英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
进行电穿孔实验时.，需确定每种细胞类型的最佳细胞密度，以使电穿孔效率最大化。对于Entranster-E电转染试剂来说，在含电转试剂的终体系中，电穿孔时的细胞密度一般在1-10×106细胞/ml范围内。对于悬浮细胞，最好是接近10×106细胞/ml的高细胞密度。对于贴壁细胞，建议的细胞密度为1-5×106 …
阅读更多 »同样是慢病毒感染，为什么你的感染效率那么低？
在慢病毒感染细胞过程中，会遇到哪些问题呢？ 1.在细胞感染时， MOI是一个非常重要的指标，如何确定MOI值呢？ MOI:复感染指数，是指病毒对细胞的感染能力，MOI越高，细胞越难被感染。通常把某株细胞有80%被感染时所用的病毒颗粒数和细胞数目的比值作为该株细胞的MOI。 MOI=（病毒滴度×病毒体积）/细胞数目 感染条件及MOI的选择原则： 1. 在细胞形 …
阅读更多 »问：现在是将构建好的质粒电转入到自制的感受态细胞里，质粒有10000bp，是90μL感受态细胞中加3.5μ质粒。我之前有电转过6000多bp的质粒，过夜培养可以长菌的。但是这个10000bp的质粒过夜培养没有单菌落，延长培养时间后有个别单菌落，但是挑单菌落到LB中并不浑浊。这种情况我是应该调整一下电转程序还是改一下加入质粒的量呢？
以下是详细的优化建议： 优化质粒用量（首要调整）： 问题： 你目前使用的是3.5µL质粒加入90µL感受态细胞。关键在于质粒的浓度（ng/µL），而不是体积。 3.5µL 对于90µL感受态细胞来说体积不小，如果质粒浓度较高，实际DNA量可能大大超过电转最优范围。 原理： 过量的DNA会导致电击时产生过多的热量和离子效应，严重降低转化效率，尤其对大质粒（&g …
阅读更多 »老年小鼠术后认知障碍机制研究：一种新的机制和治疗靶点
英文标题： CircITSN1/EIF4A3/Itsn1 axis mediates postoperative cognitive dysfunction in aged mice: A novel mechanism and therapeutic target 影响因子 该文章发表于 《Molecular Therapy: Nucleic Acids》 …
阅读更多 »ECL发光液（Enlight）与小鼠DSS诱导的结肠炎研究
炎症性肠病（IBD）与遗传背景、免疫系统和生活方式，包括饮食和其他环境因素有关。它包括溃疡性结肠炎（UC）和Crohn病（CD），以肠慢性炎症为特征。在过去的半个世纪里，IBD的全球发病率稳步上升。有几种药物用于治疗IBD，包括氨基水杨酸盐、皮质类固醇、抗生素和免疫调节剂。然而，这些药物不仅对IBD患者具有有益的作用，而还具有显著的副作用，因此 …
阅读更多 »细胞增殖检测的最佳方法——CCK8
CCK8, Cell Counting Kit-8，CCK-8试剂含有WST-8（化学名：2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐），是近年新开发的一种更新的水溶性四唑盐检测，原理与WST-1类似：在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯（1-Methoxy PMS）的作用下被细胞线粒体中的脱氢酶还 …
阅读更多 »请问蛋白半衰期30小时，siRNA转染后大约多久收样合适呢？
既然目标蛋白的半衰期是30小时，说明它在细胞中相对稳定，也就是说，蛋白不会很快降解。 在使用siRNA干扰该蛋白的表达时，有几个关键时间点需要考虑： 一般siRNA作用流程： 转染后6–12小时：siRNA开始被细胞利用，mRNA水平开始下降。 24–48小时：mRNA水平通常显著降低（具体情况因靶基因和细胞类型而异）。 48–72小时：蛋白水平逐步下降，尤 …
阅读更多 »ECL发光液（enlight）与羟基氯喹和自噬体及宫颈癌SiHa细胞研究
羟基氯喹（Hydroxychloroquine，HCQ），氯喹的羟基化类似物，是一种抗疟原虫溶酶体抑制剂，它抑制溶酶体酸化引起的自噬，并随后阻断自噬体与溶酶体的融合，从而导致自噬体的积累，从而加速肿瘤细胞的死亡。现分享一篇ECL发光液（enlight）与羟基氯喹和自噬体及宫颈癌SiHa细胞研究的文献，以供参考。
阅读更多 »动物体内转染技术可以做什么？
使用动物体内转染专用试剂Entranster-in vivo进行动物体内转染实验可以： ● 代替基因敲除动物，实验从数月缩短到3天，成本从数万减少到几千。 ● 代替转基因动物，动物数量任意，不用担心动物死亡，可任意重复实验。 ● 代替病毒感染动物，效率更高，可以做包括神经系统内到任意器官，全身器官。 ● 可转任意核酸，基因敲除，转基因动物，病毒感染动物无法进 …
阅读更多 »导师再也不用担心我的体内转染实验了
EntransterTM-in vivo是英格恩生物公司（Engreen Biosystem Co,Ltd.）最新研发合成的用于动物体内转染的转染试剂。 作用原理： EntransterTM-in vivo体内转染试剂，通过纳米技术合成，非脂质体，通过物理作用与核酸结合，浓缩包裹核酸，从而保护核酸免受免疫系统破坏，并通过物理作用将核酸富集在细胞表面，增强核酸 …
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