英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
鼻腔肿瘤是一种罕见的恶性肿瘤，每年全球发病率约为1/10万。组织学上，鼻腔肿瘤分为肉瘤、嗅神经母细胞瘤、粘膜黑色素瘤和癌。鼻腔肿瘤中55%以上为癌，包括鳞状细胞癌（SCC）、腺癌和腺样囊性癌，倒置乳头状瘤（IP）是鼻腔和鼻窦常见的良性肿瘤。IPS的恶性转化率小于27%，但其转化过程中涉及的组织形态学、免疫组化及生物学标记尚不清楚。因此，探索ips …
阅读更多 »ECL发光液（enlight）与LncRNA拯救肝损伤并促进肝细胞增殖研究
肝损害对人类健康产生不利影响，在世界范围内发病率很高。它可由多种有毒物质引起的，例如酒精和活性氧。持续性肝损伤可导致大范围肝细胞损害，伴随严重纤维化和不可逆性肝硬化，常导致死亡。影响肝损害的很多因素现在仍不清楚，这阻碍了治疗。因此，更好地了解肝损伤的相关因素对于治疗相关的肝脏疾病至关重要。现分享一篇ECL发 …
阅读更多 »使用带有GFP荧光标记的慢病毒感染细胞，想要检测GFP阳性率，通常用什么方法？
如果您使用的是带有GFP荧光标记的慢病毒感染细胞，想要检测GFP阳性率，通常情况下可以通过流式细胞仪来实现，步骤如下： 收集细胞：首先收集感染后的细胞，并用适当的缓冲液进行重悬。 去除死细胞：可以通过加PI（碘化丙啶）或7-AAD等染料来排除死细胞，这样有助于提高检测的准确性。 流式检测：使用流式细胞仪时，选择FITC通道（通常是FL1通道），因为GFP的荧 …
阅读更多 »都说RNAi很容易降解，转染效率很低，是真的吗？
RNAi就是利用降解双链RNA的酶系统，人工引入一段和目标RNA互补的序列，这样，在细胞内形成双链RNA，诱发降解机制，使目标RNA降解，无法被进一步翻译。 在转染过程中，有人就在担心，dsRNA的稳定性是相对于单链RNA而言的！RNA怎么办？ RNAi中，标准的非修饰的siRNA确实容易降解，这不仅在保存过程中，而且在转染过程中。对siRNA的降解，可以合 …
阅读更多 »RNA转染（Entranster）与膝关节骨性关节炎中WISP-1调控机制研究
随着生活、工作方式的改变及社会人口的老龄化，骨关节退行性病变已成为高发疾病，其中代表性疾病之一为骨性关节炎（osteoarthritis, OA）。最近研究表明：WISP-１ 具有促进关节软骨破坏的作用 。WISP-１ 在正常软骨和滑膜中几乎不表达，而在退变的软骨及滑膜（如OA）中WISP-１异常增高，通过诱导ＭＭＰs及aggrecanases的分泌而促进胶 …
阅读更多 »体内转染（entranster）与肿瘤防治药物及其应用
8-氧脱氧鸟苷三磷酸是一种能够在体内触发DNA突变的核苷酸。无论是在正常的代谢活动中，还是在外源性刺激下，细胞都会产生大量的活性氧和氧自由基，其中-oh是高度活性的，可以破坏生物大分子，如碳水化合物、核酸、脂类和氨基酸。现分享一篇体内转染（entranster）与肿瘤防治药物及其应用的文献，该文献中的发明涉 …
阅读更多 »体内转染（engreen）与幽门螺杆菌感染引起肝胰岛素抵抗研究
胰岛素抵抗与低度炎症状态密切相关，其特征是胰岛素在骨骼肌和脂肪组织中的葡萄糖吸收和肝葡萄糖生成方面的功能受损。幽门螺杆菌已感染世界50%以上的人口，其感染与全身慢性炎症密切相关。胃是幽门螺杆菌感染的主要部位，可引起胃炎、胃溃疡甚至胃癌。然而，幽门螺杆菌感染在周围组织中的作用尚不清楚。流行病学研究表明，幽门螺杆菌感染患者血糖调节受损，2型糖尿病（t …
阅读更多 »体内转染与CLU4A的抑制缺氧/复氧损伤中的心脏保护作用研究
CLU4A在各种人类癌症中被鉴定为原癌基因。CLU4A在心肌缺血/再灌注损伤中表达上调，但CLU4A在心肌缺血/再灌注损伤中的确切作用尚不清楚，需要研究CLU4A在心肌缺血/再灌注损伤中的潜在机制。现分享一篇体内转染（engreen）与CLU4A的抑制缺氧/复氧损伤中的心脏保护作用研究的文献，以供参考。 文 …
阅读更多 »做嘌呤霉素筛选滴定时，感染两天，puro杀3天，5天细胞长得很密原因和解决方法，另外镜下数整个孔的克隆数感觉困难，能换成镜下视野面积与孔面积比换算吗？
问题1：“感染两天，puro杀3天，5天细胞都长很密” 原因： 细胞分裂快（比如 293T）→ 在5天内即使有筛选，还是会长满。 感染率高 → 很多细胞表达抗性，嘌呤霉素筛选不够“稀释” 建议： 缩短时间：感染 24h 后就加 puromycin，第 2 天开始杀，杀 2–3 天就足够。 更稀释的病毒梯度：推荐加大稀释倍数：1:1000，1:5000，甚至 …
阅读更多 »病毒转染原理及步骤
病毒转染原理及步骤 在细胞相关的实验操作中，对于一些按常规方法难以转染甚至无法转染的细胞，通过病毒介导的实验能够大大提高基因的转导效率，以达到目的基因的高效瞬时表达。 病毒转染包括以下步骤：1构建载体 2包装提纯病毒 3感染靶细胞。以慢病毒为例。 慢病毒（Lentivirus）载体是以HIV-1（人类免疫缺陷I型病毒）为基础发展起 …
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