首先siRNA由于只 …
阅读更多 »实验室小白篇:细胞培养的基本操作
(一)无菌操作 细胞在体外生长,其生存环境发生了很大变化。首先,体外培养细胞缺乏抗感染能力,故应无菌操作,以最大限度地防止微生物污染。培养所用的一切物品、液体均应无菌。操作前最好先列出所需用品,培养液等须37°C预热或室温平衡,所有物品准备好后再开始操作, 避免往返拿取用品。 (二)细胞培养操作区域消毒 无菌间或超净台的操作区域使用前后需经紫外灯照射20-3 …
阅读更多 »(一)无菌操作 细胞在体外生长,其生存环境发生了很大变化。首先,体外培养细胞缺乏抗感染能力,故应无菌操作,以最大限度地防止微生物污染。培养所用的一切物品、液体均应无菌。操作前最好先列出所需用品,培养液等须37°C预热或室温平衡,所有物品准备好后再开始操作, 避免往返拿取用品。 (二)细胞培养操作区域消毒 无菌间或超净台的操作区域使用前后需经紫外灯照射20-3 …
阅读更多 »一、细胞培养所需的培养液 在细胞的研究和利用过程中,最主要的是要为细胞提供最适的生长条件,保持细胞培养开始时的群体状态。这就要求培养条件始终如一,近乎呆板地坚守细节和常规,而且细胞培养,试剂昂贵,费时、费力,不是随随便便就可以进行的。 细胞只有在最适生长条件下,才会保持正常的核型及功能。如果培养条件上打折扣,就意味着会出现带有染色体重排或突变变异株细胞。某些 …
阅读更多 »一、细胞培养瓶、培养皿和培养板 目前,细胞培养已很少使用传统的玻璃制品,如玻璃卡氏培养瓶、玻璃离心管、玻璃试剂瓶,而多数使用一次性的塑料制培养瓶、塑料制离心管及塑料制移液管等,而且这些物品的规格也较丰富,如培养瓶T25、T75 、T150、T175 (阿拉伯数字表示培养面积),现在还出现了培养袋、普通培养板(有不同孔径的,如 6 孔、12 孔、24 孔、48 …
阅读更多 »本方案描述了将ASO 转入果蝇S2 细胞以便抑制miRNA 功能的方法。通过检测miRNA靶蛋白水平或miRNA 靶基因3UTR 报道基因的活性,可以检测ASO 对miRNA 的效应。本方案是针对24 孔板设计的,若用其他多孔板、培养瓶或不同直径培养皿,应根据其表面积计算细胞密度和试剂体积 。 试剂 ASO ( 12.5μmol/L ) 和错配和/或无关对照 …
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