英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
1. RNA与转染试剂比例不佳 由于RNA序列差异、合成条件不同以及是否带有荧光等标记，决定了RNA和转染试剂在不同情况下会有不同的最佳条件，建议先进行预实验优化。 2. 细胞密度不佳 调整细胞密度到转染时汇合度为20-40%。成功转染siRNA的细胞会产生目标基因表达下调，但未成功转染的细胞却不受影响，这 …
阅读更多 »CCK8实验之前，是否需要先检测一下培养基和CCK8是否会反应？
需要，可用一个孔检测一下，因为有培养基中可能含有氧化还原反应的物质，在正式实验之前有必要先确认培养基和CCK8 是否反应。一般正常在的OD 值应该在0.4 以下。 如需了解更多关于cck8产品的信息，请点击https://www.engreen.com.cn/cck-8-kit
阅读更多 »体内转染与高危大鼠角膜移植和CD25siRNA基因转移作用研究
角膜移植术是治疗致盲性角膜疾病的唯一方法。虽然角膜移植被认为是最常见和最成功的移植手术，但角膜移植的成功率低于一般预期。根据临床统计，88%的角膜移植片在移植后能存活1年，但只有55%的角膜移植片能存活5年。三分之一的角膜损伤是由免疫移植反应引起的。此外，高危受者角膜移植的成功率在35%以下，抑制角膜移植排斥反应是提高移植成功率的主要挑战。现分享 …
阅读更多 »病毒包装过程中，细胞大量死亡，还有必要收集病毒吗
在病毒包装过程中，如果观察到细胞大量死亡，是否还要收集病毒需要根据具体情况判断。以下是一些可能的考虑因素： 病毒滴度：尽管细胞大量死亡，仍然有可能产生高滴度的病毒。如果病毒滴度足够高，可以继续收集病毒用于后续实验。 污染：细胞大量死亡可能是由于污染引起的。如果怀疑有细菌、真菌或支原体污染，收集病毒可能不是一个好主意，因为污染会影响后续实验的准确性。 病毒本身 …
阅读更多 »Rab5a在脂多糖（LPS）诱导的肺微血管内皮屏障功能障碍中的作用及其机制
标题：Rab5-mediated VE-cadherin internalization regulates the barrier function of the lung microvascular endothelium 影响因子：5.808（Cellular and Molecular Life Sciences, 2015年） 文献概要 该研究探讨 …
阅读更多 »RNA转染（Entranster）与JMJD6和p53及结肠癌发生之间关系研究
umonji域包含6（JMJD6）是JumonjiC结构域蛋白家族的一个成员。相比于其他的家庭成员，JMJD6细胞活性仍不明确，其生物学功能仍然是很大的未开发。现分享一篇文献，文献中我报道JMJD6与肿瘤抑制基因p53相关，文献中用RNA转染（Entranster）研究JMJD6和p53及结肠癌发生之间的关系，以供参考。
阅读更多 »质粒DNA转染实验效率影响因素
1， 质粒的构建：启动子的选择 启动子的选择对于转染基因的有效表达是非常重要的。对于转染过程本身虽然无甚影响，但是对转染结果却有着微妙的影响。 2， 质粒的大小和质量 线性化还是超螺旋会影响转染结果：超螺旋质粒的 …
阅读更多 »ECL发光液与Polo样激酶1对端粒酶活性影响研究
端粒的维持受端粒酶活性的调控，包括端粒酶全酶及其相关蛋白。端粒酶的活性在细胞中被精确控制，其失调是癌症的特征之一。端粒酶催化亚单位端粒酶逆转录酶（hTERT）在端粒酶活性中起重要作用。 现分享一篇ECL发光液（enlight）与Polo样激酶1（PLK1）通过影响端粒酶逆转录酶的稳定性上调端粒酶活性研究的文献，以供参考。
阅读更多 »慢病毒载体构建原理
慢病毒载体的包装系统一般由两部分组成，即包装成分和载体成分。包装成分由HIV-1基因组去除了包装、逆转录和整合所需的顺式作用序列而构建，能够反式提供产生病毒颗粒所必需的蛋白；载体成分则与包装成分互补，即含有包装、逆转录和整合所需的顺式作用序列，同时具有异源启动子控制下的多克隆位点及在此位点插入的目的基因。将包装成分与载体成分的多个质粒共转染包装 …
阅读更多 »IFN-γ诱导瘢痕疙瘩成纤维细胞（KFs）铁死亡机制研究
文献：IFN-γ could induce ferroptosis in keloid fibroblasts by inhibiting the expression of serpine2 期刊：Cell Death Discovery 影响因子：6.1 实验意义 本研究揭示了IFN-γ通过调控serpine2-system Xc⁻轴诱导瘢痕疙瘩成纤维细 …
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