英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
腺病毒属于腺病毒科，分为两个属：禽腺病毒属（鸟腺病毒）和哺乳动物腺病毒属（人、猴、牛、马、猪、羊、犬和负鼠腺病毒）。这些病毒均携带一个线性双链DNA 基因组，由直径为70~100mm 的二十面体衣壳蛋白包裹。约36kb 的基因组包括4 个提供调控和复制功能的早期转录单位(El 、E2 、E3 、E4) 、2 个延迟早期单位(IX 和IVa2)和1 个指导包括 …
阅读更多 »病毒包装过程中，细胞大量死亡，还有必要收集病毒吗
在病毒包装过程中，如果观察到细胞大量死亡，是否还要收集病毒需要根据具体情况判断。以下是一些可能的考虑因素： 病毒滴度：尽管细胞大量死亡，仍然有可能产生高滴度的病毒。如果病毒滴度足够高，可以继续收集病毒用于后续实验。 污染：细胞大量死亡可能是由于污染引起的。如果怀疑有细菌、真菌或支原体污染，收集病毒可能不是一个好主意，因为污染会影响后续实验的准确性。 病毒本身 …
阅读更多 »AAV病毒-细胞外RNAs-TLR3信号通路认知障碍研究 （IF:39.3）
文献标题：Extracellular RNAs-TLR3 signaling contributes to cognitive impairment after chronic neuropathic pain in mice 影响因子：Signal Transduction and Targeted Therapy 是Nature旗下期刊，2023年影响因 …
阅读更多 »做慢病毒滴度测定实验，请问是所有的都用293t细胞来做，还是说我要在别的细胞上做稳转株，我用别的细胞去摸病毒滴度就可以呀？
核心原则 标准物理滴度测定：强烈推荐使用293T细胞。 功能性滴度测定/特定应用验证：使用你的目标细胞。 详细解释 为什么推荐293T细胞测定物理滴度？ 高易感性： 293T细胞对慢病毒感染非常敏感，因为它们高表达慢病毒进入所需的受体（如LDL受体）。 高转导效率： 它们通常能达到非常高的转导效率（>80%甚至90%+），这使得检测阳性细胞、计算滴度变 …
阅读更多 »测定病毒滴度时，是使用 HEK293 细胞，还是用目的细胞？
测定病毒滴度时，是否可以直接使用 HEK293 细胞，取决于你使用的病毒类型和实验目的。一般来说： 如果是腺病毒或慢病毒，HEK293 细胞（特别是 HEK293T 细胞）通常是不错的选择，因为它们表达病毒包装过程中需要的辅助因子（如腺病毒的 E1A/E1B 或慢病毒的 VSV-G），可以有效地被感染并产生明显的病毒效应。因此，很多实验室会用 293 细胞测 …
阅读更多 »慢病毒载体
慢病毒属于反转录病毒科，与该科其他病毒一样，病毒粒子携带ssRNA, 必须反转录并整合至宿主细胞基因组（原病毒）产生有效感染。慢病毒的显著特点是其基因组复杂、圆柱形或圆锥形的核衣壳携带病毒基因组。核衣壳被携带包膜糖蛋白的双层膜包裹，包膜糖蛋白负责与细胞表面受体进行相互作用及进入宿主细胞。反转录病毒是几乎所有脊椎动物的主要病原体。人类免疫缺陷病毒l 型（HIV …
阅读更多 »转导细胞的检测分析
1. 制备载体储备液。 2. 以每个靶细胞不同的MOI 或载体剂量转导靶细胞。 腺病毒载体： 100~ 10 000 个病毒颗粒／靶细胞。腺相关病毒载体： 10 000~ 100 000 个病毒基因组／靶细胞。慢病毒载体： MOI5 ~ 500 。 3 在转导后3 ~ 5 天对转入基因的表达进行评价。 对于载体编码蛋白质，有多种方法可用来评价转导细胞中转入基 …
阅读更多 »慢病毒适用于哪些细胞？
慢病毒（Lentivirus）载体是以 HIV-1 （人类免疫缺陷1型病毒）为基础发展起来的基因治疗载体。具有感染谱广泛、可以有效感染分裂期和静止期细胞、长期稳定表达外源基因等优点，因此成为导入外源基因的有力工具。现在慢病毒系统已经被广泛应用到各种细胞系的基因过表达、RNA干扰、microRNA研究以及活体动物实验中。 慢病毒有如下特点： ● 感染范围广 …
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