及是否带有荧光等标记，决定了RNA和转染试剂在不同情况下会有不同的最佳条件，建议先进行预实验优化。 2. 细胞密度不佳 调整细胞密度到转染时汇合度为20-40%。成功转染siRNA的细胞会产生目标基因表达下调，但未成功转染的细胞却不受影响，这时转染效率 …
阅读更多 »体内转染（Entranster）与膜联蛋白A7和大鼠继发性脑损伤研究
谷氨酸兴奋性中毒参与了脑出血（ICH）引起的继发性脑损伤（SBI）。突触体相关蛋白23（SNAP23）和SNAP25分别参与突触前谷氨酸的释放和突触后谷氨酸受体（NMDA受体）运输，这两者对于谷氨酸介导的兴奋性毒性都是必不可少的。SNAP23和SNAP25具有较高的同源性，SNAP23被证明可与膜联蛋白A7（ANXA7）相互作用。现分享一篇体内转染（Entr …
阅读更多 »提高RNA转染效率的几点建议
1.纯化RNA 在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA，推荐用玻璃纤维结合，洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸，小的寡核苷酸，蛋白和盐离子。注意：化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化（即PAGE胶纯化）。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致RNA实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在，如皮肤，头发，所有徒手接触过 …
阅读更多 »体内转染与HO-1在过敏性哮喘模型小鼠中的作用研究
过敏性哮喘通常被认为是一种以嗜酸细胞炎症为特征的Th2免疫反应。最近的调查显示，Th17细胞在非嗜酸细胞性哮喘（NEA）的发病机制中起重要作用，可导致激素抵抗中性粒细胞性气道炎症。血红素氧合酶-1（HO-1）具有抗炎、抗氧化和抗凋亡作用。然而，它的作用在NEA仍不清楚。先分享一篇运用体内转染siRNA方法（Entranster）研究HO-1在过敏性哮喘模型小 …
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