2022年 10月 4日, 星期二
新闻

RNA转染

RNA转染与人鼻病毒1B基因敲除和干扰素应答的再激活研究

      人鼻病毒(HRV)是属于Picornaviridae家族肠道病毒属的单链正义RNA病毒。它在20世纪50年代首次被发现。将近60年后,已经鉴定出超过100种血清型/基因型病毒。HRVs(HV-A,-B,-C)是所有年龄组,尤其是儿童中呼吸道感染最常见的原因,但尚未开发出有效的治疗HVS的药物。现分享一篇RN …

阅读更多 »

揭秘RNAi,缔造实验神话

用siRNA进行transient transfection不稳定,几代细胞以后,症状就会消失,所以在转染几天(1-3)后要立刻抽提蛋白,进行分析。 用质粒中的shRNA进行转染,如果质粒含有抗生素位点,可以进行筛选,获得较稳定的细胞株系,但需要时间较长 用病毒中的shRNA进行感染(infection),抗生素筛选后,可以获得很稳定细胞株系。 瞬时RNAi …

阅读更多 »

细胞RNA转染注意事项

1.纯化RNA 在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白和盐离子。注意:化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化(即PAGE胶纯化)。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致RNA实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在,如皮肤,头发,所有徒手接触过 …

阅读更多 »

RNA转染(Entranster)与IL-17下调小鼠胶原性关节炎嗅间充质干细胞的免疫抑制能力研究

嗅间充质干细胞(OE-MSCs)是嗅觉固有层中一种新的常驻干细胞类型。OE-MSCs通过调节T细胞的反应,包括调节性T细胞(Treg)的上调和Th1/Th17细胞的下调而发挥其免疫抑制能力。作为炎性细胞因子,IL-17在胶原诱导性关节炎(CIA)的发展过程中起着关键的作用。然而,目前尚不清楚IL-17水平的升高是否会影响OE-MSCs在炎症状态下的免疫抑制功 …

阅读更多 »

细胞铺板密度对于siRNA转染为什么很重要?

       RNA转染试剂Entranster-R4000成功转染siRNA的细胞会产生目标基因表达下调,但未成功转染的细胞却不受影响,这时转染效率和总的细胞数量就很重要,一般细胞数量较少时转染效率高,一些试剂由于本身毒性的影响,太低的细胞数量时毒性明显,所以会要求较高的细胞密度(汇合度),顺便说一句,看一个转染试剂 …

阅读更多 »

RNA转染与mir-34a通过靶向Foxp3损害Treg/Th17平衡研究

       调节性T(Treg)细胞亚群及其特异性转录Foxp3是通过控制效应器T(Teff)细胞反应维持免疫稳态的独特细胞类型。尽管有Treg/teff紊乱的Treg细胞中的缺陷通常会导致自身免疫性疾病,但其确切机制尚未完全揭示。现分享一篇RNA转染(entranster)与mir-34a通过靶向Foxp3损害Treg/Th17平衡研究的文献,以供参考。 …

阅读更多 »

如何能够做好siRNA转染实验?

1.纯化siRNA siRNA的浓度和纯度对转染实验非常重要。为得到高纯度的siRNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白和盐离子。注意:化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化(即PAGE胶纯化)。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致siRNA转染实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在,如皮 …

阅读更多 »

miRNA转染(Entranster)与白细胞介素IL-23受体和甲状腺炎研究

      Hashimoto甲状腺炎(HT)是一种典型的器官特异性自身免疫性疾病,其特征是自身对甲状腺抗原的耐受性降低。白细胞介素IL-23受体(IL-23R)越来越被认为是自身免疫性疾病的一个关键点,包括Hashimoto甲状腺炎(HT)。然而,调节IL-23R表达的分子机制尚不清楚。现分享一篇miRNA转染(Entranster-R4000)与白细胞介 …

阅读更多 »