首先siRNA由于只 …
阅读更多 »蛋白质的保存方法如何选择?
保存方法的选择取决于几个因素,包括蛋白质内在的稳定性、所需的保存时间的长短和对于防止破坏所要求的程度。这些因素有很大的变异性,但是,在大多数情况下都应当遵守以下常规的准则。 如果仅仅是要将小批量的纯化蛋白质保存约几天的时间,那么通常只要以非冷冻的溶液形式4°C保存即可,如果需要保存较长的时间,或如果有明显的蛋白质降解(如可见的沉淀物或不可接受的功能损失),那 …
阅读更多 »保存方法的选择取决于几个因素,包括蛋白质内在的稳定性、所需的保存时间的长短和对于防止破坏所要求的程度。这些因素有很大的变异性,但是,在大多数情况下都应当遵守以下常规的准则。 如果仅仅是要将小批量的纯化蛋白质保存约几天的时间,那么通常只要以非冷冻的溶液形式4°C保存即可,如果需要保存较长的时间,或如果有明显的蛋白质降解(如可见的沉淀物或不可接受的功能损失),那 …
阅读更多 »一种按适当配方制造的冻干蛋白质制剂能够在几年内保持稳定,即使是在室温(Carpenter and Chang 1996) ;然而,冻干配方的最佳溶液组成和工艺条件的研制远远超出了典型学术实验室的能力范围。一个主要的困难是大多数实验室中所用的冻干机通常没有控制样品温度的能力,不能达到低水平的残留水(如低于质量的1%~2%),而低水平的残留水是冻干产品长期保存活 …
阅读更多 »可溶性蛋白质制备物的冷冻是最常用的保存方法之一。将一支装有蛋白质溶液的试管放入机械冰柜中既简单又方便,在低温中,化学降解的速度通常降低,而且如果冷冻本身不引起蛋白质变性,样品应当稳定几周至几个月,特别是将蛋白质样品保存在-80°C 或更低的温度中。然而,冷冻能够引起蛋白质变性,这是因为一些应激而造成的,这些应激包括:低温、溶质的浓度、冰-液体界面的形成和潜在 …
阅读更多 »保存蛋白质最方便的方式是在冰箱中(即4~8℃) 以不冻水溶液的形式保存,对于短期保存或蛋白质特别稳定,这是最有效的方法;然而,必须要认识到即使蛋白质不聚集,也会有渐进的化学降解(特别是氧化)。 在溶液条件(优化了天然状态的热力学稳定性)下,聚集能够被最小化,因为蛋白质总体已脱离了部分折叠、能够聚集的种类(Kim et al. 2000) 。例如,大多数蛋白质 …
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