最近的一些报道表明,与启动子区互补的小激活dsRNA [双链RNA;SaRNA(小激活dsRNA)]可以上调哺乳动物细胞中的基因表达,这种现象被称为RNAa(RNA激活)。然而,关于什么是启动子靶向SARNA的靶分子,以及参与该过程的蛋白质是什么等RNAa的分子机制并不清楚。现分享一篇RNA转染(Entra …
阅读更多 »基于DNA适配体的PROTAC治疗癌症研究(IF18.8)
标题:An engineered DNA aptamer-based PROTAC for precise therapy of p53-R175H hotspot mutant-driven cancer 期刊:Science Bulletin 影响因子:18.8 文献概要 该研究开发了一种基于工程DNA适配体的PROTAC(蛋白降解靶向嵌合体)——dp5 …
阅读更多 »体内转染与腹膜间质细胞的上皮细胞凋亡转化研究
腹膜纤维化(PF)是一种公认的与持续性非卧床腹膜透析治疗相关的并发症,其特点是早期可逆转的上皮-间质转换(EMT)。现分享一篇体内转染(entranster)与LncRNA AK089579抑制腹膜间质细胞的上皮细胞凋亡转化研究的文献,以供参考。
阅读更多 »ECL发光液常见问题及解答1
ECL发光灵敏度越高越好吗? A: 不是。大多数实验的蛋白浓度在pg-ng级别,用增强型的发光液就可以。比如英格恩的Enlight发光液。 2.ECL发光液为什么需要避光保存? A:因为ECL发光液里的鲁米那等发光成分很容易因为光而失活,所以需要避光保存。 3.ECL发光液多长时间容易失效,用一瓶ECL试剂,结果有差异,是否是失效了? A:早期的ECL发光也 …
阅读更多 »Crispr/Cas9腺病毒构建流程
Crispr/Cas9 简介 CRISPR (clustered, regularly interspaced, short palindromic repeats)是一种来自细菌降解入侵的病毒 DNA 或其他外源 DNA 的免疫机制。目前,来自Streptococcus pyogenes 的CRISPR-Cas9系统应用最为广泛。Cas9 蛋白(含有两个核 …
阅读更多 »如何使动物体内病毒感染效率提高20-50倍
由于动物体内环境的复杂性,我们在选择动物体内病毒感染试剂时,会区别于细胞实验。通常为避免动物产生过激的免疫反应或者死亡,这类病毒感染试剂纯度会更高些,并且适配体液环境。因此,争对动物体内病毒感染实验,则需要适配特定的动物体内病毒感染增强试剂。 发表在《aging》上的一篇题为“Ubenimex induces autophagy inhibition and …
阅读更多 »体内转染与miRNA-144-3p和脑出血诱导的继发性脑损伤研究
脑出血约占死亡和发病率的50%,有不同的亚型,包括由脑实质深处的小血管破裂引发的脑出血(ICH)。此外,在存活的患者中,75%的患者受到不同程度的运动、感觉、思维定势和其他不可替代的脑功能损伤。即使结合复杂的治疗方法,继发性脑损伤(SBI)也可能发生在ICH之后,令人失望的预后是不可避免的。几十年来,医学研究一直致力于发现一种有效和直接的治疗方 …
阅读更多 »一个抑制脑中风的miRNA
MicroRNAs(miRNAs)是一类非编码小RNA,miRNAs能结合到靶基因mRNA的3’非翻译区诱导转录退化和/或抑制翻译。miRNA在多种病理生理过程中发挥着重要的作用。 Let-7c是最丰富且高度保守的miRNA。以往的研究表明,let-7c通过调节细胞增殖和细胞凋亡抑制癌细胞存活率。最近研究表明Let-7c是巨噬细胞极化的重要调节器。 Let- …
阅读更多 »逆转录病毒可以共感染吗?
可以。逆转录病毒(如MLV、lentivirus等)可以共感染同一细胞,尤其是不同病毒包装不同的转基因载体时,可以实现共转导(co-transduction),从而使同一细胞获得多个基因。 但要注意: 病毒滴度足够高:每个病毒的MOI(Multiplicity of Infection)需要合适,才有可能让同一细胞被两种病毒都感染。 标记或选择机制清晰:常用 …
阅读更多 »siRNA转染效率不理想的原因
siRNA转染效率不理想,常见的原因有: 1. RNA与转染试剂比例不佳 由于RNA序列差异、合成条件不同以及是否带有荧光等标记,决定了RNA和转染试剂在不同情况下会有不同的最佳条件,建议先进行预实验优化。 2. 细胞密度不佳 调整细胞密度到转染时汇合度为20-40%。成功转染siRNA的细胞会产生目标基因表达下调,但未成功转染的细胞却不受影响,这时转染效率 …
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英格恩生物技术博客 生物实验干货分享