RNA转染

      L929成纤维细胞瘤细胞（l929-a）和L929纤维肉瘤细胞（l929-n）是不同的细胞系，常用于肿瘤坏死的细胞毒性因子α（TNFα）的研究，TNFa已被报道可诱导两种细胞系的坏死。然而，当比较TNFα诱导的在这两个细胞系的细胞死亡时，l929-n表现出典型的RIP3依赖性细胞坏死，在l929-a中却不是 …

      肿瘤坏死因子受体相关因子6（TRAF6）是一种重要的E3泛素连接酶 ，在先天免疫和适应性免疫中有着重要的作用 。TRAF6被报道可参与鳞状细胞癌和胃癌的侵袭性生长和转移，以及骨髓增生异常综合征和急性髓系白血病 。由于TRAF6在众多的信号转导通路具有很重要的地位，使得它成为肿瘤治疗的一个潜在靶点。现分享一篇RNA转染（Entranster）与骨髓 …

文献分析：肺部疾病实验及英格恩产品的作用 文献1： 标题：Divergent Roles of miR-3162-3p in Pulmonary Inflammation in Normal and Asthmatic Mice as well as Antagonism of miR-3162-3p in Asthma Treatment 期刊：Inter …

下面以Entranster-R4000试剂为例，说一下siRNA转染步骤（24孔板） 1.提前1天细胞种植 贴壁细胞：提前一天将细胞种植在24孔板中，以转染时细胞汇合度（Confluence）在30％左右为宜，转染前全培养基总量为0.45ml。 悬浮细胞：采用对数生长期的细胞，数量为常规培养细胞数的1/3进行转染实验。如某细胞常规培养的细胞数是6×105，那 …

B淋巴细胞刺激因子（BLyS），一种肿瘤坏死因子超家族成员，是一种有效的体内外B细胞共活化剂，可诱导B细胞增殖和分泌免疫球蛋白。多发性骨髓瘤（MM）是一种无法治愈的晚期分化B细胞恶性肿瘤（浆细胞）。先分享一篇RNA转染（Entranster）与B淋巴细胞刺激因子（BLyS）和多发性骨髓瘤（MM）研究的文献，以供参考。

最近的一些报道表明，与启动子区互补的小激活dsRNA [双链RNA；SaRNA（小激活dsRNA）]可以上调哺乳动物细胞中的基因表达，这种现象被称为RNAa（RNA激活）。然而，关于什么是启动子靶向SARNA的靶分子，以及参与该过程的蛋白质是什么等RNAa的分子机制并不清楚。现分享一篇RNA转染（Entranster）与启动子相关的小双链RNA激活研究的文献 …

可从以下几方面进行优化： 1.纯化RNA 在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA，推荐用玻璃纤维结合，洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸，小的寡核苷酸，蛋白和盐离子。注意：化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化（即PAGE胶纯化）。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致RNA实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在，如 …

一般原则： 1.转染试剂对细胞有毒性。因此通常会建议在 4–6小时后更换新鲜培养基，以减轻毒性，保证细胞状态。 2.换液是否影响转染效率？ 针对你要拍荧光观察转染效率的情况： 如果只是想观察转染效率，一般建议 不要太早换液，至少等到荧光信号开始显现（通常24–48小时）再拍照。 如果细胞状态不好（明显发黄、漂浮、死亡增加），建议在 4–6小时换液，以保证细胞 …

       多发性骨髓瘤（MM）是一种无法治愈的血液恶性肿瘤，其特点是恶性浆细胞克隆性增殖，与大多数患者产生单克隆免疫球蛋白有关。细胞因子白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-10、干扰素-α和B细胞活化因子（BAFF）在促进MM细胞生长和耐药中的作用已得到明确阐述。越来越多的证据表明BAFF影响MM细胞的生长、存活、迁移和耐药性。B细胞成熟抗原（BCM …

1.纯化RNA 在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA，推荐用玻璃纤维结合，洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸，小的寡核苷酸，蛋白和盐离子。注意：化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化（即PAGE胶纯化）。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致RNA实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在，如皮肤，头发，所有徒手接触过 …