英格恩技术博客 专注转染等实验

siRNA转染与DNA转染有什么不一样?

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小干涉RNA(siRNA是在RNA干涉过程中人工体外合成的小片段RNA,由约20个碱基对组成,包括5个磷酸盐,2个核苷和3个悬臂。SiRNA在RNA沉默通道中起中心作用,是对特定信使RNA(mRNA)进行降解的指导要素。在实验室中通过RNAi这种方式,利用具有同源性的双链RNA(dsRNA)诱导序列特异的目标基因的沉默,迅速阻断基因活性。

什么样的转染试剂更适合siRNA转染呢?siRNA转染与DNA转染有什么不一样?首先siRNA由于只有二十几个碱基对,相比DNA几千上万对碱基,小了许多。目前大多数转染试剂都针对比较大的质粒DNA,而非小的RNA分子。用于转染DNA的转染试剂和方法并不完全适用于转染siRNA。

其次,siRNA转染比DNA转染对转染试剂细胞毒性的要求严格。由于转染试剂对细胞的毒性往往是对众多基因直接地或间接地上调或下调的结果,这对于过量表达的DNA转染来说,一些实验的影响不大,但对于以研究基因干扰为主要目的的RNAi实验来说,就是致命的,因为细胞死亡和RNAi实验造成的结果在现象上是一致的,轻则影响实验数据,重则改变实验结果。siRNA实验首先要求选择适合转染小的RNA的高效转染试剂,其次要求转染试剂本身的细胞毒性很小。建议选择专门针对siRNA的高效、低毒转染试剂。

EntransterTM-R siRNA专用转染试剂,采用先进的纳米聚合物成分,细胞毒性非常低,转染时细胞密度可以低至20%,同时可以有血清有抗生素转染,转染后无需换液,转染效率高,细胞毒性小,节约时间、精力和试剂,目前被许多著名实验室选用,是一款优秀的siRNA转染试剂。

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