siRNA导入细胞有以下几种方法:化学转染技术、电穿孔法、磷酸钙共沉淀技术、显微注射和载体导入技术。选择时应该依据实验条件考虑以下因素:细胞对转入方式的承受能力、细胞对病毒侵染的易感性、细胞的生长特性等。对贴壁细胞来说化学转染技术(Entranster)是最为常用的方法,而对悬浮细胞则采用电穿孔法效果较好 …
阅读更多 »ECL发光液与S-periaxin二聚反应中的分子间二硫键研究
Periaxin最初是从哺乳动物周围神经系统(PNS)的髓鞘化施万细胞中鉴定出来的,它通过膜-蛋白相互作用在稳定施万细胞-轴突单元中起着重要作用。Periaxin蛋白占PNS蛋白含量的16%。Periaxin基因缺失或突变导致脱髓鞘周围神经病变,如Charcot–Marie–Tooth病4F、腓骨肌萎缩、遗传性运动和感觉神经病变以及隐性Dej …
阅读更多 »如何优化RNA转染条件?
可从以下几方面进行优化: 1.纯化RNA 在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白和盐离子。注意:化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化(即PAGE胶纯化)。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致RNA实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在,如 …
阅读更多 »RNA转染与非连接蛋白Cx32在宫颈癌细胞中作用的研究
缝隙连接蛋白(Cx)构成脊椎动物的缝隙连接(GJ),可调节重要的细胞过程,包括电耦合,增殖,分化和凋亡。与最初在上世纪60年代提出的“接触增长抑制”概念一致,GJ和CX被公认为肿瘤抑制;恶性肿瘤的特点是GJ的缺失。在恶性肿瘤细胞中,转染Cx以GJ依赖的方式提高放疗/化疗诱导的细胞凋亡(有毒的“旁观者效应”)。Cx在宫颈癌中的作用尚不清楚。现分享一篇RNA转染 …
阅读更多 »RNA转染与mir-34a通过靶向Foxp3损害Treg/Th17平衡研究
调节性T(Treg)细胞亚群及其特异性转录Foxp3是通过控制效应器T(Teff)细胞反应维持免疫稳态的独特细胞类型。尽管有Treg/teff紊乱的Treg细胞中的缺陷通常会导致自身免疫性疾病,但其确切机制尚未完全揭示。现分享一篇RNA转染(entranster)与mir-34a通过靶向Foxp3损害Treg/Th17平衡研究的文献,以供参考。 …
阅读更多 »RNA转染与利拉鲁肽和MC3T3-E1细胞凋亡研究
近年来,对肠促胰岛素和骨的关系的兴趣不断增加。之前的研究已经表明胰高血糖素样肽-1(GLP-1)及其受体激动剂对骨骼代谢具有有益的合成代谢作用,如通过肠-骨轴促进成骨细胞的增殖和分化。然而,对于GLP-1对成骨细胞凋亡的影响及其相关机制并不清楚。现分享一篇RNA转染(Entranster)与利拉鲁肽和MC3T3-E1细胞凋亡研究的文献,以供参考。
阅读更多 »DNA转染与Cep70与γ-微管蛋白和有丝分裂纺锤体组装研究
有丝分裂纺锤体的解除与基因组不稳定性有关,这是肿瘤发生和恶性转化的一个重要方面。为了保证染色体传递的准确性,有丝分裂纺锤体由精细的机制组装,并由动物细胞中的着丝粒组织配制。尤其是,中心体蛋白被认为协同作用以确保准确的纺锤体形成,但分子细节仍有待研究。现分享一篇DNA转染(Entranster)与Cep70与γ-微管蛋白相互作用在有丝分裂纺锤体组装中作用的研究 …
阅读更多 »RNA转染(Entranster)与脊髓损伤后神经细胞凋亡研究
脊髓损伤(SCI)是一种常见的创伤,在损伤组织初始损伤后小时和几天内会有二次细胞变性的发生,会影响到感觉和病变部位运动信号以及神经系统的传导。脊髓损伤后的神经退行性疾病是严重的,其中许多与SCI患者终生残疾有关。现分享一篇RNA转染(Entranster)与脊髓损伤后神经细胞凋亡研究的文献,以供参考。
阅读更多 »DNA转染与基于de novo设计蛋白DS119的TNFa结合蛋白合理设计研究
蛋白质-蛋白质相互作用的合理设计是创造新型蛋白质药物、诊断探针或调节细胞信号通路的有力工具。SH3和PDZ结构域等小型模块化支架在调节蛋白质相互作用中起着重要作用,因此这些结构域在蛋白质设计中的应用已被广泛研究。De novo蛋白质设计为工程定制蛋白质功能提供模板,为合成生物学研究提供正交蛋白质相互作用网络。已经开发出各种计算方法来引入已知蛋白 …
阅读更多 »DNA转染与bom-mir-2805在上调家蚕纤维蛋白轻链基因的表达研究
家蚕是世界上最重要的经济昆虫,也是鳞翅目重要的模式生物。家蚕丝腺是一种高度特异性,具有高效合成丝蛋白能力的特殊器官。丝蛋白主要由丝素和丝氨酸组成。丝素基因的表达主要在转录水平上受到时间和空间调控,表现为表达抑制模式。研究表明家蚕miRNAs参与丝蛋白基因的表达调控。另外,家蚕丝腺特异性转录因子(Tfs)如丝腺因子(SGF,包括SGF-1、SGF- …
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