英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
肺癌是最常见的恶性肿瘤之一，是全世界范围内恶性肿瘤死亡原因的首位，非小细胞肺癌约占肺癌病例的80%。肺癌被认为是一种遗传疾病，内源性致病基因的异常表达导致基因组的不稳定性，从而增加癌细胞的运动性和侵袭性。尽管可以成功治疗原发性恶性肿瘤，但仍有四分之一以上的患者在术后复发和远处转移。现分享一篇运用体内转染（Entranster-in vivo）的方 …
阅读更多 »siRNA转染（engreen）与树突状细胞的表观遗传修饰研究
根据不同的环境，树突状细胞（DC）可能变现为活跃或耐受性，但表观遗传修饰是否参与这些过程鲜为人知。现分享一篇siRNA转染（Entranster-R4000）与树突状细胞的表观遗传修饰研究的文献，显示表观遗传修饰可以调节人体单核细胞来源的DCs（DC）分化为活性或耐受DC。
阅读更多 »RNA转染（Entranster）与三氯乙烯和肝癌发生研究
三氯乙烯（TCE）是一种挥发性有机化学试剂，已广泛应用于工业有机溶剂中，是大气、土壤、地下水和食品中的常见污染物。由于肝脏是主要的TCE靶器官之一，TCE引起的肝损伤在职业工作者中经常被报道，TCE暴露被怀疑与肝癌的风险增加有关。在动物实验中，TCE处理可诱导小鼠肝细胞癌（HCC），但其机制尚不清楚。现分享一篇RNA转染（Entranster）与三氯乙烯和肝 …
阅读更多 »ECL发光液与TIMP-2对结膜滤过泡疤痕作用研究
滤过术是目前治疗青光眼的主要手术方式之一，功能性滤过泡的形成和维持是其成功的关键。术后伤口愈合包括一系列复杂的动态过程。滤过性手术失败的主要原因是手术区术后成纤维细胞增生、胶原沉积和滤过泡疤痕形成，最终可阻断手术过程中建立的房水引流通道。现分享一篇ECL发光液（Enlight）与金属 …
阅读更多 »ECL发光液（enlight）与结直肠癌中硼替佐米抗癌活性研究
多种化疗药物通过激活内源性凋亡信号通路促进肿瘤细胞死亡。这条通路是由线粒体功能障碍调节，这是通过一个复杂的过程，受B细胞淋巴瘤2‑（Bcl‑2）家庭成员和其他细胞蛋白之间复杂的相互作用所控制。Bcl‑2相关X蛋白（Bax）是一种促凋亡蛋白，是内在的细胞凋亡信号通路的重要组成部分。缺乏bax的患者可能由于内源性凋亡信号通路受损而对化疗不那么敏感。现分享一篇EC …
阅读更多 »体内转染与cflar调节炎症和内质网应激和脑缺血再灌注损伤研究
中风是全球导致死亡和残疾的主要原因。脑缺血再灌注（I/R）损伤以显著炎症和广泛的细胞死亡为特征。多个信号通路在这一过程中发挥着重要作用，识别这些通路中不明确的关键调节因子可能为治疗提供有前景的靶点。casp8和fadd样凋亡调节因子（cflar）在多个器官中表达，可调节炎症。现分享一篇 …
阅读更多 »用伯乐电转仪器，电转CHO-K1 , 密度1*10^7次方，方波，0.4口径杯子，300v电压，950毫安电阻率，20ms脉冲，加入20ug质粒，2天后细胞存活率是95%，最后电转染效率只达到30%，问如何提高转染效率？还有个问题，他根据文献资料在电转前，是把杯子和细胞在低温下冰浴，但是说明书说恢复到室温再电转，问是因为这个原因导致效率低吗？
下面把你给的条件先“翻译”成关键参数，方便对症下药： 细胞：CHO-K1，约 1×10^7 cells/mL； 杯子：0.4 cm 间隙； 脉冲：方波，300 V，20 ms，1 次脉冲（相当于 750 V/cm）； DNA：20 μg 质粒； 结果：存活率 95%，转染效率 30%； 另外：细胞和电转杯在冰上，未回温到室温就电转。 一、效率偏低的主要可疑点 …
阅读更多 »siRNA转染效率不理想的原因有哪些？
siRNA转染效率不理想，常见的原因有： 1. RNA与转染试剂比例不佳 由于RNA序列差异、合成条件不同以及是否带有荧光等标记，决定了RNA和转染试剂在不同情况下会有不同的最佳条件，建议先进行预实验优化。 2. 细胞密度不佳 调整细胞密度到转染时汇合度为20-40%。成功转染siRNA的细胞会产生目标基因表达下调，但未成功转染的细胞却不受影响，这时转染效率 …
阅读更多 »体内转染（Entranster）研究囊型包虫病相关蛋白
囊型包虫病（包虫病），是由细粒棘球绦虫引起的一种被忽视的热带疾病，可造成数百万人发病及死亡，同时给全球的畜牧业带来巨大的经济损失。寄生虫中tetraspanin家族蛋白已成为与宿主寄生病状态相互作用的重要分子，也有利于疫苗和诊断试剂的发展。现分享一篇利用体内转染方法（Entranster-in vivo）研究囊型包虫病相关蛋白的文献，此方法新 …
阅读更多 »体内转染与环状非编码RNA减少基因脱靶效应研究
环状RNA在许多生物系统中被发现。它们大多被认为是microRNA的分子“海绵”，具有许多未知的生物学活性。小干扰RNA作为许多非编码RNA之一，已成为基因表达调控和药物治疗的重要工具。虽然由siRNA介导的靶mRNA裂解具有高度的序列特异性，意外“脱靶”沉默内源基因在细胞中也观察到，这限制了siRNA的进一步应用。脱靶效应的siRNA也能诱导多种细胞凋亡。 …
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