丹参酮 IIA(Tanshinone IIA,Tan IIA)是一种从丹参干根中提取的生物活性物质,具有抑制肿瘤细胞增殖和诱导细胞凋亡的作用。然而,Tan IIA在肿瘤细胞凋亡中的作用机制仍有待进一步阐明。现分享一篇运用RNA转染(Entranster)的方法的文献,通过阐明Tan IIA在p53基因缺陷的H1299细胞中的抗肿瘤作用机制,以确定丹参酮IIA …
阅读更多 »ECL发光液与蛋白激酶Nemo样激酶基因重组腺病毒载体的构建与鉴定研究
Nemo样激酶(nemo-likekinase,NLK)属于丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶。在果蝇、线虫、爪蟾等多种生物中都存在NLK的同源蛋白,其结构存在高度的相似性,显示NLK在进化过程中十分保守。研究显示,NLK能够结合并磷酸化一系列转录因子,参与多个信号通路的调节,其中包括与发育过程密切相关的信号途径Wnt和Notch等。Kortenjann等研究发现,NL …
阅读更多 »质粒被酶切过还可以电转吗?
可以,但得分情况来看: 如果质粒是线性化了(即被酶切成线状DNA): 可以电转,但是效率明显低于超级螺旋质粒(超螺旋 plasmid,通常是未切割、天然状态下的质粒结构)。 线性质粒在细胞内容易被核酸酶降解,稳定性和转化成功率比超螺旋质粒低很多。 有些时候,比如做基因组编辑(CRISPR knock-in)、整合型表达载体(需要基因组插入时),反而故意使用线 …
阅读更多 »Frontiers in Pharmacology | 首都医科大学报道:治疗对乙酰氨基酚过量造成肝损伤的新策略
该团队在《Frontiers in Pharmacology》期刊上发表了题为“GLT25D2 Is Critical for Inflammatory Immune Response to Promote Acetaminophen-Induced Hepatotoxicity by Autophagy Pathway”的论文。实验通过RNA …
阅读更多 »shRNA转染后,什么时候做RT-PCR最好?
shRNA转染后,进行RT-PCR的最佳时间取决于多种因素,包括细胞类型、转染效率、shRNA的表达和目标基因的降解速度。一般来说,在转染后的24到72小时内进行RT-PCR是比较常见的时间点。具体来说: 24小时后:在这个时间点,可以开始检测到shRNA的表达以及目标基因的初步下调情况。对于一些高效的shRNA,这个时间点可能已经有显著的基因沉默效果。 4 …
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