标题:Short-term and long-term high-fat diet promote metabolic disorder through reprogramming mRNA m6A in white adipose tissue by gut microbiota 期刊:Microbiome 影响因子:2025年的影响因子为13.75 文献 …
阅读更多 »用伯乐电转仪器,电转CHO-K1 , 密度1*10^7次方,方波,0.4口径杯子,300v电压,950毫安电阻率,20ms脉冲,加入20ug质粒,2天后细胞存活率是95%,最后电转染效率只达到30%,问如何提高转染效率?还有个问题,他根据文献资料在电转前,是把杯子和细胞在低温下冰浴,但是说明书说恢复到室温再电转,问是因为这个原因导致效率低吗?
下面把你给的条件先“翻译”成关键参数,方便对症下药: 细胞:CHO-K1,约 1×10^7 cells/mL; 杯子:0.4 cm 间隙; 脉冲:方波,300 V,20 ms,1 次脉冲(相当于 750 V/cm); DNA:20 μg 质粒; 结果:存活率 95%,转染效率 30%; 另外:细胞和电转杯在冰上,未回温到室温就电转。 一、效率偏低的主要可疑点 …
阅读更多 »体内转染(entranster)与信号素3A导致创伤性脑损伤后继发性血脑屏障损伤研究
创伤性脑损伤(TBI)是一种危害人类健康的高发病率疾病,随着社会的发展,这种疾病的发病率有上升的趋势。脑外伤死亡率为10.8%,致残率为12%。脑外伤已成为40岁以下人群的第五大死因,年轻人约占脑外伤患者的70%。信号素3A(SEMA 3A)是信号素家族的成员,是一类参与神经网络构建的膜相关蛋白。SEMA3A曾被报道可影响血管通透性,但其在创伤性脑损伤(TB …
阅读更多 »质粒DNA转染注意事项
质粒的构建:启动子的选择 启动子的选择对于转染基因的有效表达是非常重要的。对于转染过程本身虽然无甚影响,但是对转染结果却有着微妙的影响。 质粒的大小和质量 线性化还是超螺旋会影响转染结果:超螺旋质粒的转染效率比线性DNA高得多,特别是瞬时转染。而线性化DNA转染的整合几率高。质粒太大了转染会困难一些。毕竟,相对致密、较小的外源异物被细胞内吞的几率要大一些。如 …
阅读更多 »测定病毒滴度时,是使用 HEK293 细胞,还是用目的细胞?
测定病毒滴度时,是否可以直接使用 HEK293 细胞,取决于你使用的病毒类型和实验目的。一般来说: 如果是腺病毒或慢病毒,HEK293 细胞(特别是 HEK293T 细胞)通常是不错的选择,因为它们表达病毒包装过程中需要的辅助因子(如腺病毒的 E1A/E1B 或慢病毒的 VSV-G),可以有效地被感染并产生明显的病毒效应。因此,很多实验室会用 293 细胞测 …
阅读更多 »DNA转染(Entranster)与三疣梭子蟹CacyBP基因的克隆研究
三疣梭子蟹是一种重要的商业蟹类,广泛分布于韩国、日本、中国、南洋和印度洋。虽然这种海蟹能够在不同的盐度条件下生存,但不同的盐度条件可能影响其分布和迁移途径。盐度也是影响梭子蟹人工繁殖的一个重要因素,特别是在幼虫发育和蜕皮阶段。因此,研究三疣梭子蟹耐受环境盐度变化的遗传机制,有利于蟹类的人工繁殖。现分享一篇DNA转染(Entranster)与三疣梭子蟹钙中周期 …
阅读更多 »RNA转染(Entranster)与人单核细胞来源的树突状细胞的染色质状态调控研究
树突状细胞(DCS)是抗原(Ag)呈递细胞,具有独特的刺激幼T细胞和启动原发性免疫应答的能力。然而,DCs在中枢和外周免疫耐受的诱导和T细胞免疫应答的类型的调节中也具有关键性的作用。依赖于环境,树突状细胞(DCS)可能变得活跃或耐受性,但很少知道是否遗传的表观遗传修饰涉及这些过程。现分享一篇RNA转染(Entranster)与人单核细胞来源的树突状细胞的染色 …
阅读更多 »30个关于CCK-8的Q&A
Q1: 一个孔中应接种多少个细胞? A1: 当使用标准96孔板时,贴壁细胞的最小接种量至少为1,000 个/孔 (100μl 培养基)。检测白细胞时的灵敏度相对较低,因此推荐接种量不低于2,500 个/孔 (100μl 培养基)。如果要使用24孔板或6孔板实验,请先计算每孔相应的接种量,并按照每孔培养基总体积的10%加入CCK-8溶液。 Q2: 能否用3 …
阅读更多 »慢病毒感染后,未能实现相关敲降的原因是什么?
慢病毒感染后未能实现敲降的原因可能有多种。以下是一些可能的原因及其解释: 慢病毒包装质量问题: 病毒滴度较低,导致感染效率不高,可能无法有效转导目标细胞。 病毒颗粒中没有足够的有效载体,影响敲降效果。 靶向序列设计问题: shRNA或sgRNA设计不合理,没有有效靶向目标基因的序列。 目标序列与基因组其他部位的相似性导致脱靶效应,影响敲降效果。 感染条件不佳 …
阅读更多 »TUG1通过促进HuR泛素化抑制脑缺血再灌注后血管生成
1.标题: LncRNA TUG1 Repressed Angiogenesis by Promoting the Ubiquitination of HuR and Inhibiting Its Nuclear Translocation in Cerebral Ischemic Reperfusion Injury长链非编码RNA TUG1通过促进HuR …
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