英格恩技术资料

1.   电场强度要合适 合适的电场强度对于电转染实验非常重要，电场强度不能过高，过高会增加细胞的死亡率；也不能过低，过低不能增加膜的通透性或在膜上形成小孔。不同细胞系具有不同的最佳场强值，实验前应测定所转染细胞系的最佳电场强度。 2.   细胞状态要好 用于电转的细胞一般选取处于对数生长期的细胞（15代以内，传代后2 …

我认为，要想做好质粒DNA细胞转染实验，应注意以下几点： 1， 质粒的大小和质量 线性化还是超螺旋会影响转染结果：超螺旋质粒的转染效率比线性DNA高得多，特别是瞬时转染。而线性化DNA转染的整合几率高。质粒太大了转染会困难一些。毕竟，相对致密、较小的外源异物被细胞内吞的几率要大一些。如果你的质粒正好比较大，又没有经验，选择特别注明可以转大质粒的转染试剂成功几 …

可从以下几方面进行优化： 1.纯化RNA 在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA，推荐用玻璃纤维结合，洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸，小的寡核苷酸，蛋白和盐离子。注意：化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化（即PAGE胶纯化）。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致RNA实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在，如 …

       肾细胞癌(RCC)是成年人肾脏最常见的恶性肿瘤，占肾脏恶性肿瘤的90％以上，恶性程度高。其发病率约为成年人恶性肿瘤的3％,。肾细胞癌预后很差，对放疗、化疗均不敏感。目前，局部肾细胞癌的治疗取得了很大的进展，但是对于转移性肾细胞癌治疗的选择非常有限。因此，鉴定新的肾细胞癌生物标志物以及具有更好疗效的抗肿瘤药物仍亟待解决。mirRNA是内源性的非编 …

羟基氯喹（Hydroxychloroquine，HCQ），氯喹的羟基化类似物，是一种抗疟原虫溶酶体抑制剂，它抑制溶酶体酸化引起的自噬，并随后阻断自噬体与溶酶体的融合，从而导致自噬体的积累，从而加速肿瘤细胞的死亡。现分享一篇ECL发光液（enlight）与羟基氯喹和自噬体及宫颈癌SiHa细胞研究的文献，以供参考。

       急性肺损伤（ALI）与急性呼吸窘迫综合征（ARDS）是非常严重的临床症状，具有很高的发病率和死亡率。虽然关于ALI和ARDS的治疗策略和相关的呼吸生理取得了重大进展，但是其年死亡率仍然达到了40%，导致巨额的医疗成本。现分享一篇体内转染（Entranster）与小鼠肺部炎症和细胞凋亡研究的文献，以供参考。

1、腺病毒载体对目的基因的长度是否有要求？ 有要求。对E1和E3双缺失的腺病毒载体，比如AdMax的Kit C、Kit D等，其总包装的外源片断要求小于8 kb。而对于只有E1缺失或E3缺失的载体，比如Kit A、Kit B等，外源片断要求小于5 kb。注意，外源片断指包括启动子、外源基因和poly A等在内的整个插入片断。 2、如何提高腺病毒的活性？ 提高 …

      脓毒症是一种危及生命的疾病，其特征是器官功能不全。脓毒症被广泛认为是由于感染引起的代偿性抗炎反应和全身炎症反应之间的平衡不稳定。在严重的情况下，炎症、脓毒症可导致急性肺损伤（ALI），更严重地可能会发生急性呼吸窘迫综合征（ARDS）。现分享一篇体内转染（Entranster）与丹酚酸B和脓毒症相关急性肺损伤研究的文献，以供参考。

谷氨酸兴奋性中毒参与了脑出血（ICH）引起的继发性脑损伤（SBI）。突触体相关蛋白23（SNAP23）和SNAP25分别参与突触前谷氨酸的释放和突触后谷氨酸受体（NMDA受体）运输，这两者对于谷氨酸介导的兴奋性毒性都是必不可少的。SNAP23和SNAP25具有较高的同源性，SNAP23被证明可与膜联蛋白A7（ANXA7）相互作用。现分享一篇体内转染（Entr …

有丝分裂纺锤体的解除与基因组不稳定性有关，这是肿瘤发生和恶性转化的一个重要方面。为了保证染色体传递的准确性，有丝分裂纺锤体由精细的机制组装，并由动物细胞中的着丝粒组织配制。尤其是，中心体蛋白被认为协同作用以确保准确的纺锤体形成，但分子细节仍有待研究。现分享一篇DNA转染（Entranster）与Cep70与γ-微管蛋白相互作用在有丝分裂纺锤体组装中作用的研究 …