英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
机械刺激和生物因素协同调节骨的发育和再生，但其基础机制却知之甚少。微重力诱导骨丢失，这可能地与抗局部细胞因子的发展有关，包括胰岛素样生长因子1（IGF-1）。现分享一篇RNA转染（Entranster）与整合素αvβ3和微重力相关骨丢失研究的文献，以供参考。
阅读更多 »ECL发光液（enlight）与PRDX3和肝细胞癌研究
PRDX3是调节细胞氧化还原状态的线粒体过氧化物还原酶。据报道，PRDX3在肝癌中过度表达，但PRDX3在肝细胞癌（HCC）发生发展中的作用尚未得到很好的阐述。现分享一篇ECL发光液（enlight）与沉默PRDX3抑制肝癌细胞生长及促进细胞侵袭和细胞外基质降解研究的文献，以供参考。
阅读更多 »Inflammation | 西安交通大学附属医院：促进心肌损伤的杀手
《Inflammation》期刊报道了MiR-23a通过直接靶向CX43和调节有丝分裂吞噬作用参与心肌缺血/再灌注损伤。题为“MiR-23a Is Involved in Myocardial Ischemia/Reperfusion Injury by Directly Targeting CX43 and Regulating Mi …
阅读更多 »RNA转染（Entranster）与IL-17下调小鼠胶原性关节炎嗅间充质干细胞的免疫抑制能力研究
嗅间充质干细胞（OE-MSCs）是嗅觉固有层中一种新的常驻干细胞类型。OE-MSCs通过调节T细胞的反应，包括调节性T细胞（Treg）的上调和Th1/Th17细胞的下调而发挥其免疫抑制能力。作为炎性细胞因子，IL-17在胶原诱导性关节炎（CIA）的发展过程中起着关键的作用。然而，目前尚不清楚IL-17水平的升高是否会影响OE-MSCs在炎症状态 …
阅读更多 »293T分别包装两种病毒，浓缩后混合感染鼠CD8+ T细胞可以吗？
原则上可以，具体要看以下几个条件： 步骤可行性： 分别包装：在293T细胞中分别转染两种构建（比如psPAX2 + pMD2.G + 各自的载体），收集病毒上清； 浓缩：超速离心或PEG浓缩，两种病毒分别处理； 混合感染：感染前混合两种浓缩后的病毒，用于感染小鼠CD8+ T细胞。 技术要点： T细胞激活：CD8+ T细胞对逆转录病毒天然不易感染，通常需要先用 …
阅读更多 »如何得到更高的DNA细胞转染效率？
我认为，要想更高的细胞DNA转染效率，应注意以下几点： 1， 质粒的大小和质量 线性化还是超螺旋会影响转染结果：超螺旋质粒的转染效率比线性DNA高得多，特别是瞬时转染。而线性化DNA转染的整合几率高。质粒太大了转染会困难一些。毕竟，相对致密、较小的外源异物被细胞内吞的几率要大一些。如果你的质粒正好比较大，又没有经验，选择特别注明可以转大质粒的转染试剂成功几率 …
阅读更多 »体内转染（entranster）与肿瘤防治药物及其应用
8-氧脱氧鸟苷三磷酸是一种能够在体内触发DNA突变的核苷酸。无论是在正常的代谢活动中，还是在外源性刺激下，细胞都会产生大量的活性氧和氧自由基，其中-oh是高度活性的，可以破坏生物大分子，如碳水化合物、核酸、脂类和氨基酸。现分享一篇体内转染（entranster）与肿瘤防治药物及其应用的文献，该文献中的发明涉 …
阅读更多 »RNA转染影响因素
1.转染试剂 转染中要额外注意的就是转染试剂应该是确认无RNase污染的，而且也尽量避免和质粒DNA转染混用—即使试剂本身兼容DNA和RNA转染，因RNA与DNA大小不同，转染条件不同，所需的试剂也应不同，所以RNA专用的转染试剂会更好一些。比如Entranster试剂. 2.RNA转染时RNA的用量 RNA转染的用量必须参考RNA转染试剂说明，因为RNA和 …
阅读更多 »如何选择腺病毒、慢病毒、腺相关病毒？
病毒表达系统 腺病毒(Adenovirus) 慢病毒(Lentivirus) 腺相关病毒(Adeno-As sociate virus) 病毒基因组 双链DNA病毒 RNA病毒 单链DNA病毒 复制 条件复制 不可复制 条件复制 滴度 最高可达1012pfu/ml 最高可达109TU/ml 最高可达1012-13v.g/ml 感染细胞类型 感染分裂和不分裂细 …
阅读更多 »慢病毒感染贴壁细胞实验方法
1.提前一天细胞铺板 提前一天种植细胞，以感染时细胞融合度在50%左右为宜(悬浮细胞根据需要调整，不要采用过高的细胞密度)。 感染实验 ⑴将EnvirusTM-LV用无血清稀释液稀释(用量参见下表)，充分混匀，制成增强剂稀释液。 ⑵将病毒浓缩液用无血清稀释液稀释(用量参见下表)，充分混匀，制成病毒稀释液。 注：由于病毒浓度情况不同，具体病毒浓缩液用量酌情依据 …
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