小GTP酶Rab5可以控制囊泡接到的质膜蛋白运输,其在血管内皮(VE)-钙黏蛋白的内化作用功能仍然未知,血管内皮(VE)-钙黏蛋白是一种内皮特异性跨膜元件,可以调节内皮细胞的极性和屏障功能。现分享一篇应用体内转染siRNA (Entranster-in vivo)的方法研究肺微血管内皮功能的文献,以供参考。
阅读更多 »如何优化RNA转染条件?
可从以下几方面进行优化: 1.纯化RNA 在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白和盐离子。注意:化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化(即PAGE胶纯化)。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致RNA实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在,如 …
阅读更多 »逆转录病毒可以共感染吗?
可以。逆转录病毒(如MLV、lentivirus等)可以共感染同一细胞,尤其是不同病毒包装不同的转基因载体时,可以实现共转导(co-transduction),从而使同一细胞获得多个基因。 但要注意: 病毒滴度足够高:每个病毒的MOI(Multiplicity of Infection)需要合适,才有可能让同一细胞被两种病毒都感染。 标记或选择机制清晰:常用 …
阅读更多 »基于DNA适配体的PROTAC治疗癌症研究(IF18.8)
标题:An engineered DNA aptamer-based PROTAC for precise therapy of p53-R175H hotspot mutant-driven cancer 期刊:Science Bulletin 影响因子:18.8 文献概要 该研究开发了一种基于工程DNA适配体的PROTAC(蛋白降解靶向嵌合体)——dp5 …
阅读更多 »体内转染(entranster)与fbxw5减少可减轻脊髓损伤研究
外伤性脊髓损伤(SCI)是造成死亡和终身残疾的主要原因。然而,对脊髓损伤的病理过程还没有完全了解。F-BOX/WD重复序列包含蛋白5(FBXW5),是scf型E3泛素连接酶复合物的一个亚单位,在调节各种病理方面具有重要作用。然而,对于fbxw5对SCI进展的影响知之甚少。 现分享一篇体内转染(entranster)与fbxw5减少可减轻脊髓损伤 …
阅读更多 »CCK8对于不同的细胞,灵敏度是否一样?
不一样,悬浮细胞与贴壁细胞相比较难染色。对于贴壁细胞,一般加入CCK8 培养1-4 小时吸光度已经很高,但对于悬浮细胞则可能吸光度较低,可以通过延长CCK8 的加入时间或增加细胞数量来解决。 如需了解更多关于cck8产品的信息,请点击cuturl(‘https://www.engreen.co …
阅读更多 »荧光表达的细胞在冻存后72小时后再测荧光情况,可以吗?
荧光表达后的细胞可以在冻存后72小时再测荧光,但有几点需要注意: 细胞存活率:冻存和解冻过程可能会影响细胞的存活率和状态。确保细胞在解冻后恢复良好,具有正常的形态和活力。 荧光稳定性:荧光蛋白的稳定性可能会随时间或细胞状态的变化而有所改变。确保荧光信号在解冻后仍然足够强且稳定。 冻存条件:使用适当的冻存保护剂(如DMSO)并在-80°C或液氮中冻存,以尽量减 …
阅读更多 »弓形虫效应子GRA4调控免疫和肿瘤治疗的研究
文献标题:The Toxoplasma Effector GRA4 Hijacks Host TBK1 to Oppositely Regulate Anti-T. Gondii Immunity and Tumor Immunotherapy 影响因子:《Advanced Science》最新数据确认,2023年IF约为15.1) 文献概要 该研究探讨了弓 …
阅读更多 »体内转染(Entranster)与冠状动脉微栓塞问题研究
冠状动脉微栓塞(CME)是一种常见的和重要的临床现象,急性冠状综合征(ACS),和那些接受溶栓治疗、经皮冠状动脉介入治疗(PCI)的患者都会出现冠状动脉微栓塞现象。现分享一篇运用体内转染(Entranster-in vivo)方法研究细胞死亡因子4/NF-κB在猪冠状动脉微栓塞引起的心脏功能障碍中的发生机制的文献,以供参考。
阅读更多 »RNA转染实验的影响因素
1. 转染试剂 转染中要额外注意的就是转染试剂应该是确认无RNase污染的,而且也尽量避免和质粒DNA转染混用——即使试剂本身兼容DNA和RNA转染,因RNA与DNA大小不同,转染条件不同,所需的试剂也应不同,所以RNA专用的转染试剂会更好一些。比如Entranster试剂. 2. &n …
阅读更多 »
英格恩生物技术博客 生物实验干货分享