英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）是一种常见且复杂的疾病，具有严重肝脏疾病的高风险。尽管具有如此公众和临床健康的重要性，目前很少有有效的治疗方法可用于NAFLD。现分享一篇体内转染（entranster）与RIP3的缺失和非酒精性脂肪性肝病研究的文献，以供参考。
阅读更多 »DNA转染与基于de novo设计蛋白DS119的TNFa结合蛋白合理设计研究
蛋白质-蛋白质相互作用的合理设计是创造新型蛋白质药物、诊断探针或调节细胞信号通路的有力工具。SH3和PDZ结构域等小型模块化支架在调节蛋白质相互作用中起着重要作用，因此这些结构域在蛋白质设计中的应用已被广泛研究。De novo蛋白质设计为工程定制蛋白质功能提供模板，为合成生物学研究提供正交蛋白质相互作用网络。已经开发出各种计算方法来引入已知蛋白 …
阅读更多 »Hela细胞的电转染条件是什么？
使用Entranster-E电转液与指数衰减脉冲电转仪时Hela细胞的电转染条件是： 对于0.2 cm电转杯，细胞密度为3×10^6 cells/ml，DNA用量为2μg，电转液体积为100μl，电压为130V， 电容为950μF。 对于0.4 cm电转杯，细胞密度为3×10^6 cells/ml，DNA用量为5μg，电转液体积为250μ …
阅读更多 »Plos one 2015：肺癌细胞凋亡的调控——ENTPD5
肺癌是发病率和死亡率增长最快，对人群健康和生命威胁最大的恶性肿瘤之一。近50年来许多国家都报道肺癌的发病率和死亡率均明显增高。 肺癌被认为是一种遗传性疾病，其中异常的内源性致病基因的表达造成基因组不稳定，增强肿瘤细胞的活力和侵袭性。尽管成功治疗原发性恶性肿瘤，仍有在1/4以上的术后患者复发、转移。 ENTPD5是一种内质网酶，水解UDP为UMP，促进蛋白的N …
阅读更多 »siRNA答疑专题总结（上）
Q1：如果慢病毒载体中没有抗性标记，只有GFP，请问还能筛选稳转的细胞传代培养吗？ A1：采用流式分选是流式细胞仪的一个功能，有流式细胞仪就可以了。一般实验室对流式都有专门的人员操作，不需要自己动手。由于没有抗性，需要注意分选过程的无菌操作。 Q2：RNA干扰如果用慢病毒做稳转的细胞株，什么样的目的RNA都可以用来干扰来做稳转的细胞株吗，目的RNA所编码蛋白 …
阅读更多 »ECL发光液常见问题及解答2
4：Western Blot化学发光(ECL)时，胶片上条带很浓怎么办？ 对ECL发光来说，可以减少发光时间和显影时间。对英格恩Enlight发光液来说，可以将压过的膜重新用TBST洗涤10min×3次后重新曝光操作。 5：Western blot化学发光(ECL)时，胶片上条带很弱怎么办？ 对ECL发光来说，可适当延长曝光时间。如果还是不行，增加蛋白的上样 …
阅读更多 »如何达到较高的RNA转染效率？
可从以下几方面进行优化： 1.纯化RNA 在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA，推荐用玻璃纤维结合，洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸，小的寡核苷酸，蛋白和盐离子。注意：化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化（即PAGE胶纯化）。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致RNA实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在，如 …
阅读更多 »体内转染（entranster）与间充质干细胞减轻蛛网膜下腔出血早期脑损伤研究
活化的小胶质细胞介导的神经炎症被认为是蛛网膜下腔出血（SAH）诱发的早期脑损伤（EBI）发病机制中的一个潜在关键因素。骨髓间充质干细胞（BMSCs）移植的治疗潜力已在多个脑损伤模型中得到证实，并被认为涉及炎症反应的调节。现分享一篇体内转染（entranster）与间充质干细胞减轻蛛网膜下腔出血早期脑损伤研究的文献，以供参考。
阅读更多 »DNA转染与Cep70与γ-微管蛋白和有丝分裂纺锤体组装研究
有丝分裂纺锤体的解除与基因组不稳定性有关，这是肿瘤发生和恶性转化的一个重要方面。为了保证染色体传递的准确性，有丝分裂纺锤体由精细的机制组装，并由动物细胞中的着丝粒组织配制。尤其是，中心体蛋白被认为协同作用以确保准确的纺锤体形成，但分子细节仍有待研究。现分享一篇DNA转染（Entranster）与Cep70与γ-微管蛋白相互作用在有丝分裂纺锤体组装中作用的研究 …
阅读更多 »RNA转染与髓源性抑制细胞的抑制潜能研究
髓系来源的抑制性细胞（MDSC）介导了广泛而深刻的免疫抑制，特别是对T细胞功能的影响。在小鼠中，MDSC的特征是细胞表面分子Gr1(包括巨噬细胞和中性粒细胞标志物Ly6C和Ly6G)和CD11b的表达；在人类中，MDSC通常是CD11b+CD33+HLA-DR2。小鼠CD11b+Gr1+细胞群由两个亚群组 …
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