下面以Entranster-R4000试剂为例,说一下shRNA转染步骤(24孔板) 1.提前1天细胞种植 贴壁细胞:提前一天将细胞种植在24孔板中,以转染时细胞汇合度(Confluence)在30%左右为宜,转染前全培养基总量为0.45ml。 悬浮细胞:采用对数生长期的细胞,数量为常规培养细胞数的1/3进行转染实验。如某细胞常规培养的细胞数是6×105,那 …
阅读更多 »DNA转染与免疫毒素CCL25-PE38抗急性T淋巴细胞白血病实验研究
白血病在全球发病率呈上升趋势,我国白血病发病率为十万分之三,每年约新增40 000 例患者。白血病表现为骨髓造血组织恶性增生,形成大量异常的白细胞,广泛浸润组织器官,引起多种组织器官不可逆损害,直接威胁患者生命。白血病的转移、复发与白血病细胞及其生长微环境相互作用密切相关。免疫毒素是一种由抗体或细胞因子与化学毒素耦合组成的融合蛋白。通过受体介导 …
阅读更多 »DNA转染(Entranster)与抗病毒天然免疫研究
天然免疫是保护宿主细胞免受微生物感染的第一道屏障。TANK结合激酶1(TBK1)介导的I型干扰素(IFN)诱导在宿主抗病毒反应及免疫平衡方面起着至关重要的作用。现分享一篇运用DNA转染(Entranster-H4000)研究抗病毒天然免疫的文献,以供参考。
阅读更多 »体内转染(entranster)与Trim47调节脑缺血再灌注损伤研究
脑缺血是导致死亡和长期残疾的主要原因。Tripartite Motif-47(Trim47)是Trim家族蛋白的一员,据报道参与了各种疾病的细胞凋亡和炎症。然而,trim47在脑缺血/再灌注(I/R)损伤中的潜在分子机制仍不清楚。现分享一篇体内转染(entranster)与Trim47调节脑缺血再灌注损伤研究的文献,以供参考。 文献地址:https://sc …
阅读更多 »Gasdermin C促进胰腺癌免疫逃逸机制研究
文献概要 标题: Gasdermin C promotes Stemness and Immune Evasion in Pancreatic Cancer via Pyroptosis-Independent Mechanism 期刊: Advanced Science 影响因子: IF15.100 实验方法 细胞模型:使用原代人类PDAC细胞和小鼠KPC …
阅读更多 »ECL发光液(enlight)与白藜芦醇改善心脏功能紊乱研究
糖尿病患者有50–80%死于糖尿病心血管并发症的风险。糖尿病心肌病(DCM)是一种严重的并发症,其发病机制尚不完全清楚。高血糖引起的凋亡加剧了DCM的病理变化。现分享一篇ECL发光液(enlight)与白藜芦醇改善心脏功能紊乱研究的文献,以供参考。
阅读更多 »RNA转染与脊髓损伤后神经细胞凋亡研究
脊髓损伤(SCI)是一种常见的创伤,在损伤组织初始损伤后小时和几天内会有二次细胞变性的发生,会影响到感觉和病变部位运动信号以及神经系统的传导。脊髓损伤后的神经退行性疾病是严重的,其中许多与SCI患者终生残疾有关。现分享一篇RNA转染(Entranster)与脊髓损伤后神经细胞凋亡研究的文献,以供参考。
阅读更多 »大肠杆菌电转后,4度涂抹到培养基板子上会导致死亡吗?细菌电转后是不是比细胞还脆弱啊?
这个问题问得很实际,也很关键,特别是在做质粒转化实验的时候容易遇到。 回答一:大肠杆菌电转后,4℃下操作是否会导致死亡? 不会直接导致大面积死亡,但确实会影响转化效率。 电转后的大肠杆菌处于一种“受伤”的状态,细胞膜被电击短暂打破,虽然迅速恢复,但暂时很脆弱。 如果在电转后没有及时给予复苏(比如在SOC、LB等液体培养基中摇床复苏30–60分钟),就直接在低 …
阅读更多 »DNA转染与鞘磷脂合成酶2和H2O2诱导的内皮功能障碍研究
动脉粥样硬化(AS)是各种心脑血管疾病的主要病因,发病率和死亡率都很高。氧化应激诱导内皮细胞功能障碍是动脉粥样硬化的病理基础。此外,鞘磷脂和Wnt/β-连环素信号通路被认为与AS密切相关,但具体机制尚不清楚。 现分享一篇DNA转染(Entranster)与鞘磷脂合成酶2和H2O2诱导的内皮功能障碍研究的文献,以供参考。
阅读更多 »体内转染(Entranster)与环状RNA研究
环状RNA在许多生物系统中被发现。它们大多被认为是microRNA的分子“海绵”,具有许多未知的生物学活性。小干扰RNA作为许多非编码RNA之一,已成为基因表达调控和药物治疗的重要工具。虽然由siRNA介导的靶mRNA裂解具有高度的序列特异性,意外“脱靶”沉默内源基因在细胞中也观 …
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