为了达到高的siRNA转染效率,在转染实验过程中,需要注意以下几点: 1.纯化siRNA siRNA的浓度和纯度对转染实验非常重要。为得到高纯度的siRNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白和盐离子。注意:化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化(即PAGE胶纯化)。 2.避免RNA酶污染 微量的RN …
阅读更多 »体内转染与细胞死亡因子4/NF-κB和猪心脏功能障碍研究
冠状动脉微栓塞(CME)是一种常见的和重要的临床现象,急性冠状综合征(ACS),和那些接受溶栓治疗、经皮冠状动脉介入治疗(PCI)的患者都会出现冠状动脉微栓塞现象。现分享一篇运用体内转染(Entranster-in vivo)方法研究细胞死亡因子4/NF-κB在猪冠状动脉微栓塞引起的心脏功能障碍中的发生机制的文献,以供参考。
阅读更多 »ECL发光液的选择
做western-blot实验时,选择一款好的发光液对实验的成功很重要,否则很容易发生各种问题,如淬灭,背景高,不灵敏,发光时间短等。比如淬灭,我觉得Western Blot“淬灭”的原因主要在两方面:含HRP的抗体和发光试剂。由于长期应用某种发光试剂,人们多注意了抗体,不知道发光试剂其实也会对实验结果造成 …
阅读更多 »RNA转染与桥本甲状腺炎患者T辅助细胞1型细胞研究
桥本甲状腺炎(Hashimoto’s thyroiditis ,HT),又称慢性淋巴细胞性甲状腺炎,是一种器官特异性自身免疫性疾病,特点是甲状腺实质淋巴细胞浸润,弥漫性甲状腺肿大和自身抗体升高的升高,主要包括抗甲状腺球蛋白抗体(TGAb)和甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)。HT现在被认为是最常见的自身免疫性疾病,常与其他自身免疫性疾病相关,如G …
阅读更多 »高脂饮食与代谢紊乱机制研究(IF13.75)
标题:Short-term and long-term high-fat diet promote metabolic disorder through reprogramming mRNA m6A in white adipose tissue by gut microbiota 期刊:Microbiome 影响因子:2025年的影响因子为13.75 文献 …
阅读更多 »miR-200b抑制肾细胞癌转移及靶基因研究
标题: MicroRNA-200b is downregulated and suppresses metastasis by targeting LAMA4 in renal cell carcinoma 期刊: EBioMedicine 影响因子: 6.68 研究背景: 肾细胞癌(RCC)的转移是导致患者死亡的主要原因。本研究旨在探索与RCC转移相关的m …
阅读更多 »电转染实验过程影响因素
1 电场参数 电场是电转染的重要因素,细胞在电场的作用下,膜通透性增加或是形成小孔,以完成转染过程。因此电场强度是应该被优化的主要参数。电场强度不能过高,过高会增加细胞的死亡率;也不能过低,过低不能增加膜的通透性或在膜上形成小孔。因此,一个适宜的电场强度至关重要。 不同细胞系具有不同的最佳场强值,其确定方法除了实验直接测定比较不同场强下转染率的高低外,还可以 …
阅读更多 »ECL发光液(enlight)与间充质信号转导和牙源性上皮干细胞稳态研究
在小鼠中,出生后切牙的持续生长是由位于切牙的近端的牙乳头间充质细胞和牙上皮干细胞协调这两个群体的多能祖细胞所协调的。但两者之间合作的分子机制在很大程度上是未知的。现分享一篇ECL发光液(enlight)与间充质信号转导和牙源性上皮干细胞稳态研究的文献,以供参考。
阅读更多 »体内转染(engreen)与幽门螺杆菌感染引起肝胰岛素抵抗研究
胰岛素抵抗与低度炎症状态密切相关,其特征是胰岛素在骨骼肌和脂肪组织中的葡萄糖吸收和肝葡萄糖生成方面的功能受损。幽门螺杆菌已感染世界50%以上的人口,其感染与全身慢性炎症密切相关。胃是幽门螺杆菌感染的主要部位,可引起胃炎、胃溃疡甚至胃癌。然而,幽门螺杆菌感染在周围组织中的作用尚不清楚。流行病学研究表明,幽门螺杆菌感染患者血糖调节受损,2型糖尿病(t …
阅读更多 »体内转染与腹膜间质细胞的上皮细胞凋亡转化研究
腹膜纤维化(PF)是一种公认的与持续性非卧床腹膜透析治疗相关的并发症,其特点是早期可逆转的上皮-间质转换(EMT)。现分享一篇体内转染(entranster)与LncRNA AK089579抑制腹膜间质细胞的上皮细胞凋亡转化研究的文献,以供参考。
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英格恩生物技术博客 生物实验干货分享