转染试剂 转染中要额外注意的就是转染试剂应该是确认无RNase污染的,而且也尽量避免和质粒DNA转染混用——即使试剂本身兼容DNA和RNA转染,因RNA与DNA大小不同,转染条件不同,所需的试剂也应不同,所以RNA专用的转染试剂会更好一些。比如Entranster-R4000. RNA转染时RNA的用量 RNA转染的用量必须参考RNA转染试剂说明,因为RNA …
阅读更多 »怎样提高悬浮细胞的siRNA转染效率?
悬浮细胞是指细胞生长不依赖支持物表面,在培养液中呈悬浮状态生长,如淋巴细胞。在实验室经常会遇到悬浮细胞的转染,其和贴壁细胞转染还是有很大不同的。 目前大多数实验室用的是脂质体类的转染试剂,脂质体转染是基于电荷吸引原理,先形成 …
阅读更多 »RNA转染与大鼠肺辐射损伤中microRNA和mRNA表达谱研究
暴露与辐射中会引起细胞反应,这可能受到基因表达网络的调控。miRNA是一种小的非编码RNA,通过促进mRNA的降解或抑制蛋白质的翻译来调节基因的表达。在放射性肺损伤中miRNA和mRNA的表达模式还不是很清楚,并且miRNA在这个过程中的作用还未有研究。现分享一篇RNA转染(Entranster)与大鼠肺辐 …
阅读更多 »RNA转染(Entranster)与骨髓瘤细胞中TRAF6蛋白表达水平研究
肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)是一种重要的E3泛素连接酶 ,在先天免疫和适应性免疫中有着重要的作用 。TRAF6被报道可参与鳞状细胞癌和胃癌的侵袭性生长和转移,以及骨髓增生异常综合征和急性髓系白血病 。由于TRAF6在众多的信号转导通路具有很重要的地位,使得它成为肿瘤治疗的一个潜在靶点。现分享一篇RNA转染(Entranster)与骨髓 …
阅读更多 »RNA转染(Entranster)与IL-17下调小鼠胶原性关节炎嗅间充质干细胞的免疫抑制能力研究
嗅间充质干细胞(OE-MSCs)是嗅觉固有层中一种新的常驻干细胞类型。OE-MSCs通过调节T细胞的反应,包括调节性T细胞(Treg)的上调和Th1/Th17细胞的下调而发挥其免疫抑制能力。作为炎性细胞因子,IL-17在胶原诱导性关节炎(CIA)的发展过程中起着关键的作用。然而,目前尚不清楚IL-17水平的升高是否会影响OE-MSCs在炎症状态下的免疫抑制功 …
阅读更多 »RNA转染(Entranster)与启动子相关的小双链RNA激活研究
最近的一些报道表明,与启动子区互补的小激活dsRNA [双链RNA;SaRNA(小激活dsRNA)]可以上调哺乳动物细胞中的基因表达,这种现象被称为RNAa(RNA激活)。然而,关于什么是启动子靶向SARNA的靶分子,以及参与该过程的蛋白质是什么等RNAa的分子机制并不清楚。现分享一篇RNA转染(Entranster)与启动子相关的小双链RNA激活研究的文献 …
阅读更多 »RNA转染过程中常见问题及解决方案
RNA转染试剂Entranster-R4000使用过程中常见问题及解决方案如下:
阅读更多 »RNA转染与非连接蛋白Cx32在宫颈癌细胞中作用的研究
缝隙连接蛋白(Cx)构成脊椎动物的缝隙连接(GJ),可调节重要的细胞过程,包括电耦合,增殖,分化和凋亡。与最初在上世纪60年代提出的“接触增长抑制”概念一致,GJ和CX被公认为肿瘤抑制;恶性肿瘤的特点是GJ的缺失。在恶性肿瘤细胞中,转染Cx以GJ依赖的方式提高放疗/化疗诱导的细胞凋亡(有毒的“旁观者效应”)。Cx在宫颈癌中的作用尚不清楚。现分享一篇RNA转染 …
阅读更多 »做好siRNA转染的要点
1.纯化siRNA siRNA的浓度和纯度对转染实验非常重要。为得到高纯度的siRNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白和盐离子。注意:化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化(即PAGE胶纯化)。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致siRNA转染实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在,如皮 …
阅读更多 »RNA转染(Entranster)与骨髓细胞分化研究
免疫细胞系的规范和功能受祖细胞起源和环境因素的影响。免疫细胞如中性粒细胞、单核细胞和髓系抑制因子,其在炎症环境中的分化机制尚未完全阐明。现分享一篇RNA转染miRNA(Entranster)与骨髓细胞分化研究的文献,以供参考。
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