单独电转mRNA(GFP)信号很好,但一旦同时把DNA一起电转,GFP荧光显著下降。这个往往不是“挤占表达资源”这么简单,更多是由“电转参数 + 细胞先天免疫反应 + 总核酸/盐负载”三方面共同导致。给你一个可操作、优先级排序的排障与优化清单(不需要额外设备就能尝试): 先做两件最快见效的事 把DNA量往下砍 10–100×(起始试 10 ng~100 ng …
阅读更多 »客户问:你好,如果电转以后抗性板子上一个没长,无抗的都长满了,这种情况是没电进去,需要增加次数吗,还是其他原因呢?
回答:“无抗的都长满”,说明细胞活性和数量没问题,基本排除培养条件问题。那么核心矛盾集中在质粒是否成功进入细胞并表达抗性基因。这里有几个关键排查点:质粒浓度是否足够(建议>100ng/μL)、抗性基因是否匹配(如氨苄不能用于表达AmpR的质粒)、抗性板浓度是否正确(过高会杀死阳性克隆)。 特别注意的是检查质粒纯度。实验室常用乙醇沉淀法提质粒,但残留的盐 …
阅读更多 »体内转染与环状非编码RNA减少基因脱靶效应研究
环状RNA在许多生物系统中被发现。它们大多被认为是microRNA的分子“海绵”,具有许多未知的生物学活性。小干扰RNA作为许多非编码RNA之一,已成为基因表达调控和药物治疗的重要工具。虽然由siRNA介导的靶mRNA裂解具有高度的序列特异性,意外“脱靶”沉默内源基因在细胞中也观察到,这限制了siRNA的进一步应用。脱靶效应的siRNA也能诱导多种细胞凋亡。 …
阅读更多 »tRF-Gln-CTG-026改善肝损伤机制重大发现(影响因子:IF 40+)
文献标题:《tRF-Gln-CTG-026 ameliorates liver injury by alleviating global protein synthesis》, 期刊名称:Signal Transduction and Targeted Therapy 影响因子:40+ DOI:https://doi.org/10.1038/s41392-0 …
阅读更多 »ECL发光液(enlight)与结直肠癌中硼替佐米抗癌活性研究
多种化疗药物通过激活内源性凋亡信号通路促进肿瘤细胞死亡。这条通路是由线粒体功能障碍调节,这是通过一个复杂的过程,受B细胞淋巴瘤2‑(Bcl‑2)家庭成员和其他细胞蛋白之间复杂的相互作用所控制。Bcl‑2相关X蛋白(Bax)是一种促凋亡蛋白,是内在的细胞凋亡信号通路的重要组成部分。缺乏bax的患者可能由于内源性凋亡信号通路受损而对化疗不那么敏感。现分享一篇EC …
阅读更多 »难治性癌症溶瘤病毒临床试验研究(IF66.85)
标题 Hyperacute rejection-engineered oncolytic virus for interventional clinical trial in refractory cancer patients (用于难治性癌症患者介入临床试验的超急性排斥反应工程化溶瘤病毒) 影响因子 IF = 66.85(Cell 期刊的2023年影响因 …
阅读更多 »体内转染与Trim2和神经炎症和认知缺陷研究
神经炎症作为衰老过程的主要特征,参与了包括阿尔茨海默病(AD)在内的多种衰老相关疾病的发病机制。髓样细胞触发受体2(TREM2)是一种新发现的AD风险基因,通过调节炎性细胞因子的释放调节外周组织的炎症过程。然而,到目前为止,Trim2在与神经相关的神经炎症、认知缺陷和AD样神经病理学中的作用尚不清楚。现分享一篇体内转染(Entranster)与髓系细胞触发受 …
阅读更多 »RNA转染与食管鳞状细胞癌的生长抑制和放射增敏作用研究
食管癌是世界范围内最常见的恶性肿瘤之一,预后差。化疗耐药和癌症复发是其治疗中最困难的问题之一。识别潜在的分子机制是发展新疗法的关键。现分享一篇RNA转染(Entranster)与食管鳞状细胞癌的生长抑制和放射增敏作用研究的文献,以供参考。
阅读更多 »丹参酮IIA磺酸钠抗糖尿病血管衰老机制研究
标题 Sodium Tanshinone IIA Sulfonate alleviates vascular senescence in diabetic mice by modulating the A20-NFκB-NLRP3 inflammasome-catalase pathway 文献概要 该研究探讨了丹参酮IIA磺酸钠(STS)通过调节A20-N …
阅读更多 »DNA转染与5-羟色胺和非酒精性脂肪性肝病研究
非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)是世界范围内最常见的肝脏疾病之一,它由单纯性脂肪变性发展为炎性非酒精性脂肪性肝炎(NASH),在某些情况下甚至发展为肝硬化或肝细胞癌。NAFLD与2型糖尿病(T2DM)相关。在NAFLD中,肝脏发生过量脂质合成(ELS),主要包括新的脂肪生成和三酰甘油(TG)以及极低密度脂 …
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