人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)的反转录激活因子(TAT)蛋白已知经历泛素化。然而,泛素化在调节TAT稳定性和活性方面的作用尚不清楚。 现分享一篇DNA转染(Entranster)与HIV-1 TAT泛素化和羧基末端区的稳定性和活性调控研究的文献,以供参考。
阅读更多 »分步转染,先电转GFP-mRNA,表达很好,然后第二天电转了一个红色荧光DNA质粒,第三天观察的时候只看到了少数细胞有红色荧光,看不到绿色荧光了,这是怎么回事呀?按说GFP已经表达了,怎么还能消失了呢
根据你的描述,GFP在第一天有很好的表达,但在第二天转染DNA质粒后,第三天绿色荧光消失,只有少数细胞有红色荧光。这可能涉及到几个不同的因素: 1. DNA质粒表达对GFP表达的抑制 高浓度DNA引起的翻译抑制:你已经电转过mRNA,然后再转DNA质粒,这可能引发细胞对大分子DNA的免疫反应,比如激活干扰素反应。这可能抑制了翻译,不仅影响红色荧光蛋白(DNA …
阅读更多 »体内转染与高危大鼠角膜移植和CD25siRNA基因转移作用研究
角膜移植术是治疗致盲性角膜疾病的唯一方法。虽然角膜移植被认为是最常见和最成功的移植手术,但角膜移植的成功率低于一般预期。根据临床统计,88%的角膜移植片在移植后能存活1年,但只有55%的角膜移植片能存活5年。三分之一的角膜损伤是由免疫移植反应引起的。此外,高危受者角膜移植的成功率在35%以下,抑制角膜移植排斥反应是提高移植成功率的主要挑战。现分享 …
阅读更多 »细胞电转染实验注意事项
选择合适的电场强度 合适的电场强度对于电转染实验非常重要,电场强度不能过高,过高会增加细胞的死亡率;也不能过低,过低不能增加膜的通透性或在膜上形成小孔。不同细胞系具有不同的最佳场强值,实验前应测定所转染细胞系的最佳电场强度。 细胞的选择 用于电转的细胞一般选取处于对数生长期的细胞(15代以内,传代后2d)。因为处于对数生长期的细胞分裂旺盛,表面结构致密比稳定 …
阅读更多 »体内转染(Entranster)方法研究小鼠急性肝衰竭
急性肝衰竭(ALF)是由炎症介导的肝细胞损伤过程,是由肝细胞凋亡和出血坏死引起的临床综合征。急性肝衰竭经常是由病毒性肝炎,药物或有毒物质的摄入,或肝缺血再灌注损伤等引起的。ALF的预后非常差,除了肝移植以外,目前还没有有效的治疗方法。现分享一篇体内转染(Entranster)研究小鼠急性肝衰竭的文献,以供参 …
阅读更多 »体内转染(Entranster)与环状非编码RNA减少基因脱靶效应研究
环状RNA在许多生物系统中被发现。它们大多被认为是microRNA的分子“海绵”,具有许多未知的生物学活性。小干扰RNA作为许多非编码RNA之一,已成为基因表达调控和药物治疗的重要工具。虽然由siRNA介导的靶mRNA裂解具有高度的序列特异性,意外“脱靶”沉默内源基因在细胞中也观察到 …
阅读更多 »动物体内转染需要哪些条件?
1.每次动物实验,需要准备什么东西,器材? ①转染的核酸,如siRNA,miRNA,mimic、inhibitor,也可以转染DNA。 ②转染试剂和动物。 ③进行注射的器材。 2.可以转染的核酸都有什么?细胞实验的核酸可以用吗? 可以转染小片断RNA如siRNA,miRNA,mimic、inhibitor,也可以转染DNA。进行体外细胞实验的核酸就可以。但要 …
阅读更多 »体内转染(Entranster)与冠状动脉微栓塞问题研究
冠状动脉微栓塞(CME)是一种常见的和重要的临床现象,急性冠状综合征(ACS),和那些接受溶栓治疗、经皮冠状动脉介入治疗(PCI)的患者都会出现冠状动脉微栓塞现象。现分享一篇运用体内转染(Entranster-in vivo)方法研究细胞死亡因子4/NF-κB在猪冠状动脉微栓塞引起的心脏功能障碍中的发生机制的文献,以供参考。
阅读更多 »体内转染(entranster)与fbxw5减少可减轻脊髓损伤研究
外伤性脊髓损伤(SCI)是造成死亡和终身残疾的主要原因。然而,对脊髓损伤的病理过程还没有完全了解。F-BOX/WD重复序列包含蛋白5(FBXW5),是scf型E3泛素连接酶复合物的一个亚单位,在调节各种病理方面具有重要作用。然而,对于fbxw5对SCI进展的影响知之甚少。 现分享一篇体内转染(entranster)与fbxw5减少可减轻脊髓损伤 …
阅读更多 »体内转染(Entranster)与杜鹃花总黄酮对心肌缺血/再灌注损伤保护作用及其机制研究
杜鹃花总黄酮(TFR)是从杜鹃花中提取的有效部分,对家兔和大鼠脑缺血和心肌损伤有明显的保护作用。然而,它们的心肌保护机制尚不清楚。 现分享一篇体内转染(Entranster)与杜鹃花总黄酮对心肌缺血/再灌注损伤保护作用及其机制研究的文献,以供参考。
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