2026年 9 月 23日, 星期三
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英格恩技术资料

ECL发光液(enlight)与PPARα调节肿瘤细胞的增殖和衰老研究

肉碱棕榈酰转移酶(Carnitine palmitoyltransferase 1c,cpt1c),位于线粒体膜外,在脂肪酸的转运和氧化中起着关键的作用。它也参与细胞增殖,是癌细胞衰老的潜在驱动力。然而,其上游调控机制是未知的。过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARαα)是一个配体激活转录因子,可调节脂质代谢和肿瘤进展。现分享一篇ECL发光液(enlight) …

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DNA转染(Entranster)与ZNF121和乳腺上皮细胞的靶基因调控研究

新型锌指蛋白121(ZNF121)已被证明在物理和功能上与MYC癌蛋白相关联,以调节细胞增殖和可能的乳腺癌发展。为了进一步了解ZnF121在细胞增殖和癌变过程中的作用,现分享一篇DNA转染(Entranster)与ZNF121和乳腺上皮细胞的靶基因调控研究的文献,以供参考。

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慢病毒感染后72小时,效率低,细胞已经长满,有什么办法补救?

在慢病毒感染后72小时感染效率较低、细胞已经长满的情况下,可以尝试以下几个措施来提高感染效率并优化实验条件: 细胞传代或重新播种:如果细胞已经长满(汇合度较高),可能会影响慢病毒的感染效率。可以将细胞进行传代,重新播种在新的培养板上,使其达到较低的汇合度(例如30-50%),然后再进行感染。 优化感染时的MOI(Multiplicity of Infecti …

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体内转染与LncRNA AK016739抑制成骨细胞分化和骨形成研究

中老年妇女绝经后骨质疏松症研究的发病率为50%,然而现有疗法的效果并不理想。新的证据证明长非编码RNA(lncrnas)与多种生理和病理过程相关,包括发育、致癌和骨的形成。然而,有关lncRNAs调节骨形成的报道相对有限。现分享一篇体内转染(entranster)与LncRNA AK016739抑制成骨细胞分化和骨形成研究的文献,以供参考。

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慢病毒感染与可溶性程序性死亡1蛋白和类风湿关节炎研究

类风湿性关节炎(RA)是一种关节炎症性疾病,其特征是慢性滑膜炎、进行性侵蚀和软骨破坏,导致关节变形和疼痛以及关节功能丧失。RA影响全世界0.5-1%的成年人,每年每100000人中诊断出有5_50人患有该病,而且在女性和老年人群中的发病率也更高。如果未经治疗,风湿性关节炎可能导致关节损伤、残疾和生活质量下降,此外还有心血管疾病和其他的并发症。该病的确切病因尚 …

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如何优化细胞RNA转染实验条件?

可从以下几方面进行优化: 1.纯化RNA 在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白和盐离子。注意:化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化(即PAGE胶纯化)。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致RNA实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在,如 …

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分步转染,先电转GFP-mRNA,表达很好,然后第二天电转了一个红色荧光DNA质粒,第三天观察的时候只看到了少数细胞有红色荧光,看不到绿色荧光了,这是怎么回事呀?按说GFP已经表达了,怎么还能消失了呢

根据你的描述,GFP在第一天有很好的表达,但在第二天转染DNA质粒后,第三天绿色荧光消失,只有少数细胞有红色荧光。这可能涉及到几个不同的因素: 1. DNA质粒表达对GFP表达的抑制 高浓度DNA引起的翻译抑制:你已经电转过mRNA,然后再转DNA质粒,这可能引发细胞对大分子DNA的免疫反应,比如激活干扰素反应。这可能抑制了翻译,不仅影响红色荧光蛋白(DNA …

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质粒被酶切过还可以电转吗?

可以,但得分情况来看: 如果质粒是线性化了(即被酶切成线状DNA): 可以电转,但是效率明显低于超级螺旋质粒(超螺旋 plasmid,通常是未切割、天然状态下的质粒结构)。 线性质粒在细胞内容易被核酸酶降解,稳定性和转化成功率比超螺旋质粒低很多。 有些时候,比如做基因组编辑(CRISPR knock-in)、整合型表达载体(需要基因组插入时),反而故意使用线 …

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悬浮细胞的siRNA转染实验步骤

悬浮细胞的siRNA转染操作步骤,以24孔板siRNA转染为例 1.提前1天细胞种植 悬浮细胞:采用对数生长期的细胞,数量为常规培养细胞数的1/3进行转染实验。如某细胞常规培养的细胞数是6×105,那么就用2×105的细胞进行转染。 2.转染过程 ⑴取0.67ug(50pmol)的siRNA,加入一定量无血清稀释液,充分混匀,制成RNA稀释液,终体积为25μ …

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