滤过术是目前治疗青光眼的主要手术方式之一,功能性滤过泡的形成和维持是其成功的关键。术后伤口愈合包括一系列复杂的动态过程。滤过性手术失败的主要原因是手术区术后成纤维细胞增生、胶原沉积和滤过泡疤痕形成,最终可阻断手术过程中建立的房水引流通道。现分享一篇ECL发光液(Enlight)与金属 …
阅读更多 »western-blot化学发光(ECL)为什么会淬灭?
做Western Blot发光实验经常有“淬灭”的情况发生,经常有朋友反映,加发光试剂后立刻可以看到很明显的亮光,可亮光很快就消逝了,压完片后,条带却很弱,甚至什么也没有。这种情况发生的原因是什么? 要解释这种情况发生的原因,必须先了解ECL化学发光的原理。一般的发光试剂含鲁米诺和H2O2、发光增强剂等物质。发光试剂中的鲁米诺被HRP和H2O …
阅读更多 »RNA转染与B细胞成熟抗原和多发性骨髓瘤细胞存活研究
多发性骨髓瘤(MM)是一种无法治愈的血液恶性肿瘤,其特点是恶性浆细胞克隆性增殖,与大多数患者产生单克隆免疫球蛋白有关。细胞因子白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10、干扰素-α和B细胞活化因子(BAFF)在促进MM细胞生长和耐药中的作用已得到明确阐述。越来越多的证据表明BAFF影响MM细胞的生长、存活、迁移和耐药性。B细胞成熟抗原(BCMA)是BAFF …
阅读更多 »western-blot化学发光(ECL)的特异性差怎么办?
特异性差,出现杂带或非特异条带的原因可能有以下几个方面: 1. 蛋白上样量过大。可降低蛋白上样量。 2. 一抗是多克隆抗体,或一抗、二抗浓度太高。可更换成单克隆抗体,或降低抗体浓度,缩短抗体孵育时间,优化一抗和二抗的使用浓度。 3. 洗膜不充分。可增加洗膜次数和Buffer用量,延长洗膜时间,或在Wash Buffer中添加终浓度0.05%的Tween-20 …
阅读更多 »RNA转染(Entranster)与Tan IIA在肿瘤细胞凋亡中的作用机制研究
丹参酮 IIA(Tanshinone IIA,Tan IIA)是一种从丹参干根中提取的生物活性物质,具有抑制肿瘤细胞增殖和诱导细胞凋亡的作用。然而,Tan IIA在肿瘤细胞凋亡中的作用机制仍有待进一步阐明。现分享一篇运用RNA转染(Entranster)的方法的文献,通过阐明Tan IIA在p53基因缺陷的H1299细胞中的抗肿瘤作用机制,以确定丹参酮IIA …
阅读更多 »ECL发光液与AMPA受体在巨噬细胞中TNF-α表达和释放中作用研究
谷氨酸(Glu)是中枢神经系统中一种兴奋性神经递质,并根据其特定的谷氨酸受体发挥多种功能。谷氨酸也是一种营养氨基酸,存在于血液中。谷氨酸受体有两组,它们是离子型受体(IGLURs)和代谢型受体(MGLURs)。IGLURS是根据其对激动剂的选择性分为三个亚型:N-甲基-D-天门冬氨酸受体(NMDA),A-氨基-3-羟基-5-甲基-4-异恶唑丙酸受体(AMPA …
阅读更多 »RNA转染与大鼠肺辐射损伤中microRNA和mRNA表达谱的整合研究
暴露与辐射中会引起细胞反应,这可能受到基因表达网络的调控。miRNA是一种小的非编码RNA,通过促进mRNA的降解或抑制蛋白质的翻译来调节基因的表达。在放射性肺损伤中miRNA和mRNA的表达模式还不是很清楚,并且miRNA在这个过程中的作用还未有研究。现分享一篇RNA转染(Entranster)与大鼠肺辐射损伤中microRNA和mRNA表达谱的整合研究的 …
阅读更多 »电转染实验影响因素
1 电场参数 电场是电转染的重要因素,细胞在电场的作用下,膜通透性增加或是形成小孔,以完成转染过程。因此电场强度是应该被优化的主要参数。电场强度不能过高,过高会增加细胞的死亡率;也不能过低,过低不能增加膜的通透性或在膜上形成小孔。因此,一个适宜的电场强度至关重要。 不同细胞系具有不同的最佳场强值,其确定方法除了实验直接测定比较不同场强下转染率的高低外,还可以 …
阅读更多 »DNA转染与人IL-37b 基因真核表达载体的构建与表达研究
IL-37基因位于人类第二号染色体上,共有五种不同的剪切亚型,即IL-37a ~e,其中IL-37b 是五种亚型中分子量最大的一个 。IL-37 具有广泛的炎症抑制作用,可抑制外周血单个核细胞、树突状细胞、巨噬细胞及上皮细胞等细胞炎症因子的产生 ,另外在感染性休克、系统性红斑狼疮、炎症性肠病、肝损伤、肝癌等疾 …
阅读更多 »ECL发光液(enlight)与DNA酶1和糖尿病研究
脱氧核糖核酸酶I(DNaseI)是38 kDa糖蛋白的非限制性核酸酶。它可以水解单链和双链DNA中的磷酸二酯键。内源性DNA酶I是促进细胞凋亡过程中染色质分解的核酸内切酶之一。作为分泌型内切酶,DNaseⅠ是体液中主要的核酸酶,如血清和尿液。在人类中,胰腺是DNASi I的合成和分泌的主要来源,占血清中D …
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