siRNA转染效率不理想,常见的原因有:1. RNA与转染试剂比例不佳 由于RNA序列差异、合成条件不同以及是否带有荧光等标记,决定了RNA和转染试剂在不同情况下会有不同的最佳条件,建议先进行预实验优化。2. 细胞密度不佳 调整细胞密度到转染时汇合度为20-40%。成功转染siRNA的细胞会产生目标基因表达下调,但未成功转染的细胞却不受影响,这时转染效率和总 …
阅读更多 »影响RNA转染实验的因素有哪些?
1. 转染试剂 转染中要额外注意的就是转染试剂应该是确认无RNase污染的,而且也尽量避免和质粒DNA转染混用——即使试剂本身兼容DNA和RNA转染,因RNA与DNA大小不同,转染条件不同,所需的试剂也应不同,所以RNA专用的转染试剂会更好一些。比如Entranster-R4000. 2. RNA转染时RNA的用量 RNA转染的用量必须参考RNA转染试 …
阅读更多 »siRNA细胞转染实验效率低的原因
1. RNA与转染试剂比例不佳 由于RNA序列差异、合成条件不同以及是否带有荧光等标记,决定了RNA和转染试剂在不同情况下会有不同的最佳条件,建议先进行预实验优化。 2. 细胞密度不佳 调整细胞密度到转染时汇合度为20-40%。成功转染siRNA的细胞会产生目标基因表达下调,但未成功转染的细胞却不受影响,这 …
阅读更多 »siRNA细胞转染效率低下的原因
1. RNA与转染试剂比例不佳 由于RNA序列差异、合成条件不同以及是否带有荧光等标记,决定了RNA和转染试剂在不同情况下会有不同的最佳条件,建议先进行预实验优化。 2. 细胞密度不佳 调整细胞密度到转染时汇合度为20-40%。成功转染siRNA的细胞会产生目标基因表达下调,但未成功转染的细胞却不受影响,这 …
阅读更多 »RNA转染(Entranster)与三氯乙烯和肝癌发生的研究
三氯乙烯(TCE)是一种挥发性有机化学试剂,已广泛应用于工业有机溶剂中,是大气、土壤、地下水和食品中的常见污染物。由于肝脏是主要的TCE靶器官之一,TCE引起的肝损伤在职业工作者中经常被报道,TCE暴露被怀疑与肝癌的风险增加有关。在动物实验中,TCE处理可诱导小鼠肝细胞癌(HCC),但其机制尚不清楚。现分享一篇RNA转染(Entranster) …
阅读更多 »RNA转染(Entranster)与JMJD6和p53及结肠癌发生之间关系研究
umonji域包含6(JMJD6)是JumonjiC结构域蛋白家族的一个成员。相比于其他的家庭成员,JMJD6细胞活性仍不明确,其生物学功能仍然是很大的未开发。现分享一篇文献,文献中我报道JMJD6与肿瘤抑制基因p53相关,文献中用RNA转染(Entranster)研究JMJD6和p53及结肠癌发生之间的关系,以供参考。
阅读更多 »RNA转染与Cav3通过Wnt信号通路与骨质疏松大鼠模型骨形成研究
骨质疏松症是一种以骨密度和骨强度降低为特征的疾病,常见于老年人。Caveolin-3(Cav3)是caveolae膜结构域的主要结构蛋白,已被报道可参与细胞信号传导和维持细胞结构。现分享一篇RNA转染(entranster)与Cav3通过Wnt信号通路对骨质疏松大鼠模型骨形成的影响研究的文献,以供参考。 文献地址:https://link.spr …
阅读更多 »siRNA转染(Entranster)与YWK-II蛋白/APLP2稳定性研究
YWK-II蛋白/APLP2是一种进化上保守的蛋白家族的成员,包括淀粉样前体蛋白(APP)和淀粉样蛋白前体蛋白(APLP1)。已经表明YWK-II /APLP2在细胞存活方面可作为Müllerian抑制物(MIS)的一种新的G蛋白偶联受体。然而,调节YWK-II /APLP2蛋白的折叠和稳定性的因素尚未确定。现分享一篇siRNA转染(Entran …
阅读更多 »RNA转染(Entranster)与非霍奇金淋巴瘤细胞敏感性研究
非霍奇金淋巴瘤(NHL)是具有很强异质性的一组独立疾病的总称。依据细胞来源将其分为三种基本类型:B细胞、T细胞和NK/T细胞NHL。临床大多数NHL为B细胞型,占总数70%~85%。NHL对放疗敏感。越来越多的证据表明mirRNA在调节细胞放射敏感性中起重要作用。现上传一篇运用RNA转染试剂Entranster-R4000转染mir-148b在 …
阅读更多 »siRNA答疑专题总结(上)
Q1:如果慢病毒载体中没有抗性标记,只有GFP,请问还能筛选稳转的细胞传代培养吗? A1:采用流式分选是流式细胞仪的一个功能,有流式细胞仪就可以了。一般实验室对流式都有专门的人员操作,不需要自己动手。由于没有抗性,需要注意分选过程的无菌操作。 Q2:RNA干扰如果用慢病毒做稳转的细胞株,什么样的目的RNA都可以用来干扰来做稳转的细胞株吗,目的RNA所编码蛋白 …
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英格恩生物技术博客 生物实验干货分享