英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
转染效率重复性差原因： 细胞融合度不同。保证同样的接种量及同样的时间。 细菌污染。可使用Entranster试剂，培养基可加抗生素，避免细胞污染。 细胞传代次数太高了。可重新复苏一管新的细胞。 血清质量不稳定。用同一批号的血清。
阅读更多 »悬浮细胞的siRNA转染实验步骤
悬浮细胞的siRNA转染操作步骤，以24孔板siRNA转染为例 1.提前1天细胞种植 悬浮细胞：采用对数生长期的细胞，数量为常规培养细胞数的1/3进行转染实验。如某细胞常规培养的细胞数是6×105，那么就用2×105的细胞进行转染。 2.转染过程 ⑴取0.67ug(50pmol)的siRNA，加入一定量无血清稀释液，充分混匀，制成RNA稀释液，终体积为25μ …
阅读更多 »ECL发光液与褪黑激素降低吸烟引起的高血糖研究
吸烟是一种不健康的生活习惯。糖尿病是多因素的，与环境因素和生活方式有关。值得注意的是，糖尿病似乎受到吸烟的严重影响，包括稳态模型评估在内的临床流行病学调查表明吸烟可能会干扰血糖平衡，但吸烟对高血糖和β细胞的作用机制尚不清楚。现分享一篇ECL发光液（enlight）与褪黑激素降低吸烟引起的高血糖研究的文献，以 …
阅读更多 »体内转染（Entranster）与DNMT1过表达和废用性骨质疏松研究
废用性骨质疏松（DOP）属于继发性骨质疏松症的一种，是由于骨骼的机械张力刺激减少而引起的局部或全身性骨量减少。可以出现于运动能力受限或功能障碍，也可能发生于创伤或者术后制动。有关DOP的确切机制尚不清楚，尽管表观遗传修饰可能是主要原因。最近，有研究表明DNA甲基转移酶（DNMT）蛋白可将胞嘧啶催化为5-甲基胞嘧啶（5mC），改变DNA的表观遗传状态。现分享一 …
阅读更多 »ECL发光液与上皮性卵巢癌差异表达蛋白的鉴定及验证研究
卵巢癌是女性死亡的第五大死因，也是最致命的妇科肿瘤。每年新增卵巢癌病例22280例，死亡率15500例，占女性新增癌症病例的3%和所有癌症死亡病例的6%。卵巢上皮性癌（EOC）由于盆腔脏器位置深，早期诊断困难，因此初诊时60%以上的患者处于晚期。EOC的标准治疗是手术，其次是铂类辅助化疗。虽然EOC的治疗 …
阅读更多 »ECL发光液（enlight）与睫状体神经营养因子和阿尔兹海默症治疗研究
通过其病理特征，即老年斑和神经纤维缠结来抑制阿尔茨海默病（AD）进展，是一种有效的治疗方法。许多研究表明睫状体神经营养因子（CNTF）不仅能够促进神经元生长和维持细胞存活，还可显著降低淀粉样蛋白β（Aβ）聚集和沉积。现分享一篇ECL发光液（enlight）与睫状体神经营养因子和阿尔兹海默症治疗研究的文献，以供参考。
阅读更多 »RNA转染（Entranster）与骨髓瘤细胞中RAF6蛋白表达水平研究
肿瘤坏死因子受体‑相关因子6（TRAF6）是一种重要的E3泛素连接酶 ，在先天免疫和适应性免疫中有着重要的作用 。TRAF6被报道可参与鳞状细胞癌和胃癌的侵袭性生长和转移，以及骨髓增生异常综合征和急性髓系白血病 。由于TRAF6在众多的信号转导通路具有很重要的地位，使得它成为肿瘤治疗的一个潜在靶点。现分享 …
阅读更多 »影响western-blot实验的因素有哪些？
1. 样品质量。所抽取样品的蛋白含量，蛋白变性是否充分等等，还有，蛋白样品的PH值是否在7~8之间。这会直接影响到样品浓缩的效果。此外，蛋白样品是否降解、目的蛋白是否已抽取充分都会对最终结果的可靠性有影响。 2. 凝胶质量。不连续SDS-PAGE胶对凝胶的要求较高，分离胶的PH值应在8.8左右，而浓缩胶的PH应在6.8左右，最好不要差过0.5个PH单位，因为 …
阅读更多 »细胞转染的方法有哪些？
1. 脂质体法。中性脂质体是利用脂质膜包裹DNA，借助脂质膜将DNA导入细胞膜内。带正电的阳离子脂质体则不同，DNA并没有预先包埋在脂质体中，而是带负电的DNA自动结合到带正电的脂质体上，形成DNA-阳离子脂质体复合物，从而吸附到带负电的细胞膜表面，经过内吞被导入细胞。脂质体法始于1987年，此法的出现使得转染效率、转染的稳定性和可重复性大大提高。阳离子脂质 …
阅读更多 »体内转染（entranster）与细胞自噬和大鼠缺血性损伤研究
卒中尤其是缺血性卒中，可能导致严重的神经功能障碍，甚至死亡，在世界范围内有较高的发病率和死亡率。脑缺血后神经元凋亡、自噬、坏死等形态学变化产生细胞死亡的复杂特征。细胞自噬参与了II型程序性细胞死亡，并且在脑缺血中，自噬作用在累积。自噬作用是复杂的，取决于大脑的成熟度，区域的缺血严重程度等。现分享一篇运用体内 …
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