为了达到高的转染效率,在转染实验过程中,需要注意以下几点: 1.纯化siRNA siRNA的浓度和纯度对转染实验非常重要。为得到高纯度的siRNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白和盐离子。注意:化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化(即PAGE胶纯化)。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致 …
阅读更多 »siRNA转染至细胞有哪些方法?
siRNA导入细胞有以下几种方法:化学转染技术、电穿孔法、磷酸钙共沉淀技术、显微注射和载体导入技术。选择时应该依据实验条件考虑以下因素:细胞对转入方式的承受能力、细胞对病毒侵染的易感性、细胞的生长特性等。对贴壁细胞来说化学转染技术(Entranster)是最为常用的方法,而对悬浮细胞则采用电穿孔法效果较好 …
阅读更多 »进行2个不同基因的siRNA共转染,需要加大核酸或者转染试剂的剂量吗?这个和做2个质粒共转染有什么区别?
进行2个不同基因的siRNA共转染时,确实可能需要调整核酸或者转染试剂的剂量,但和质粒共转染的情况有一些区别。 转染试剂的剂量: 当你进行siRNA共转染时,转染试剂的剂量通常依赖于转染效率。对于siRNA来说,一般情况下转染试剂的量不需要比单一siRNA转染时增加太多,因为转染试剂的作用主要是包裹和传递siRNA到细胞内,只要达到足够的转染效率就可以。如果 …
阅读更多 »RNA转染与LncRNA LINC00511和肝癌细胞增殖和转移研究
长链非编码RNA在人肝癌(HCC)中异常表达,并与HCC的进展有关。lncRNA linc0511(linc0511)已被证实在一些肿瘤中作为肿瘤启动子。然而,作为一中新颖的LncRNA,linc00511的具体功能仍然不是很清楚。现分享一篇RNA转染(engreen)与LncRNA LINC00511和肝癌细胞增殖和转移研究的文献,旨在评估 …
阅读更多 »siRNA转染实验的关键点
1.纯化siRNA siRNA的浓度和纯度对转染实验非常重要。为得到高纯度的siRNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白和盐离子。注意:化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化(即PAGE胶纯化)。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致siRNA转染实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在,如皮 …
阅读更多 »提高RNA转染效率的几点建议
1.纯化RNA 在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白和盐离子。注意:化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化(即PAGE胶纯化)。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致RNA实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在,如皮肤,头发,所有徒手接触过 …
阅读更多 »RNA转染与利拉鲁肽和MC3T3-E1细胞凋亡研究
近年来,对肠促胰岛素和骨的关系的兴趣不断增加。之前的研究已经表明胰高血糖素样肽-1(GLP-1)及其受体激动剂对骨骼代谢具有有益的合成代谢作用,如通过肠-骨轴促进成骨细胞的增殖和分化。然而,对于GLP-1对成骨细胞凋亡的影响及其相关机制并不清楚。现分享一篇RNA转染(Entranster)与利拉鲁肽和MC3T3-E1细胞凋亡研究的文献,以供参考。
阅读更多 »如何优化RNA转染条件?
可从以下几方面进行优化: 1.纯化RNA 在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白和盐离子。注意:化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化(即PAGE胶纯化)。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致RNA实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在,如 …
阅读更多 »RNA转染(Entranster)与多肿瘤相关microRNA调控树突状细胞的存活和寿命研究
树突状细胞(DCS)包括传统的DCS和浆细胞样DCS,是诱导适应性免疫和耐受性的关键性的APC。然而,成熟的DCs也在不同组织和器官中发生凋亡,尤其是淋巴结。DC凋亡是调节耐受和免疫平衡的重要事件。肿瘤使用广泛的免疫抑制策略,如降低树突状细胞(DCS)的寿命和存活率,以减少免疫应答并限制免疫治疗的效果。现分享一篇RNA转染(Entranster)与多肿瘤相关 …
阅读更多 »RNA转染(Entranster)与人单核细胞来源的树突状细胞的染色质状态调控研究
树突状细胞(DCS)是抗原(Ag)呈递细胞,具有独特的刺激幼T细胞和启动原发性免疫应答的能力。然而,DCs在中枢和外周免疫耐受的诱导和T细胞免疫应答的类型的调节中也具有关键性的作用。依赖于环境,树突状细胞(DCS)可能变得活跃或耐受性,但很少知道是否遗传的表观遗传修饰涉及这些过程。现分享一篇RNA转染(Entranster)与人单核细胞来源的树突状细胞的染色 …
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