英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
1.转染试剂 转染中要额外注意的就是转染试剂应该是确认无RNase污染的，而且也尽量避免和质粒DNA转染混用—即使试剂本身兼容DNA和RNA转染，因RNA与DNA大小不同，转染条件不同，所需的试剂也应不同，所以RNA专用的转染试剂会更好一些。比如Entranster-R4000. 2.RNA转染时RNA的用量 …
阅读更多 »RNA转染效率低的原因是什么？
RNA转染效率低，可能的原因： · 转染试剂不适合。建议选择RNA专用转染试剂，如Entranster试剂。 · 转染试剂和RNA的量不够，或者比例不对。优化实验条件，调整试剂和RNA用量，优化二者比例。 · 检测时间有问题。适当调整检测时间。 · RNA质量问题。选择纯度高的RNA。 · 细胞状态不佳。调整细胞状态，调整细胞融合度。
阅读更多 »我总结的western-blot实验经验
我做了很久的WB，最大的一个难点感觉在于样品制备上！蛋白的降解有些时候是你想象不到的，可能出奇的糟糕，也可能完全没事~~如果单独做WB的话，感觉以“快速彻底裂解，先变性后保存”的原则比较有效，尽量选择足够强的裂解液，甚至直接给loading buffer裂解，然后取出部分蛋白定量，其余加入loading buffer100度充分变性，再分装保存。有些时候比蛋 …
阅读更多 »细胞转染效率低的原因分析
细胞转染效率低的原因可从以下几方面找： 1.质粒DNA或混和液中含有血清。 对策：用无血清培养基或Opti-MEM培养基。 2.质粒DNA和转染试剂的比率不是最优 对策：对大多数细胞而言，质粒DNA和转染试剂的比例为1:2-1:3，一般要做优化实验，比例从1:0.5-1:5 逐一检测。 3.质粒DNA 已部分降解或质量不够好 对策：用好的质粒纯化试剂确保质粒 …
阅读更多 »如何提高悬浮细胞的转染效率？
悬浮细胞是指细胞生长不依赖支持物表面，在培养液中呈悬浮状态生长，如淋巴细胞。在实验室经常会遇到悬浮细胞的转染，其和贴壁细胞转染还是有很大不同的。 目前大多数实验室用的是脂质体类的转染试剂，脂质体转染是基于电荷吸引原理，先形成脂质体-DNA复合物，散布在细胞周 …
阅读更多 »从面部识别到行走姿势：解密支付系统的生物识别技术
据科技媒体TechCrunch.com报道，面临着越来越复杂的网络袭击以及各式各样的信用卡诈骗，支付系统产业正尝试将各种生物识别技术加入它们的系统，以加强安全，防止入侵。 根据最近报道，万事达卡正在推出以智能手机“自拍照”验证的面部识别支付服务。目前这个项目正在测试当中。虽然现在用户们仍需同时使用密码，但是不久的将来，仅“自拍照”将足以完成支付。万事达卡表示 …
阅读更多 »手势与手语的神经处理
一项研究提示，手语和手势可能是被人类大脑的不同神经系统处理的。尽管手语和手势都传达了符号含义，但它们被认为在根本上是有区别的。 为了比较参与处理手语和手势的神经系统，Aaron Newman及其同事在一项测试中招募了19名先天性耳聋的美国手语（ASL）母语使用者与19名有听力的非手语英语母语使用者，这项测试的目的是在受试者观看非语言手势、美国手语（ASL）关 …
阅读更多 »western-blot实验影响因素有哪些？
影响western-blot实验的因素有哪些？ 1. 样品质量。所抽取样品的蛋白含量，蛋白变性是否充分等等，还有，蛋白样品的PH值是否在7~8之间。这会直接影响到样品浓缩的效果。此外，蛋白样品是否降解、目的蛋白是否已抽取充分都会对最终结果的可靠性有影响。 2. 凝胶质量。不连续SDS-PAGE胶对凝胶的要求较高，分离胶的PH值应在8.8左右，而浓缩胶的PH应 …
阅读更多 »贴还是不贴——美国转基因标识风波
在美国，关于转基因食品的争论主要集中在是否要标识上。关于禁止各州强制标识转基因食品的法案，日前获得美国国会众议院通过，迈过了最终成为法律的关键第二步。然而，贴还是不贴，美国转基因标识风波仍未结束。 距离新法还有两步 日前，美国众议院以２７５票支持、１５０票反对通过《安全准确的食品标签法案》。根据这一法案，食品企业可不标注产品是否含有转基因成分，不遵循美国某些 …
阅读更多 »质粒DNA转染实验效率影响因素
1， 质粒的大小和质量 线性化还是超螺旋会影响转染结果：超螺旋质粒的转染效率比线性DNA高得多，特别是瞬时转染。而线性化DNA转染的整合几率高。质粒太大了转染会困难一些。毕竟，相对致密、较小的外源异物被细胞内吞的几率要大一些。如果你的质粒正好比较大，又没有经验，选择特别注明可以转大质粒的转染试剂成功几率会高一些。有的转染试剂还会提供一些 …
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