英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
1. RNA与转染试剂比例不佳 由于RNA序列差异、合成条件不同以及是否带有荧光等标记，决定了RNA和转染试剂在不同情况下会有不同的最佳条件，建议先进行预实验优化。 2. 细胞密度不佳 调整细胞密度到转染时汇合度为20-40%。成功转染siRNA的细胞会产生目标基因表达下调，但未成功转染的细胞却不受影响，这 …
阅读更多 »siRNA答疑专题总结（上）
Q1：如果慢病毒载体中没有抗性标记，只有GFP，请问还能筛选稳转的细胞传代培养吗？ A1：采用流式分选是流式细胞仪的一个功能，有流式细胞仪就可以了。一般实验室对流式都有专门的人员操作，不需要自己动手。由于没有抗性，需要注意分选过程的无菌操作。 Q2：RNA干扰如果用慢病毒做稳转的细胞株，什么样的目的RNA都可以用来干扰来做稳转的细胞株吗，目的RNA所编码蛋白 …
阅读更多 »RNA转染（Entranster）与STAT3和髓源性抑制细胞研究
髓源性抑制细胞（MDSC）是一种免疫抑制性网络的主要组成部分。STAT3在调节MDSC方面有重要作用。现分享一篇用RNA转染试剂Entranster-R4000转染miRNA与STAT3和MDSC研究的文献，研究中指出，STAT3的表达可能是由miR-17-5p和miR-20a调节的，研究结果表明miR-17-5p和miR-20a可能通过阻断S …
阅读更多 »miRNA转染（Entranster）与白细胞介素IL-23受体和甲状腺炎研究
Hashimoto甲状腺炎（HT）是一种典型的器官特异性自身免疫性疾病，其特征是自身对甲状腺抗原的耐受性降低。白细胞介素IL-23受体（IL-23R）越来越被认为是自身免疫性疾病的一个关键点，包括Hashimoto甲状腺炎（HT）。然而，调节IL-23R表达的分子机制尚不清楚。现分享一篇miRNA转染（Entranster-R4000）与白细胞介 …
阅读更多 »RNA转染与大鼠肺辐射损伤中microRNA和mRNA表达谱整合研究
暴露与辐射中会引起细胞反应，这可能受到基因表达网络的调控。miRNA是一种小的非编码RNA，通过促进mRNA的降解或抑制蛋白质的翻译来调节基因的表达。在放射性肺损伤中miRNA和mRNA的表达模式还不是很清楚，并且miRNA在这个过程中的作用还未有研究。现分享一篇RNA转染（Entranster）与大鼠肺辐射损伤中microRNA和mRNA表达谱 …
阅读更多 »RNA转染（Entranster）与mir-136诱导骨髓细胞分化研究
免疫细胞谱系规范和功能受祖源和环境因素的影响。免疫细胞，如中性粒细胞、单核细胞和髓系抑制因子细胞在炎症环境中分化的机制尚未完全阐明。现分享一篇RNA转染（Entranster）与mir-136诱导骨髓细胞分化研究的文献，以供参考。
阅读更多 »RNA转染与胰高血糖素样肽-1和成骨细胞增殖和分化研究
之前研究已经证明，胰高血糖素样肽-1（GLP-1）及其受体激动剂有利于骨骼代谢和合成。然而，GLP-1是否可以直接影响成骨细胞介导的骨形成仍存在争议，其分子机制有待进一步阐明。现分享一篇RNA转染（Entranster）与胰高血糖素样肽-1和成骨细胞增殖和分化研究的文献，以供参考。
阅读更多 »mRNA细胞转染实验步骤
下面以Entranster-R4000试剂为例，说一下mRNA转染步骤（24孔板） 1.提前1天细胞种植 贴壁细胞：提前一天将细胞种植在24孔板中，以转染时细胞汇合度（Confluence）在30％左右为宜，转染前全培养基总量为0.45ml。 悬浮细胞：采用对数生长期的细胞，数量为常规培养细胞数的1/3进行转染实验。如某细胞常规培养的细胞数是6×105，那么 …
阅读更多 »进行2个不同基因的siRNA共转染，需要加大核酸或者转染试剂的剂量吗？这个和做2个质粒共转染有什么区别？
进行2个不同基因的siRNA共转染时，确实可能需要调整核酸或者转染试剂的剂量，但和质粒共转染的情况有一些区别。 转染试剂的剂量： 当你进行siRNA共转染时，转染试剂的剂量通常依赖于转染效率。对于siRNA来说，一般情况下转染试剂的量不需要比单一siRNA转染时增加太多，因为转染试剂的作用主要是包裹和传递siRNA到细胞内，只要达到足够的转染效率就可以。如果 …
阅读更多 »RNA转染（Entranster）与前列腺癌细胞紫杉醇耐药研究
前列腺癌是男性常见的癌症。其在中国的发病率在男性恶性肿瘤中占第六。目前，以多西他赛为主的化疗是激素难治性前列腺癌的首选治疗方法，可以适当提高患者的生存率。然而，化疗耐药仍是前列腺癌治疗的主要障碍。肿瘤细胞的耐药性不仅延缓了治疗周期，而且增加了毒性。化疗药物的副作用，已成为化疗失败的主要原因之一。现分享一篇RNA转染（Entranster）与前列腺癌细胞紫杉醇 …
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