英格恩生物技术博客 生物实验干货分享

1.      样品质量。所抽取样品的蛋白含量，蛋白变性是否充分等等，还有，蛋白样品的PH值是否在7~8之间。这会直接影响到样品浓缩的效果。此外，蛋白样品是否降解、目的蛋白是否已抽取充分都会对最终结果的可靠性有影响。 2.      凝胶质量。不连续SDS-PAGE胶对凝胶的要求较高，分离胶的PH值应在8.8左右，而浓缩胶的PH应在6.8左右，最好不要差过0 …

      宿主细胞的模式识别受体可以检测到微生物感染进而诱导先天免疫反应以激活宿主防御系统对抗入侵微生物，现分享一篇DNA转染（Entranster-H4000）与线粒体介导的先天性免疫反应研究的文献，指出果蝇zeste基因增强子同源物2（EZH2）是抗病毒天然免疫反应的负调节因子和抗病毒药物的新靶点。

       肾细胞癌(RCC)是成年人肾脏最常见的恶性肿瘤，占肾脏恶性肿瘤的90％以上，恶性程度高。其发病率约为成年人恶性肿瘤的3％,。肾细胞癌预后很差，对放疗、化疗均不敏感。目前，局部肾细胞癌的治疗取得了很大的进展，但是对于转移性肾细胞癌治疗的选择非常有限。因此，鉴定新的肾细胞癌生物标志物以及具有更好疗效的抗肿瘤药物仍亟待解决。mirRNA是内源性的非编 …

下面以Entranster-R4000试剂为例，说一下shRNA转染步骤（24孔板） 1.提前1天细胞种植 贴壁细胞：提前一天将细胞种植在24孔板中，以转染时细胞汇合度（Confluence）在30％左右为宜，转染前全培养基总量为0.45ml。 悬浮细胞：采用对数生长期的细胞，数量为常规培养细胞数的1/3进行转染实验。如某细胞常规培养的细胞数是6×105，那 …