英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
PKC-β抑制剂Ruboxistaurin（RBX或βLY333531）可防止糖尿病肾和视网膜微血管并发症。然而，RBX对糖尿病心肌微血管功能的影响尚不清楚。先分享一篇运用siRNA转染（Entranster）的方法与PKC-β抑制剂对糖尿病大鼠心脏微血管功能研究的文献，以供参考。
阅读更多 »质粒被酶切过还可以电转吗？
可以，但得分情况来看： 如果质粒是线性化了（即被酶切成线状DNA）： 可以电转，但是效率明显低于超级螺旋质粒（超螺旋 plasmid，通常是未切割、天然状态下的质粒结构）。 线性质粒在细胞内容易被核酸酶降解，稳定性和转化成功率比超螺旋质粒低很多。 有些时候，比如做基因组编辑（CRISPR knock-in）、整合型表达载体（需要基因组插入时），反而故意使用线 …
阅读更多 »细胞DNA转染效率低的原因
DNA转染效率低的原因可从以下几方面找： 1.质粒DNA或混和液中含有血清。 对策：用无血清培养基或Opti-MEM培养基。 2.质粒DNA和转染试剂的比率不是最优 对策：对大多数细胞而言，质粒DNA和转染试剂的比例为1:2-1:3，一般要做优化实验，比例从1:0.5-1:5 逐一检测。 3.质粒DNA 已部分降解或质量不够好 对策：用好的质粒纯化试剂确保质 …
阅读更多 »细胞电转染实验注意事项
选择合适的电场强度 合适的电场强度对于电转染实验非常重要，电场强度不能过高，过高会增加细胞的死亡率；也不能过低，过低不能增加膜的通透性或在膜上形成小孔。不同细胞系具有不同的最佳场强值，实验前应测定所转染细胞系的最佳电场强度。 细胞的选择 用于电转的细胞一般选取处于对数生长期的细胞（15代以内，传代后2d）。因为处于对数生长期的细胞分裂旺盛，表面结构致密比稳定 …
阅读更多 »DNA转染与RAB31沉默对骨肉瘤细胞增殖和迁徙影响研究
骨肉瘤（Osteosarcoma，OS）是人类原发性恶性骨肿瘤中最常见的一种类型，具有远距离侵袭和局部侵袭的潜在倾向。OS主要见于青少年儿童，首次发病多为15-19岁。骨肉瘤是一种侵袭性恶性肿瘤，起源于间充质（因而是肉瘤）的原始转化细胞，表现为成骨细胞分化和产生恶性骨样。现分享一篇DNA转染（entranster）与RAB31沉默对骨肉瘤细胞 …
阅读更多 »Cell Death & Disease | 南京医科大学孙秀兰教授团队报道：缺血性中风的新型治疗策略
孙秀兰教授团队在《Cell Death & Disease》期刊上发表的“Neuronal extracellular vesicle derived miR-98 prevents salvageable neurons from microglial phagocytosis in acute ischemic stroke”文章揭 …
阅读更多 »CCK8试剂的保存条件
在避光条件下CCK8 试剂在4℃可保存一年。如果需要保存较长时间的话，推荐在-20℃下保存。但是CCK8若反复解冻和冰冻将会增加空白吸收，从而影响检测结果，若经常使用可将试剂存放在4℃冰箱内保存。 如需了解更多关于cck8产品的信息，请点击https://www.engreen.com.cn/cck-8-kit
阅读更多 »ECL发光液（enlight）与褪黑激素降低吸烟引起的高血糖研究
吸烟是一种不健康的生活习惯。糖尿病是多因素的，与环境因素和生活方式有关。值得注意的是，糖尿病似乎受到吸烟的严重影响，包括稳态模型评估在内的临床流行病学调查表明吸烟可能会干扰血糖平衡，但吸烟对高血糖和β细胞的作用机制尚不清楚。现分享一篇ECL发光液（enlight）与褪黑激素降低吸烟引起的高血糖研究的文献，以供 …
阅读更多 »体内转染与microRNA-155和对乙酰氨基酚诱导的肝脏炎症研究
人体肝脏承担着多种任务，包括解毒，代谢废物的排出、营养摄取和储存、总能量代谢和重要血清蛋白的分泌。其特殊功能使肝脏成为一个极易受到毒性损伤的器官，可能引发肝脏炎症和随后的纤维化和终末期组织损伤。在所有肝毒性化学损伤中，对乙酰氨基酚（APAP）过量被认为是西方国家急性肝衰竭的最常见原因。虽有报道称，美国50%以上的急性肝衰竭病例都与APAP中毒有关 …
阅读更多 »电穿孔转化感受态E.coli TG1细胞的制备
一、材料和试剂 恒温旋转式摇床 三角烧瓶（容量为1或2L） 50ml灭菌离心管 低温高速离心机 SB培养基 细菌培养用胰化蛋白胨 20g 细菌培养用酵母提取物 5g NaCl 0.5g 去离子水 950ml 250mmol/L KCl溶液 10ml 以5N …
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