英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
YWK-II蛋白/APLP2是一种进化上保守的蛋白家族的成员，包括淀粉样前体蛋白（APP）和淀粉样蛋白前体蛋白（APLP1）。已经表明YWK-II /APLP2在细胞存活方面可作为Müllerian抑制物（MIS）的一种新的G蛋白偶联受体。然而，调节YWK-II /APLP2蛋白的折叠和稳定性的因素尚未确定。现分享一篇siRNA转染（Entran …
阅读更多 »揭秘RNAi，缔造实验神话
用siRNA进行transient transfection不稳定，几代细胞以后，症状就会消失，所以在转染几天（1-3）后要立刻抽提蛋白，进行分析。 用质粒中的shRNA进行转染，如果质粒含有抗生素位点，可以进行筛选，获得较稳定的细胞株系，但需要时间较长 用病毒中的shRNA进行感染（infection），抗生素筛选后，可以获得很稳定细胞株系。 瞬时RNAi …
阅读更多 »细胞siRNA转染有哪些方法？
siRNA导入细胞有以下几种方法：化学转染技术、电穿孔法、磷酸钙共沉淀技术、显微注射和载体导入技术。选择时应该依据实验条件考虑以下因素：细胞对转入方式的承受能力、细胞对病毒侵染的易感性、细胞的生长特性等。对贴壁细胞来说化学转染技术（Entranster）是最为常用的方法，而对悬浮细胞则采用电穿孔法效果较好。
阅读更多 »如何优化细胞RNA转染实验条件？
可从以下几方面进行优化： 1.纯化RNA 在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA，推荐用玻璃纤维结合，洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸，小的寡核苷酸，蛋白和盐离子。注意：化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化（即PAGE胶纯化）。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致RNA实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在，如 …
阅读更多 »RNA转染与髓源性抑制细胞的抑制潜能研究
髓系来源的抑制性细胞（MDSC）介导了广泛而深刻的免疫抑制，特别是对T细胞功能的影响。在小鼠中，MDSC的特征是细胞表面分子Gr1(包括巨噬细胞和中性粒细胞标志物Ly6C和Ly6G)和CD11b的表达；在人类中，MDSC通常是CD11b+CD33+HLA-DR2。小鼠CD11b+Gr1+细胞群由两个亚群组 …
阅读更多 »RNA转染（Entranster）与mir-136诱导骨髓细胞分化研究
免疫细胞谱系规范和功能受祖源和环境因素的影响。免疫细胞，如中性粒细胞、单核细胞和髓系抑制因子细胞在炎症环境中分化的机制尚未完全阐明。现分享一篇RNA转染（Entranster）与mir-136诱导骨髓细胞分化研究的文献，以供参考。
阅读更多 »tRF-Gln-CTG-026改善肝损伤机制重大发现（影响因子：IF 40+）
文献标题：《tRF-Gln-CTG-026 ameliorates liver injury by alleviating global protein synthesis》， 期刊名称：Signal Transduction and Targeted Therapy 影响因子：40+ DOI：https://doi.org/10.1038/s41392-0 …
阅读更多 »RNA转染与mir-155调节胶质瘤细胞增殖和侵袭研究
胶质瘤是成人最常见的原发性恶性脑肿瘤，尽管治疗有所改善，脑胶质瘤患者的预后和生存率仍然非常差。特别是，根据目前WHO脑肿瘤分类，多形性胶质母细胞瘤是最恶性的胶质瘤。探索胶质瘤发生、发展的分子机制，已成为发展胶质瘤新的治疗策略的迫切需求。最近的研究已经报道了脑肿瘤细胞中miRNAs的改变，表明它们在癌基因或抑癌基因中的作用。 现分享一篇RNA转染（Entran …
阅读更多 »RNA转染与大鼠肺辐射损伤中microRNA和mRNA表达谱的整合研究
暴露与辐射中会引起细胞反应，这可能受到基因表达网络的调控。miRNA是一种小的非编码RNA，通过促进mRNA的降解或抑制蛋白质的翻译来调节基因的表达。在放射性肺损伤中miRNA和mRNA的表达模式还不是很清楚，并且miRNA在这个过程中的作用还未有研究。现分享一篇RNA转染（Entranster）与大鼠肺辐射损伤中microRNA和mRNA表达谱的整合研究的 …
阅读更多 »细胞RNA转染实验注意事项
1.纯化RNA 在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA，推荐用玻璃纤维结合，洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸，小的寡核苷酸，蛋白和盐离子。注意：化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化（即PAGE胶纯化）。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致RNA实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在，如皮肤，头发，所有徒手接触过 …
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