弓形虫是一种普遍存在的、专性的细胞内病原体,可感染包括人在内的几乎所有的恒温动物。目前尚未有特效药物或疫苗能够防控弓形虫病。钙依赖性蛋白激酶(CDPKs)广泛的存在于植物、绿藻和顶复门原虫中,且不存在哺乳动物中。CDPKs在钙离子的调控下,主要参与入侵、胞内增值、逸出、运动和蛋白分泌等重要生物功能的调节。由于其不存在于哺乳动物中,CDPKs成为 …
阅读更多 »RNA转染(Entranster)与睾丸生殖细胞肿瘤研究
睾丸生殖细胞瘤(Testic..cell tumors,TGCTs)是青少年和青年男性最常见的实体瘤之一,约占2012年全世界20~39岁男性肿瘤的8.9%。肿瘤生长受癌细胞与肿瘤微环境的串扰调制。最近的进展表明,肿瘤细胞中的miRNA功能障碍可以调节肿瘤微环境以间接决定其进展。然而,这一过程在睾丸生殖细胞肿瘤(TGCTs)中知之甚少。现分享一篇RNA转染( …
阅读更多 »腺病毒实验常见问题
1、腺病毒载体对目的基因的长度是否有要求? 有要求。对E1和E3双缺失的腺病毒载体,比如AdMax的Kit C、Kit D等,其总包装的外源片断要求小于8 kb。而对于只有E1缺失或E3缺失的载体,比如Kit A、Kit B等,外源片断要求小于5 kb。注意,外源片断指包括启动子、外源基因和poly A等在内的整个插入片断。 2、如何提高腺病毒的活性? 提高 …
阅读更多 »ECL发光液与Polo样激酶1对端粒酶活性影响研究
端粒的维持受端粒酶活性的调控,包括端粒酶全酶及其相关蛋白。端粒酶的活性在细胞中被精确控制,其失调是癌症的特征之一。端粒酶催化亚单位端粒酶逆转录酶(hTERT)在端粒酶活性中起重要作用。 现分享一篇ECL发光液(enlight)与Polo样激酶1(PLK1)通过影响端粒酶逆转录酶的稳定性上调端粒酶活性研究的文献,以供参考。
阅读更多 »体内转染(entranster)与脂多糖诱导的急性肺损伤研究
急性肺损伤(Acute Lung Injury,ALI)及其严重形式,即急性呼吸窘迫综合征(ARDS),是由肺炎、败血症、外伤和/或吸入引起的肺部炎症性疾病。急性肺损伤和急性呼吸窘迫综合征导致重症监护病房的发病率和死亡率显著升高。尽管机械通气和支持性护理的进展提高了急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征患者的生存 …
阅读更多 »RNA转染(entranster)后沉默现象不明显怎么办?
可能原因: 1. RNA与转染试剂比例不佳。可进行预实验优化。 2. 细胞密度不佳。 调整细胞密度到转染时汇合度为20-40%。 3. RNA效率不高。选择最优RNA,并采用已知高效的RNA做对照。 4. RNA酶污染。建议无RNA酶和内毒素的吸头、离心管和溶液等材料和实验器具。 5. 转染后培养时间不够。在mRNA水平可以到48 小时以后验证结果,在蛋白水 …
阅读更多 »细胞电转染实验的几点建议
1. 电场强度要合适 合适的电场强度对于电转染实验非常重要,电场强度不能过高,过高会增加细胞的死亡率;也不能过低,过低不能增加膜的通透性或在膜上形成小孔。不同细胞系具有不同的最佳场强值,实验前应测定所转染细胞系的最佳电场强度。 2. 细胞状态要好 用于电转的细胞一般选取处于对数生长期的细胞(15代以内,传代后2 …
阅读更多 »是否有嘌呤霉素筛选标记的病毒的病毒滴定protocol,看了好多好多不一样的?这个有比较权威又大众的滴度操作流程吗?
关于使用嘌呤霉素筛选标记(puromycin resistance marker)的慢病毒(lentivirus)或逆转录病毒(retrovirus)进行病毒滴定(virus titration)的 protocol,确实有不少不同的做法,这是因为不同实验室根据自己的系统和需求进行了优化。但是,有一些权威且广泛应用的标准流程可以作为通用参考,下面是整理的一个 …
阅读更多 »RNA转染(Entranster)与STAT3和髓源性抑制细胞研究
髓源性抑制细胞(MDSC)是一种免疫抑制性网络的主要组成部分。STAT3在调节MDSC方面有重要作用。现分享一篇用RNA转染试剂Entranster-R4000转染miRNA与STAT3和MDSC研究的文献,研究中指出,STAT3的表达可能是由miR-17-5p和miR-20a调节的,研究结果表明miR-17-5p和miR-20a可能通过阻断S …
阅读更多 »体内转染(entranster)与荷花碱通过调节nrf2信号对缺血性卒中线粒体的保护作用研究
缺血性中风是导致死亡和长期残疾的主要原因。为了克服临床治疗的局限性,迫切需要有前景的神经保护化合物。神经保护剂仅限于单一靶向药物,这进一步限制了其临床疗效。由于大脑特殊的能量需求,以线粒体为中心的能量微环境是缺血性脑卒中复杂病理学研究的新热点。现分享一篇体内转染(entranster)与荷花碱通过调节nrf2信号对缺血性卒中线粒体的保护作用研究的文献,以供参 …
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