在病毒包装过程中,如果观察到细胞大量死亡,是否还要收集病毒需要根据具体情况判断。以下是一些可能的考虑因素: 病毒滴度:尽管细胞大量死亡,仍然有可能产生高滴度的病毒。如果病毒滴度足够高,可以继续收集病毒用于后续实验。 污染:细胞大量死亡可能是由于污染引起的。如果怀疑有细菌、真菌或支原体污染,收集病毒可能不是一个好主意,因为污染会影响后续实验的准确性。 病毒本身 …
阅读更多 »病毒感染细胞过程中常出现的问题及解决方案
病毒感染增强剂envirus使用中常出现的问题及解决方案如下:
阅读更多 »使用带有GFP荧光标记的慢病毒感染细胞,想要检测GFP阳性率,通常用什么方法?
如果您使用的是带有GFP荧光标记的慢病毒感染细胞,想要检测GFP阳性率,通常情况下可以通过流式细胞仪来实现,步骤如下: 收集细胞:首先收集感染后的细胞,并用适当的缓冲液进行重悬。 去除死细胞:可以通过加PI(碘化丙啶)或7-AAD等染料来排除死细胞,这样有助于提高检测的准确性。 流式检测:使用流式细胞仪时,选择FITC通道(通常是FL1通道),因为GFP的荧 …
阅读更多 »慢病毒感染,胶体金测出来很高,可感染效果很差的原因
慢病毒感染效率低,尽管用胶体金测试显示滴度很高,可能有以下几个原因: 病毒颗粒质量:虽然胶体金检测显示病毒滴度很高,但这并不意味着所有的病毒颗粒都是功能性的。有可能病毒颗粒已经失活或者结构受损,无法有效感染目标细胞。 病毒浓度与效价的差异:胶体金检测主要测量病毒颗粒的数量,但这些颗粒不一定都具有感染性。有效感染的病毒颗粒(感染性单位)可能比实际检测的数量要低 …
阅读更多 »慢病毒滴度测定的倍比稀释实验中,设置复孔的作用?
在慢病毒滴度测定的倍比稀释实验中,设置复孔主要有以下几个作用: 提高实验数据的可靠性由于生物实验存在一定的随机误差,复孔可以减少实验数据的偶然性,提高测量的准确性和重复性。 计算平均值,减少误差即使计算滴度时可能未直接用到每个复孔的数据,而是取某个稀释度下的阳性孔(如GFP阳性细胞数或抗生素筛选存活细胞数),但通常会计算复孔的平均值,以降低误差。 观察实验一 …
阅读更多 »Cell Death Discovery | 南京大学口腔医学院:牙周膜成纤维细胞铁下垂机制新发现
《Cell Death Discovery》期刊上发表的题为“Periodontitis-level butyrate-induced ferroptosis in periodontal ligament fibroblasts by activation of ferritinophagy“的文章表明牙周炎水平的丁酸盐通过激活 NCOA4 …
阅读更多 »慢病毒感染与可溶性程序性死亡1蛋白和类风湿关节炎研究
类风湿性关节炎(RA)是一种关节炎症性疾病,其特征是慢性滑膜炎、进行性侵蚀和软骨破坏,导致关节变形和疼痛以及关节功能丧失。RA影响全世界0.5-1%的成年人,每年每100000人中诊断出有5_50人患有该病,而且在女性和老年人群中的发病率也更高。如果未经治疗,风湿性关节炎可能导致关节损伤、残疾和生活质量下降,此外还有心血管疾病和其他的并发症。该病的确切病因尚 …
阅读更多 »PD-1沉默削弱CAR-T细胞抗肿瘤功能
文献标题 PD-1 silencing impairs the anti-tumor function of chimeric antigen receptor modified T cells by inhibiting proliferation activity 影响因子 8.676(Journal for ImmunoTherapy of Cance …
阅读更多 »做慢病毒感染实验前,你需要哪些知识储备?
慢病毒载体的构建: 慢病毒载体的包装系统一般由两部分组成,即包装成分和载体成分。包装成分由HIV-1基因组去除了包装、逆转录和整合所需的顺式作用序列而构建,能够反式提供产生病毒颗粒所必需的蛋白;载体成分则与包装成分互补,即含有包装、逆转录和整合所需的顺式作用序列,同时具有异源启动子控制下的多克隆位点及在此位点插入的目的基因。将包装成分与载体成分的多个质粒共转 …
阅读更多 »病毒感染增强剂Envirus使用时出现细胞毒性怎么办?
出现细胞毒性的原因有: 1.增强剂用量过大。建议适当减少增强剂用量。 2.病毒量过大。适当减少病毒用量。 3.适当减少病毒用量。增加培养基量或更换培养基。
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