英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
这种情况可能是由多种因素引起的，以下是一些可能的原因： 转录水平和蛋白水平的不同调控机制：虽然shRNA能够有效地降低目标基因的mRNA和蛋白表达，但有时候蛋白质的功能并不完全依赖于其表达量。有可能是基因表达抑制后，细胞通过一些补偿机制（比如其他途径的上调或活化）来恢复其功能，导致表型不一致。 shRNA的特异性和脱靶效应：shRNA可能会靶向与目标基因相似 …
阅读更多 »怎么样做好siRNA细胞转染实验？
1.纯化siRNA siRNA的浓度和纯度对转染实验非常重要。为得到高纯度的siRNA，推荐用玻璃纤维结合，洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸，小的寡核苷酸，蛋白和盐离子。注意：化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化（即PAGE胶纯化）。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致siRNA转染实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在，如皮 …
阅读更多 »通过转染双链siRNA 在哺乳动物细胞中进行RNA 干扰
长链dsRNA 不能用于多数哺乳动物细胞中，这是由于它能诱导干扰素反应而引发基因表达和细胞凋亡的变化。本方案介绍了一种向哺乳动物细胞中转入短的双链siRNA 的方法，双链siRNA 因其长度过短而不能引起与dsRNA 相关的序列非特异性反应。本方案适用于24 孔板中生长的细胞。如果使用了其他规格的多孔板、培养瓶或者培养皿，则需要根据培养孔的表面积换算细胞密度 …
阅读更多 »RNA转染（Entranster）与多肿瘤相关microRNA调控树突状细胞的存活和寿命研究
树突状细胞（DCS）包括传统的DCS和浆细胞样DCS，是诱导适应性免疫和耐受性的关键性的APC。然而，成熟的DCs也在不同组织和器官中发生凋亡，尤其是淋巴结。DC凋亡是调节耐受和免疫平衡的重要事件。肿瘤使用广泛的免疫抑制策略，如降低树突状细胞（DCS）的寿命和存活率，以减少免疫应答并限制免疫治疗的效果。现分享一篇RNA转染（Entranster）与多肿瘤相关 …
阅读更多 »成骨细胞分泌白细胞介素-9支持巨核细胞生成（IF：20.3）
标题 Osteoblasts support megakaryopoiesis through production of interleukin-9* 影响因子 该论文发表于《Blood》期刊，其2022年的影响因子为20.3，属于血液学领域的顶级期刊。 文献摘要 本研究揭示了成骨细胞通过分泌白细胞介素-9（IL-9）支持巨核细胞生成和血小板形成的新机制 …
阅读更多 »RNA转染与食管鳞状细胞癌的生长抑制和放射增敏作用研究
食管癌是世界范围内最常见的恶性肿瘤之一，预后差。化疗耐药和癌症复发是其治疗中最困难的问题之一。识别潜在的分子机制是发展新疗法的关键。现分享一篇RNA转染（Entranster）与食管鳞状细胞癌的生长抑制和放射增敏作用研究的文献，以供参考。
阅读更多 »RNA转染（Entranster）与利拉鲁肽和MC3T3-E1细胞凋亡研究
近年来，对肠促胰岛素和骨的关系的兴趣不断增加。之前的研究已经表明胰高血糖素样肽-1（GLP-1）及其受体激动剂对骨骼代谢具有有益的合成代谢作用，如通过肠-骨轴促进成骨细胞的增殖和分化。然而，对于GLP-1对成骨细胞凋亡的影响及其相关机制并不清楚。现分享一篇RNA转染试剂（Entranster）与利拉鲁肽和 …
阅读更多 »siRNA转染与成纤维细胞瘤细胞l929-a研究
L929成纤维细胞瘤细胞（l929-a）和L929纤维肉瘤细胞（l929-n）是不同的细胞系，常用于肿瘤坏死的细胞毒性因子α（TNFα）的研究，TNFa已被报道可诱导两种细胞系的坏死。然而，当比较TNFα诱导的在这两个细胞系的细胞死亡时，l929-n表现出典型的RIP3依赖性细胞坏死，在l929-a中却不是 …
阅读更多 »RNA转染（Entranster）与肠黏膜屏障的信号转导和细菌移位研究
肠上皮表面由一层柱状上皮细胞构成，形成一个与大多数管腔内细菌直接接触的屏障，在防止细菌易位中起着重要作用。肠上皮屏障功能在炎症性肠病（IBD）的发病机制中起着至关重要的作用，但其机制尚未完全阐明。现分享一篇RNA转染（Entranster）与肠黏膜屏障的信号转导和细菌移位研究的文献，以供参考。
阅读更多 »RNA转染（Entranster）与骨髓细胞分化研究
免疫细胞系的规范和功能受祖细胞起源和环境因素的影响。免疫细胞如中性粒细胞、单核细胞和髓系抑制因子，其在炎症环境中的分化机制尚未完全阐明。现分享一篇RNA转染miRNA（Entranster）与骨髓细胞分化研究的文献，以供参考。
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