英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
可从以下几方面进行优化： 1.纯化RNA 在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA，推荐用玻璃纤维结合，洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸，小的寡核苷酸，蛋白和盐离子。注意：化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化（即PAGE胶纯化）。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致RNA实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在，如 …
阅读更多 »悬浮细胞该如何转染？
悬浮细胞是指细胞生长不依赖支持物表面，在培养液中呈悬浮状态生长，如淋巴细胞。在实验室经常会遇到悬浮细胞的转染，其和贴壁细胞转染还是有很大不同的。 目前大多数实验室用的是脂质体类的转染试剂，脂质体转染是基于电荷吸引原理，先形成脂质体-DNA复合物，散布在细胞周围，然后通过细胞的内吞作用，将目的基因导入细胞 …
阅读更多 »体内转染（Entranster）与骨桥蛋白对肝脏毒性代谢调节作用研究
骨桥蛋白（OPN）是一种众所周知的促炎症分子，在对乙酰氨基酚（APAP）引起的肝毒性中已被观察到。然而，OPN诱导的精确细胞来源及其在APAP诱导的肝毒性中的作用还尚不清楚。现分享一篇体内转染（Entranster）与骨桥蛋白对肝脏毒性代谢调节作用研究的文献，以供参考。
阅读更多 »pcDNA转染（Entranster）与胞外小泡和食管癌进展研究
食管癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一。其5年生存率低于30%。食管癌分为鳞状细胞癌和腺癌两大类。食管癌多为鳞状细胞癌，占食管癌的90%。近年来，尽管食管癌的治疗进展越来越快，但食管鳞癌患者的总体预后仍然很差，情况仍不容乐观。早期发现和干预对提高食管癌预后具有重要意义。现分享一篇pcDNA转染（Entranster）与胞外小泡和食管癌进展研究的文献，以供参考。
阅读更多 »DNA转染（entranster）与MYC相互作用蛋白-锌指因子ZNF121和上皮细胞增殖研究
MYC是一种强有力的癌基因蛋白，调节多种细胞过程，包括增殖、凋亡、分化、干细胞特性、衰老和迁移。MYC主要作为转录因子发挥作用，与大量蛋白质相互作用，MYC相互作用蛋白的鉴定和对于理解MYC功能是非常重要的。现分享一篇DNA转染（entranster）与MYC相互作用蛋白-锌指因子ZNF121和上皮细胞增殖研究的文献，以供参考。
阅读更多 »喉癌是头颈部第二常见的恶性肿瘤，最常见的表现为鳞状细胞癌。这种疾病的发病率正在增加，然而，其发展的机制尚不完全清楚。因此，寻找新的喉鳞状细胞癌（LSCC）的诊断和治疗方法变得尤为重要。 现分享一篇RNA转染（Entranster）与siRNA靶向骨膜蛋白对人喉鳞状细胞癌抑制作用研究的文献，以供参考。
阅读更多 »RNA转染与mir-155调节胶质瘤细胞增殖和侵袭研究
胶质瘤是成人最常见的原发性恶性脑肿瘤，尽管治疗有所改善，脑胶质瘤患者的预后和生存率仍然非常差。特别是，根据目前WHO脑肿瘤分类，多形性胶质母细胞瘤是最恶性的胶质瘤。探索胶质瘤发生、发展的分子机制，已成为发展胶质瘤新的治疗策略的迫切需求。最近的研究已经报道了脑肿瘤细胞中miRNAs的改变，表明它们在癌基因或抑癌基因中的作用。 现分享一篇RNA转染（Entran …
阅读更多 »细胞电转染实验效率不理想的原因
1. 不合适的电场强度 合适的电场强度对于电转染实验非常重要，电场强度不能过高，过高会增加细胞的死亡率；也不能过低，过低不能增加膜的通透性或在膜上形成小孔。不同细胞系具有不同的最佳场强值，实验前应测定所转染细胞系的最佳电场强度。 2. 细胞选择错误 用于电转的细胞一般选取处于对数生长期 …
阅读更多 »siRNA转染效率不理想的原因是什么？
siRNA转染效率不理想，常见的原因有：1. RNA与转染试剂比例不佳 由于RNA序列差异、合成条件不同以及是否带有荧光等标记，决定了RNA和转染试剂在不同情况下会有不同的最佳条件，建议先进行预实验优化。2. 细胞密度不佳 调整细胞密度到转染时汇合度为20-40%。成功转染siRNA的细胞会产生目标基因表达下调，但未成功转染的细胞却不受影响，这时转染效率和总 …
阅读更多 »细胞电转染实验的几点建议
1. 电场强度要合适 合适的电场强度对于电转染实验非常重要，电场强度不能过高，过高会增加细胞的死亡率；也不能过低，过低不能增加膜的通透性或在膜上形成小孔。不同细胞系具有不同的最佳场强值，实验前应测定所转染细胞系的最佳电场强度。 2. 细胞状态要好 用于电转的细胞一般选取处于对数生长期的细胞（15代以内，传代后2 …
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