可使用病毒感染增强剂envirus提高病毒的感染效率,下面以慢病毒为例,说一下实验过程。 1.提前一天细胞铺板 提前一天将细胞种植在24孔板中,以感染时细胞融合度在50%左右为宜(悬浮细胞根据需要调整,不要采用过高的细胞密度)。 2.感染 ⑴将2ul的Envirus-LV用25μl无血清稀释液稀释,充分混匀,制成Envirus-LV稀释液。4℃静置5分钟。 …
阅读更多 »AAV载体中启动子和特殊原件的含义是什么?
hsyn:神经元特异启动子; GFAP:星形胶质细胞特异启动子; Ubiquitin:一种常用的组成型启动子。 IRES:内部核酶进入位点,起到连接两个基因,在一个启动子驱动下转录的作用。IRES连接的两个基因不会融合表达,IRES的RNA可以招募核糖体,翻译下游基因,但是IRES是一种再招募的过程,其后基因的mRNA的翻译量低于自身mRNA的数量,所以表达 …
阅读更多 »ECL发光液(enlight)与氧化应激诱导单核细胞坏死研究
细胞坏死是一种缺乏细胞凋亡和自噬特征的细胞死亡。在过去的几年里,人们发现坏死的发生和过程是程序化的,并且受到严格的调节。大量研究表明,死亡配体(如CD95L、TNF和TNF相关的凋亡诱导配体)诱导依赖于含死亡结构域(dd)激酶rip1活性的caspase独立的坏死样细胞的死亡。虽然坏死的诱导机制越来越清楚,但这一过程的执行仍然有些难以捉摸。现分享一篇ECL发 …
阅读更多 »两个shRNA在转录水平和蛋白水平都有效抑制了基因表达,但是表型做出来却不一致,是为什么?
这种情况可能是由多种因素引起的,以下是一些可能的原因: 转录水平和蛋白水平的不同调控机制:虽然shRNA能够有效地降低目标基因的mRNA和蛋白表达,但有时候蛋白质的功能并不完全依赖于其表达量。有可能是基因表达抑制后,细胞通过一些补偿机制(比如其他途径的上调或活化)来恢复其功能,导致表型不一致。 shRNA的特异性和脱靶效应:shRNA可能会靶向与目标基因相似 …
阅读更多 »ECL发光液(enlight)与烟曲霉N-聚糖加工,形态发生及毒性研究
Kexin样蛋白属于枯草杆菌蛋白酶家族。几种真菌的Kexin样蛋白已经被研究。缺乏KEXIN样蛋白的突变体表现出如细胞壁缺陷、异常极性等较强的表型,以白色念珠菌为例,其毒力会降低。然而,只有几种蛋白质被确认为Kexin样蛋白酶在这些真菌物种中的底物。Kexin样蛋白在这些真菌物种的形态发生中的作用尚不清楚。现 …
阅读更多 »基于猪逆转录病毒逆转录酶的高效哺乳动物基因组编辑引物
文献标题 Highly efficient prime editors for mammalian genome editing based on porcine retrovirus reverse transcriptase (基于猪逆转录病毒逆转录酶的高效哺乳动物基因组编辑引物) 影响因子 14.9(Trends in Biotechnology,20 …
阅读更多 »体内转染(Entranster)与小鼠肺部炎症和细胞凋亡研究
急性肺损伤(ALI)与急性呼吸窘迫综合征(ARDS)是非常严重的临床症状,具有很高的发病率和死亡率。虽然关于ALI和ARDS的治疗策略和相关的呼吸生理取得了重大进展,但是其年死亡率仍然达到了40%,导致巨额的医疗成本。现分享一篇体内转染(Entranster)与小鼠肺部炎症和细胞凋亡研究的文献,以供参考。
阅读更多 »RNA转染与B细胞成熟抗原和多发性骨髓瘤细胞存活研究
多发性骨髓瘤(MM)是一种无法治愈的血液恶性肿瘤,其特点是恶性浆细胞克隆性增殖,与大多数患者产生单克隆免疫球蛋白有关。细胞因子白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10、干扰素-α和B细胞活化因子(BAFF)在促进MM细胞生长和耐药中的作用已得到明确阐述。越来越多的证据表明BAFF影响MM细胞的生长、存活、迁移和耐药性。B细胞成熟抗原(BCMA)是BAFF …
阅读更多 »RNA转染(Entranster)与雷公藤红素增强肿瘤细胞中缺氧诱导因子-1活性研究
雷公藤红素,是从传统中药雷公藤中提取的一种三萜类化合物,具有抗炎、抑制肿瘤血管生成、抑制肿瘤生长、诱导细胞凋亡以及对人类神经退行性疾病的细胞保护作用等多种作用。然而,这些功能的基础机制并不清楚。现分享一篇RNA转染(Entranster)与雷公藤红素增强肿瘤细胞中缺氧诱导因子-1活性研究的文献,以供参考。
阅读更多 »siRNA转染(engreen)与树突状细胞表观遗传修饰研究
根据不同的环境,树突状细胞(DC)可能变现为活跃或耐受性,但表观遗传修饰是否参与这些过程鲜为人知。现分享一篇siRNA转染(Entranster-R4000)与树突状细胞的表观遗传修饰研究的文献,显示表观遗传修饰可以调节人体单核细胞来源的DCs(DC)分化为活性或耐受DC。
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