脓毒症是一种主要是由于感染而导致的全身炎症反应,可导致多器官功能障碍综合征,死亡率高。虽然在过去十年中脓毒症的预防和控制取得了进展,但脓毒症仍然是ICU(ICU)患者死亡的主要原因,早期诊断和评估是脓毒症患者预后的关键。因此,开发一种生物标志物用于早期诊断和准确的预后评估是必要的。先分享一篇体内转染(En …
阅读更多 »RNA转染与BAFF和BCMA结合诱导多发性骨髓瘤研究
多发性骨髓瘤(MM)是一种无法治愈的血液恶性肿瘤,其特点是恶性浆细胞克隆性增殖,与大多数患者产生单克隆免疫球蛋白有关。细胞因子白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10、干扰素-α和B细胞活化因子(BAFF)在促进MM细胞生长和耐药中的作用已得到明确阐述。越来越多的证据表明BAFF影响MM细胞的生长、存活、迁移和耐药性。B细胞成熟抗原(BC …
阅读更多 »RNA转染(Entranster)与髓源性抑制细胞的抑制潜能研究
髓系来源的抑制性细胞(MDSC)介导了广泛而深刻的免疫抑制,特别是对T细胞功能的影响。在小鼠中,MDSC的特征是细胞表面分子Gr1(包括巨噬细胞和中性粒细胞标志物Ly6C和Ly6G)和CD11b的表达;在人类中,MDSC通常是CD11b+CD33+HLA-DR2。小鼠CD11b+Gr1+细胞群由两个亚群组 …
阅读更多 »ECL发光液(Enlight)与五味子醇乙促进肝再生研究
肝再生是肝损伤后恢复的重要过程,是肝部分切除术(PHx)后的一种很有前景的临床策略。五味子醇乙(Schisandrol B,SOLB)是从华中五味子提取的一种生物活性成分,对小鼠药物性肝损伤具有明显的肝保护作用。然而,SOLB对PHx肝再生的影响尚不清楚。现分享一篇ECL发光液(Enlight)与五味子醇乙促进肝再生研究的文献,以供参考。
阅读更多 »客户:做293T细胞转染,遇到了单转质粒过表达没有共转质粒过表达高是怎么回事?
回答: 1. 启动子竞争与转录因子的“稀释” 如果你在共转染中加入的是一个非表达质粒(载体骨架)或特定的辅助质粒,目标表达量反而增高,可能是因为单转染时目标质粒浓度过高,导致细胞内的转录因子被“过度征用”或者触发了细胞的应激机制。 适当的质粒比例:有时候少量的质粒反而能获得更稳定的转录效率,避免了转录机器的饱和。 2. 辅因子或辅助蛋白的协同作用(核心原因) …
阅读更多 »酶反应纳米降落伞用于靶向miRNA递送:一种针对急性肝肾损伤的保护策略
英文标题:Enzyme-Responsive Nanoparachute for Targeted miRNA Delivery: A Protective Strategy Against Acute Liver and Kidney Injury 期刊与影响因子 期刊名称: Advanced Science (Wiley出版社) 影响因子: 14.3 ( …
阅读更多 »测序正确是不是说明shRNA构建没有问题
测序正确是一个重要的验证步骤,但它不能完全说明shRNA构建没有问题。下面我会具体说明为什么。 测序正确说明了什么? shRNA序列(包括发夹结构、目标序列)与设计一致: 如果你对构建后的质粒进行了Sanger测序,序列结果和你设计的shRNA完全一致,这说明你的克隆步骤(连接、转化等)是成功的。这意味着你至少在DNA水平上构建了正确的序列结构。 但这并不代 …
阅读更多 »动物实验系列篇章之三——实验动物的麻醉方法
麻醉(anesthesia)的基本任务是消除实验过程中所至的疼痛和不适感觉,保障实验动物的安全,使动物在实验中服从操作,确保实验顺利进行。 一、常用的麻醉药 (一)常用局部麻醉剂:普鲁卡因,此药毒性小,见效快,常用于局部浸润麻醉,用时配成0.5%~1%;利多卡因,此药见效快,组织穿透性好,常用1%~2%溶液作为大动物神经干阻滞麻醉,也可用0.25%~0.5% …
阅读更多 »提高慢病毒感染细胞效率的方法
可使用病毒感染增强剂envirus提高病毒的感染效率,下面以慢病毒为例,说一下实验过程。 1.提前一天细胞铺板 提前一天将细胞种植在24孔板中,以感染时细胞融合度在50%左右为宜(悬浮细胞根据需要调整,不要采用过高的细胞密度)。 2.感染 ⑴将2ul的Envirus-LV用25μl无血清稀释液稀释,充分混匀,制成Envirus-LV稀释液。4℃静置5分钟。 …
阅读更多 »腺病毒实验常见问题
1、腺病毒载体对目的基因的长度是否有要求? 有要求。对E1和E3双缺失的腺病毒载体,比如AdMax的Kit C、Kit D等,其总包装的外源片断要求小于8 kb。而对于只有E1缺失或E3缺失的载体,比如Kit A、Kit B等,外源片断要求小于5 kb。注意,外源片断指包括启动子、外源基因和poly A等在内的整个插入片断。 2、如何提高腺病毒的活性? 提高 …
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