根据你的描述,GFP在第一天有很好的表达,但在第二天转染DNA质粒后,第三天绿色荧光消失,只有少数细胞有红色荧光。这可能涉及到几个不同的因素: 1. DNA质粒表达对GFP表达的抑制 高浓度DNA引起的翻译抑制:你已经电转过mRNA,然后再转DNA质粒,这可能引发细胞对大分子DNA的免疫反应,比如激活干扰素反应。这可能抑制了翻译,不仅影响红色荧光蛋白(DNA …
阅读更多 »能否用384孔板进行CCK8试验?
可以。向各孔中加入培养基体积10%的CCK8 溶液,如果加入的CCK8体积太少,可以先将CCK8 溶液稀释1 倍,然后加入培养基体积20%的量。 如需了解更多关于cck8产品的信息,请点击https://www.engreen.com.cn/cck-8-kit
阅读更多 »转染siRNA后,可以收集细胞重新铺板吗?
转染siRNA后,通常是会影响细胞的基因表达,但是否可以重新铺板要考虑几个因素。一般情况下,如果转染后需要重新铺板,建议采取以下步骤: 转染后的时间点:siRNA的效果一般需要在转染后24-48小时才能显现,因此在这个时间段内,你不应该轻易处理细胞。若重新铺板,需要确保转染后的时间足够,能让siRNA充分发挥作用。 细胞状态:如果在转染后细胞健康状况良好,并 …
阅读更多 »细胞siRNA转染有哪些方法?
siRNA导入细胞有以下几种方法:化学转染技术、电穿孔法、磷酸钙共沉淀技术、显微注射和载体导入技术。选择时应该依据实验条件考虑以下因素:细胞对转入方式的承受能力、细胞对病毒侵染的易感性、细胞的生长特性等。对贴壁细胞来说化学转染技术(Entranster)是最为常用的方法,而对悬浮细胞则采用电穿孔法效果较好。
阅读更多 »ECL发光液与存活素抑制对食管癌细胞放射增敏作用的研究
食管癌在中国是一种常见的癌症。手术是食管癌的主要治疗手段,但放疗和化疗在临床分期上也有广泛的应用。放射治疗通常与化疗和靶向治疗相结合。然而,放射治疗效果仍然令人不满意,放射抗性在临床治疗中非常普遍,导致可能的治疗失败。因此,迫切需要提高放射敏感性的策略。现分享一篇ECL发光液(enlight)与存活素抑制对食管癌细胞放射增敏作用的研究的文献,以供参考。
阅读更多 »慢病毒感染,胶体金测出来很高,可感染效果很差的原因
慢病毒感染效率低,尽管用胶体金测试显示滴度很高,可能有以下几个原因: 病毒颗粒质量:虽然胶体金检测显示病毒滴度很高,但这并不意味着所有的病毒颗粒都是功能性的。有可能病毒颗粒已经失活或者结构受损,无法有效感染目标细胞。 病毒浓度与效价的差异:胶体金检测主要测量病毒颗粒的数量,但这些颗粒不一定都具有感染性。有效感染的病毒颗粒(感染性单位)可能比实际检测的数量要低 …
阅读更多 »体内转染(entranster)与海参肠道再生相关的Wnt信号通路研究
许多棘皮动物是具有特殊再生能力的再生物种,海参是一种具有代表性的生物,可以在切除内脏后再生整个肠道。再生过程中有许多信号通路参与,但尚不清楚哪一条是肠道再生所必需的。现分享一篇体内转染(entranster)与海参肠道再生相关的Wnt信号通路研究的文献,以供参考。 文献地址:https://www.frontiersin.org/article …
阅读更多 »DNA转染与人IL-37b 基因真核表达载体的构建与表达研究
IL-37基因位于人类第二号染色体上,共有五种不同的剪切亚型,即IL-37a ~e,其中IL-37b 是五种亚型中分子量最大的一个 。IL-37 具有广泛的炎症抑制作用,可抑制外周血单个核细胞、树突状细胞、巨噬细胞及上皮细胞等细胞炎症因子的产生 ,另外在感染性休克、系统性红斑狼疮、炎症性肠病、肝损伤、肝癌等疾 …
阅读更多 »两个shRNA在转录水平和蛋白水平都有效抑制了基因表达,但是表型做出来却不一致,是为什么?
这种情况可能是由多种因素引起的,以下是一些可能的原因: 转录水平和蛋白水平的不同调控机制:虽然shRNA能够有效地降低目标基因的mRNA和蛋白表达,但有时候蛋白质的功能并不完全依赖于其表达量。有可能是基因表达抑制后,细胞通过一些补偿机制(比如其他途径的上调或活化)来恢复其功能,导致表型不一致。 shRNA的特异性和脱靶效应:shRNA可能会靶向与目标基因相似 …
阅读更多 »体内转染(entranster)与信号素3A导致创伤性脑损伤后继发性血脑屏障损伤研究
创伤性脑损伤(TBI)是一种危害人类健康的高发病率疾病,随着社会的发展,这种疾病的发病率有上升的趋势。脑外伤死亡率为10.8%,致残率为12%。脑外伤已成为40岁以下人群的第五大死因,年轻人约占脑外伤患者的70%。信号素3A(SEMA 3A)是信号素家族的成员,是一类参与神经网络构建的膜相关蛋白。SEMA3A曾被报道可影响血管通透性,但其在创伤性脑损伤(TB …
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