英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
脑出血约占死亡和发病率的50%，有不同的亚型，包括由脑实质深处的小血管破裂引发的脑出血（ICH）。此外，在存活的患者中，75%的患者受到不同程度的运动、感觉、思维定势和其他不可替代的脑功能损伤。即使结合复杂的治疗方法，继发性脑损伤（SBI）也可能发生在ICH之后，令人失望的预后是不可避免的。几十年来，医学研究一直致力于发现一种有效和直接的治疗方 …
阅读更多 »提高RNA转染效率的几点建议
1.纯化RNA 在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA，推荐用玻璃纤维结合，洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸，小的寡核苷酸，蛋白和盐离子。注意：化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化（即PAGE胶纯化）。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致RNA实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在，如皮肤，头发，所有徒手接触过 …
阅读更多 »CCK8能否检测细菌细胞？
CCK8试剂盒可以检测E.coli，但不能检测酵母细胞。向100μl E.coli 培养液中加入10μl CCK8 溶液，并培养1-4 个小时或过夜。 如需了解更多关于CCK8产品的信息，请点击https://www.engreen.com.cn/cck-8-kit
阅读更多 »体内转染（Entranster）与mir-200c在乳腺癌细胞上皮间质转化中作用中研究
MirRNAs不仅参与肿瘤的形成，也与肿瘤的分化和侵袭过程有关。然而，目前检测miRNA表达的方法有很大的缺点，如侵入性和不可再生性。上皮间质转化（EMT）在肿瘤转移和耐药方面具有重要作用。现分享一篇体内转染（Entranster）与mir-200c在乳腺癌细胞上皮间质转化中作用中研究的文献，以供参考。
阅读更多 »DNA转染与ZNF121和乳腺上皮细胞的靶基因调控研究
新型锌指蛋白121（ZNF121）已被证明在物理和功能上与MYC癌蛋白相关联，以调节细胞增殖和可能的乳腺癌发展。为了进一步了解ZnF121在细胞增殖和癌变过程中的作用，现分享一篇DNA转染（Entranster）与ZNF121和乳腺上皮细胞的靶基因调控研究的文献，以供参考。
阅读更多 »RNA转染与丹参酮IIA在肿瘤细胞凋亡中的作用研究
丹参酮 IIA（Tanshinone IIA，Tan IIA）是一种从丹参干根中提取的生物活性物质，具有抑制肿瘤细胞增殖和诱导细胞凋亡的作用。然而，Tan IIA在肿瘤细胞凋亡中的作用机制仍有待进一步阐明。现分享一篇运用RNA转染（Entranster）的方法的文献，通过阐明Tan IIA在p53基因缺陷的H1299细胞中的抗肿瘤作用机制，以确定丹参酮IIA …
阅读更多 »悬浮细胞的siRNA转染步骤
悬浮细胞的siRNA转染操作步骤，以24孔板siRNA转染为例 1.提前1天细胞种植 悬浮细胞：采用对数生长期的细胞，数量为常规培养细胞数的1/3进行转染实验。如某细胞常规培养的细胞数是6×105，那么就用2×105的细胞进行转染。 2.转染过程 ⑴取0.67ug(50pmol)的siRNA，加入一定量无血清稀释液，充分混匀，制成RNA稀释液，终体积为25μ …
阅读更多 »慢病毒适用于哪些细胞？
慢病毒（Lentivirus）载体是以 HIV-1 （人类免疫缺陷1型病毒）为基础发展起来的基因治疗载体。具有感染谱广泛、可以有效感染分裂期和静止期细胞、长期稳定表达外源基因等优点，因此成为导入外源基因的有力工具。现在慢病毒系统已经被广泛应用到各种细胞系的基因过表达、RNA干扰、microRNA研究以及活体动物实验中。 慢病毒有如下特点： ● 感染范围广 …
阅读更多 »ECL发光液(Enlight)与大鼠海马体癫痫导致的P-糖蛋白过度表达研究
脑内p-糖蛋白（P-gp）的过度表达是导致耐药性癫痫的重要因素。P-gp抑制剂由于其全身毒性而受到临床应用限制。现分享一篇ECL发光液(Enlight)与大鼠海马体癫痫导致的P-糖蛋白过度表达研究的文献，以供参考。
阅读更多 »揭秘RNAi，缔造实验神话
用siRNA进行transient transfection不稳定，几代细胞以后，症状就会消失，所以在转染几天（1-3）后要立刻抽提蛋白，进行分析。 用质粒中的shRNA进行转染，如果质粒含有抗生素位点，可以进行筛选，获得较稳定的细胞株系，但需要时间较长 用病毒中的shRNA进行感染（infection），抗生素筛选后，可以获得很稳定细胞株系。 瞬时RNAi …
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