英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
滤过术是目前治疗青光眼的主要手术方式之一，功能性滤过泡的形成和维持是其成功的关键。术后伤口愈合包括一系列复杂的动态过程。滤过性手术失败的主要原因是手术区术后成纤维细胞增生、胶原沉积和滤过泡疤痕形成，最终可阻断手术过程中建立的房水引流通道。现分享一篇ECL发光液（Enlight）与金属 …
阅读更多 »ECL发光液（Enlight）与弓形虫疫苗研究
弓形虫是一种无处不在的原生动物寄生虫，能感染所有恒温动物，包括哺乳动物和鸟类。蛋白质二硫键异构酶（PDI）可以移位到弓形虫速殖子细胞表面，参与调解病原微生物和宿主细胞的相互作用。现分享一篇ECL发光液（Enlight）在弓形虫疫苗研究中应用的文献，以供参考。
阅读更多 »体内转染（engreen）与miRNA和睾丸生殖细胞肿瘤研究
肿瘤生长受肿瘤细胞与肿瘤微环境之间的串扰的调节。最近的研究表明，肿瘤细胞中的miRNA功能障碍可以调节肿瘤微环境，间接决定肿瘤的进展。然而，这一过程在睾丸生殖细胞瘤（TGCTs）中还没有得到很好的阐述。现分享一篇体内转染（engreen）与miRNA和睾丸生殖细胞肿瘤研究的文献， 以 …
阅读更多 »DNA转染效率影响因素
细胞DNA转染效率的影响因素 1.细胞密度 一般来说，当细胞密度达到60%～80%时进行转染可以取得较高的转染效率，过低或过高都会影响转染效果。 2.细胞状态 这点非常关键，很多时候传代次数太少或者太多都将导致细胞对转染试剂敏感度的改变。因此，为了提高转染效率以及转染稳定性、降低细胞毒性，应尽量使用适度传代的细胞系，并在不同次实验时保持细胞传代次数的 …
阅读更多 »慢病毒感染贴壁细胞实验方法
1.提前一天细胞铺板 提前一天种植细胞，以感染时细胞融合度在50%左右为宜(悬浮细胞根据需要调整，不要采用过高的细胞密度)。 感染实验 ⑴将EnvirusTM-LV用无血清稀释液稀释(用量参见下表)，充分混匀，制成增强剂稀释液。 ⑵将病毒浓缩液用无血清稀释液稀释(用量参见下表)，充分混匀，制成病毒稀释液。 注：由于病毒浓度情况不同，具体病毒浓缩液用量酌情依据 …
阅读更多 »DNA转染（Entranster）与ZNF121和乳腺上皮细胞的靶基因调控研究
新型锌指蛋白121（ZNF121）已被证明在物理和功能上与MYC癌蛋白相关联，以调节细胞增殖和可能的乳腺癌发展。为了进一步了解ZnF121在细胞增殖和癌变过程中的作用，现分享一篇DNA转染（Entranster）与ZNF121和乳腺上皮细胞的靶基因调控研究的文献，以供参考。
阅读更多 »siRNA转染实验需要知道的关键点
1.纯化siRNA siRNA的浓度和纯度对转染实验非常重要。为得到高纯度的siRNA，推荐用玻璃纤维结合，洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸，小的寡核苷酸，蛋白和盐离子。注意：化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化（即PAGE胶纯化）。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致siRNA转染实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在，如皮 …
阅读更多 »嘌呤霉素筛选标记的病毒滴定 Protocol
关于使用嘌呤霉素筛选标记的慢病毒或逆转录病毒进行病毒滴定的 protocol，整理了一个常用且较为权威适用于慢病毒系统： 【嘌呤霉素筛选法的病毒滴定 Protocol】 原理简述： 将病毒感染宿主细胞，使用嘌呤霉素筛选，仅有成功整合了抗性基因的细胞能存活。最后通过计数存活细胞（克隆或整体密度）来估算病毒滴度。 实验材料： 病毒上清； HEK293T 或其他易 …
阅读更多 »siRNA转染与卫星胶质细胞中P2X7受体研究
嘌呤信号能够引起炎症和免疫反应。卫星胶纸细胞（SGCs）中的P2X嘌呤受体7（P2X7）的激活可能是促进炎症和神经性疼痛中一个必不可少的组成部分。长链非编码RNAs（lncRNAs）参与多种生理和病理过程。现分享一篇针对lncRNA BC168687的小干扰RNA（Entranster）对高糖和高游离脂肪酸环境下卫星胶纸细胞P2X7受体表达的影响的文献，以供 …
阅读更多 »体内转染与冠状动脉微栓塞相关的心功能不全研究
冠状动脉微栓塞（CME）是一种常见的临床事件，可自发或由程序相关的动脉粥样硬化斑块破裂急性冠状动脉综合征患者，特别是在经皮冠状动脉介入治疗（PCI）导致。大隐静脉移植物经皮介入治疗的发生率高达45%。由CME引起的短暂“无血流”或“慢血流”是急性心肌梗死患者长期预后不良的独立预测因素。此外，CME还可导致渐进性心肌功能异常，包括显性心肌梗死、收缩功能障碍、心 …
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